食源性致病菌的檢驗(yàn)檢測(cè)

在世界范圍食源性疾病問題都普遍存在，這其中很大程度上都與食源性致病菌有關(guān)系。因此，針對(duì)食源性致病菌的檢驗(yàn)檢測(cè)對(duì)于提高人們的健康水平有著至關(guān)重要的作用。而現(xiàn)代檢測(cè)技術(shù)在不斷發(fā)展的過程也形成了一套相對(duì)較為完整的食源性致病菌的檢驗(yàn)檢測(cè)體系。本文基于此開展研究，對(duì)食源性致病菌最新檢測(cè)技術(shù)及其研究進(jìn)展進(jìn)行簡(jiǎn)述。

傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)

在我國(guó)國(guó)標(biāo)中，傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)仍然是占有重要地位。其檢驗(yàn)檢測(cè)的原理主要是對(duì)樣品中的微生物進(jìn)行增殖，然后利用劃線分離，實(shí)施選擇性培養(yǎng)，進(jìn)而觀察菌落特征，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)目標(biāo)。隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，靈敏度高、特異性強(qiáng)顯色培養(yǎng)基投入到檢測(cè)過程，有效提高了篩選效率。在后續(xù)的生化鑒定過程中，全自動(dòng)微生物鑒定分析系統(tǒng)的使用可以簡(jiǎn)化試驗(yàn)步驟、縮短試驗(yàn)周期，并且能更高效地得出試驗(yàn)結(jié)果。但是，該方法的弊端就在于操作繁瑣，檢測(cè)周期長(zhǎng)，在一些應(yīng)急情況下無法滿足檢測(cè)要求。

免疫學(xué)技術(shù)

ELISA技術(shù)。ELISA技術(shù)是基于免疫學(xué)抗原-抗體特異性結(jié)合的檢測(cè)方法。對(duì)于沙門氏菌檢測(cè)有著較好的檢測(cè)范圍和靈敏度。使用該方法進(jìn)行沙門氏菌的檢測(cè)也需要對(duì)于食品中的微生物進(jìn)行增殖。很多學(xué)者利用該方法針對(duì)多種細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)WLISA技術(shù)可以在24小時(shí)內(nèi)實(shí)現(xiàn)對(duì)多種食源性致病菌。例如，應(yīng)用ELISA原理生產(chǎn)出的mini- Vidas全自動(dòng)免疫分析儀可在2天內(nèi)完成對(duì)沙門氏菌、大腸埃希氏菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌和空腸彎曲菌等細(xì)菌的篩選。

免疫熒光標(biāo)記。該方法屬于食源性致病菌檢測(cè)中的一類新型免疫學(xué)檢測(cè)法，原理上主要是基于特異性抗體敏化的免疫色譜卡片。在具體操作中，僅需要將實(shí)現(xiàn)進(jìn)行增殖后的樣品滴加到免疫色譜卡上，就能夠用肉眼直接觀察結(jié)果。該方法在操作上十分便捷，無需其他設(shè)備輔助，具有較好的適應(yīng)性。雖然同ELISA法一樣需要進(jìn)行樣品的增殖，但增殖后的操作時(shí)間大概僅有10分鐘。

PCR技術(shù)

PCR法是基于核酸的一類檢測(cè)方法，任何一類生物都有特異性的核酸片段，它們通過含有探針的補(bǔ)體核酸片段來進(jìn)行檢測(cè)，通常探針都是含有放射性同位素。該方法在沙門氏菌的檢測(cè)中優(yōu)點(diǎn)在于簡(jiǎn)便、快速、敏感性高和特異性強(qiáng)。近年來，用PCR技術(shù)在食源性致病菌領(lǐng)域發(fā)展很好，且具體應(yīng)用方法也出現(xiàn)了多元化發(fā)展，包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR、逆轉(zhuǎn)錄PCR和電化學(xué)發(fā)光PCR等，并成為一些食源性致病菌的行業(yè)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。

代謝學(xué)檢測(cè)技術(shù)

電阻抗技術(shù)。電阻抗法測(cè)定法是新型的生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)，目前在食品微生物檢測(cè)的領(lǐng)域也有了較好的應(yīng)用。其原理是細(xì)菌在繁殖的過程中，其代謝過程和代謝產(chǎn)物會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基的阻抗發(fā)生變化，通過對(duì)這種變化的檢測(cè)就能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)于相關(guān)微生物的判斷。目前，電阻抗法已被AOAC接收，適用于檢測(cè)食品中細(xì)菌總數(shù)、大腸桿菌和沙門氏菌等。

ATP生物發(fā)光法。ATP是細(xì)胞內(nèi)必需的一種代謝產(chǎn)物，使用熒光蟲素和熒光蟲素酶可使之釋放出能量，產(chǎn)生磷光。而在特定環(huán)境下，細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的ATP含量是相對(duì)固定的。因此，通過對(duì)該磷光的強(qiáng)度檢測(cè)實(shí)現(xiàn)對(duì)于細(xì)菌菌落總數(shù)的判定。由于該方法主要是對(duì)菌落總數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，因此通常用于反映食品受污染的嚴(yán)重程度，具有簡(jiǎn)便、省時(shí)、快速等特點(diǎn)，還可以被用于大量食品樣本中菌污染情況檢測(cè)和食品現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)等。但是，若樣品中含有大量非細(xì)胞性ATP，則檢測(cè)結(jié)果可受干擾。

綜上，不同的檢測(cè)技術(shù)都有不同的優(yōu)勢(shì)和劣勢(shì)。在食源性致病菌的檢測(cè)中，要根據(jù)檢測(cè)需要、食品性質(zhì)，以及已有的檢測(cè)條件科學(xué)進(jìn)行選擇。但是，隨著各項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)的不斷進(jìn)步，未來不同技術(shù)之間的聯(lián)合檢測(cè)將會(huì)得到更好的發(fā)展，這將極大的提高檢測(cè)范圍和靈敏度，從而為防控食源性疾病作出貢獻(xiàn)。

作者簡(jiǎn)介：

杭婧（1987-），女，漢，江蘇淮安人，本科，檢驗(yàn)師（中級(jí)），食品藥品微生物。