牛親子鑒定技術(shù)研究進(jìn)展

張正興

摘 要 在牛的育種實踐和科學(xué)研究中，正確的系譜記錄是準(zhǔn)確估計育種值、提高遺傳進(jìn)展的基礎(chǔ)，是研究各性狀分子機(jī)理的重要保證。而在生產(chǎn)實踐中，由于各種原因，系譜錯誤在所難免，因此親予鑒定作為糾正系譜錯誤的重要方法是育種實踐和科研中不可或缺的研究內(nèi)容。目前用于牛親子鑒定的標(biāo)記主要是微衛(wèi)星標(biāo)記（SSP）和單核苷酸多態(tài)性（SNP）標(biāo)記。作為第三代分子標(biāo)記，SNP標(biāo)記具有數(shù)量豐富、遺傳穩(wěn)定、判型錯誤率低、操作方便、檢測自動化的優(yōu)點，非常適合用于大規(guī)模群體的親子鑒定。隨著SNP檢測成本的降低，在牛親子鑒定中有取代微衛(wèi)星標(biāo)記之勢。

關(guān)鍵詞 牛；親子鑒定；SNP標(biāo)記

1 親子鑒定概述

親子鑒定亦稱父權(quán)鑒定，是利用分子遺傳學(xué)、生物學(xué)及醫(yī)學(xué)的理論和技術(shù)判斷父親與子女是否具有親生血緣關(guān)系。親子鑒定是通過比較親代與子代在各種可遺傳特征上的差異來推斷兩個個體之間的親緣關(guān)系。其依據(jù)是基于兩個體之間可能存在的遺傳關(guān)系，即必須符合孟德爾遺傳分離規(guī)律。任何一種具有多態(tài)性的遺傳標(biāo)記都能夠用于親子鑒定。其原理是：DNA是從幾滴血，腮細(xì)胞或培養(yǎng)的組織纖內(nèi)提取而來。用疇素將DNA樣本切成小段，放進(jìn)喱膠內(nèi)，用電泳槽推動DNA小塊使之分離——最細(xì)的在最遠(yuǎn)，最大的最近。

2 臨床上牛親子鑒定技術(shù)及其應(yīng)用

血型又稱系統(tǒng)或血型系，有狹義和廣義之分。狹義的血型僅指動物紅細(xì)胞膜表面所具有的特異性抗原差異.廣義的血型指由血液中遺傳決定的各種血液特性，包括紅細(xì)胞抗原型、白細(xì)胞抗原型、血小板型和血清蛋白型血型是動物的一種生命性狀.可作為一種遺傳標(biāo)記牛血型學(xué)檢查主要包括紅細(xì)胞抗原型和血清蛋白多態(tài)性檢查。奶牛紅細(xì)胞抗原分為 A、B、C、F、J、L、M、N、S、Z、R等l1個系統(tǒng)100余種血型。通過單一抗體血清與被檢紅細(xì)胞混合發(fā)生的溶血反應(yīng).即可判斷紅細(xì)胞膜表面抗原血清蛋白可分為白蛋白（ALB）、后白蛋白（PA）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TF）、后轉(zhuǎn)鐵蛋白 （PTF）、淀粉酶 （Am）、碳酸酐酶（CA）、血漿銅藍(lán)蛋白（CP）、血紅蛋白（HB）等。

3 目前針對牛親子鑒定工作急需開展如下幾個方面的工作

3.1 建立省級親子鑒定委員會制度

在各省建立親子鑒定委員會，鑒定委員會應(yīng)包括親子鑒定技術(shù)專家、法律工作者、政府相關(guān)部門的人員，由他們具體認(rèn)定、考核、指導(dǎo)該地區(qū)的親子鑒定工作，對親子鑒定結(jié)論進(jìn)行復(fù)議，協(xié)調(diào)親子鑒定中的各種矛盾。

3.2 建立法定的鑒定部門及鑒定人資質(zhì)認(rèn)證制度

目前，我國對親子鑒定缺乏統(tǒng)一的、專門的管理，必須首先加強對鑒定部門的管理，應(yīng)明確哪些是法定的鑒定部門，哪些是指定的鑒定部門，哪些部門不允許作血液親子鑒定，并明確鑒定人員的資格，對鑒定人員既要進(jìn)行專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)，也要進(jìn)行有關(guān)的法律知識及職業(yè)道德培訓(xùn)，以增強他們的責(zé)任感和法律意識，還應(yīng)定期進(jìn)行專業(yè)知識的考核，以使他們始終處于專業(yè)的最前沿。

4 展望

目前世界上報道在動物上實施親子鑒定的研究有：2001年，Bowling A T等認(rèn)為馬毛發(fā)（根球）親子鑒定微衛(wèi)星已經(jīng)證明這些DNA為基礎(chǔ)的測試，滿足業(yè)主的需求，品種登記，證實一個微衛(wèi)星標(biāo)記的單板在品種遺傳分析是有效的。Svensson E M等于2008年以跖骨為標(biāo)本，使用一個性別識別單核苷酸多態(tài)性作DNA測試，成功在鑒定了牛性別[9]。2012年，Ogden R等測定15個STR基因座的遺傳分析和法醫(yī)個體識別和英國國內(nèi)的狗親子鑒定。此法基于15個STR基因座和一個性別位點隨機(jī)匹配概率隨后被估計為2.8×1017跨品種無關(guān)個體。2013年，Rosa A J M等山谷貝利切羊（Valle del Belice dairy sheep）乳制品使用多重微面板親子核查，有85樣本的血液和頭發(fā)收集和分型在多重電泳運行24個微衛(wèi)星標(biāo)記。共有269個等位基因在整個24個位點進(jìn)行調(diào)查檢測。在PIC考慮所有位點等于0.736，可見這微面板非常多態(tài)和高度信息。一個親子測試是在64進(jìn)行與多個公牛產(chǎn)生的家庭。結(jié)果表明，20.3%和29.7%誤認(rèn)率女性和男性分別。在親子鑒定這里提出可能是驗證甚至重建的山谷貝利切奶綿羊品種目前的血統(tǒng)數(shù)據(jù)的有用的工具。

綜上所述，親子鑒定技術(shù)的發(fā)展可以說是科學(xué)的進(jìn)步，親子鑒定是一把雙刃劍，“濫用”親子鑒定也會帶來負(fù)面影響，使養(yǎng)殖戶間不睦，產(chǎn)生肉類產(chǎn)品不安定因素。親子鑒定只有在必要的制度的規(guī)范下，才能趨利避害，更好地為法制建設(shè)服務(wù)。按標(biāo)記發(fā)展的歷史親子鑒定方法主要可以分為：表觀特征鑒定、血型和血液蛋白型鑒定以及分子標(biāo)記鑒定。然而SNP標(biāo)記作為一種新興的分子標(biāo)記，有著諸多其他標(biāo)記不具備的優(yōu)點，但也存在著一些局限。首先，由于對SNP標(biāo)記的研究時間相對較短，技術(shù)規(guī)范等還不夠成熟，沒有統(tǒng)一的國際標(biāo)準(zhǔn)，導(dǎo)致各實驗室交流方面的困難；同時，技術(shù)的不夠成熟還體現(xiàn)在儀器試劑等成本較高，并且國內(nèi)外推廣程度不同也使得SNP標(biāo)記檢測的成本在 國內(nèi)依然較其他標(biāo)記高；最后，SNP標(biāo)記具有較高的品種與群體特異性，同一品種不同的群體之間也存在差異。這些局限導(dǎo)致了利用SNP標(biāo)記進(jìn)行牛親子鑒定的工作目前多停留在實驗室研究階段，未能廣泛的應(yīng)用于生產(chǎn)實踐。

參考文獻(xiàn)：

[ 1 ] A d a m s D E ， P r e s l e y L A， Baumstark A L， et al. Deoxyribonucleic acid （DNA） analysis by restrictionfragment length polymorphisms of blood and other body fluid stains subjected to contamination andenvironmental insults[J]. Journal of forensic sciences， 1991， 36（5）： 1284-1298.

[2] 高樹輝， 王新淮. STR基因掃描技術(shù)在親子鑒定中的應(yīng)用[J].中國人民公安大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版， 2004 （5）： 6-8.