Quechers前處理法-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定荔枝中14種農(nóng)藥殘留

韋齡乾 潘喜芳 蔣揚柏 李麗燕

摘 要：本文旨在探究超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法結(jié)合Quechers方法檢測荔枝中苯醚甲環(huán)唑、啶蟲脒、氟硅唑、噻蟲嗪等14種農(nóng)藥殘留的效果。樣品經(jīng)Quechers法凈化，以0.5mmol/L醋酸銨+0.01%甲酸水溶液-乙腈作為流動相梯度洗脫，shim-park XR-ODSⅢ，50mml×2.0mm，三重四極桿質(zhì)譜選用多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）掃描測定。檢測后顯示14種農(nóng)藥在線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0.9994，方法檢出限為0.02～0.04mg/kg。在低、中、高3個不同濃度水平添加的平均加標(biāo)回收率為73.6%～110.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.0%～4.7%。因此Quechers法適用于荔枝中農(nóng)藥多殘留檢測，且具有分析簡單、速度快、靈敏度高的特點。

關(guān)鍵詞：Quechers;農(nóng)藥殘留;超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法;荔枝

欽州是中國的“中國荔枝之鄉(xiāng)”。其中欽州市靈山縣的荔枝是中國國家地理標(biāo)志，每年6-8月份都產(chǎn)出大量各類品種的荔枝銷售至全國各地，為了保證荔枝的農(nóng)藥殘留不超標(biāo)，保障消費者食品安全，需要對荔枝進行大量的農(nóng)藥殘留檢測，為了提高檢測效率和準(zhǔn)確度，建立起一個科學(xué)、有效、快速的檢測方法意義重大。Quechers前處理方法，與固相萃取柱凈化法相比，具有提取速度快、溶劑用量少、樣品制備簡便等優(yōu)點，在農(nóng)藥殘留分析中得到越來越廣泛的應(yīng)用。劉文靜、李雪、張嘉楠、張煜卓等人曾用過Quechers前處理方法檢測農(nóng)藥殘留。以此，本文研究利用Quechers方法凈化，建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析荔枝中14種農(nóng)藥殘留。

一、材料與方法

1.儀器

超高效液相色譜儀串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜（型號：LCMS-8040，SHIMADZU公司），XH-C旋渦混合器（金壇市醫(yī)療儀器廠），超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），Millipore 明澈D24UV（默克化工有限公司），臺式高速離心機（Sigma3K15曦馬離心機有限公司），臺式微量離心機（賽默飛公司），攪拌機，高速分散機（IKA公司）。

2.試劑

苯醚甲環(huán)唑、啶蟲脒、氟硅唑、噻蟲嗪、噻嗪酮等14種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液來源于農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所（天津），乙腈（HPLC，Tedia Company，），甲醇（HPLC，Tedia Company），乙酸銨（LC-MS級，CNW Technologies），氯化鈉、無水甲酸（LC-MS級，天津市光復(fù)科技有限公司），超純水（Millipore超純水機制備），微孔濾膜（0.22μm，Agela Technologies）。QuEChERS凈化管[50mgPSA+150mgMgSO4，島津技邇（上海）貿(mào)易有限公司]。

3.色譜-質(zhì)譜條件

色譜條件：SHIMADZUC18柱子，色譜柱（Φ1.9μm，2.1mm×100mm）;柱溫：40℃，流速0.2mL/min;進樣量1μL;流動相A：0.5mmol/L醋酸銨+0.01%甲酸水溶液流動相B為乙腈;洗脫方式：梯度洗脫，有機相初始濃度為10%，4min有機相濃度50%，15min設(shè)置75%，17-20min設(shè)置95%。

質(zhì)譜條件：電噴霧離子化離子模式：ESI;掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）掃描方式;離子源接口電壓：ESI+，+4.5kV;ESI-，-3.5kV;霧化氣：氮氣：3L/min;干燥氣：氮氣15L/min;碰撞氣：氬氣;DL管溫度：250℃;加熱模塊溫度：450℃;對14種農(nóng)藥單標(biāo)溶液進行質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化，確定特征母離子和子離子，優(yōu)化后的相關(guān)質(zhì)譜參數(shù)見表1。

4.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

用上述14種農(nóng)藥以乙腈作為溶劑配制0.02mg/L、0.04mg/L、0.08μg/mL、0.12mg/L不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液作為試驗處理。

5.樣品前處理

準(zhǔn)確稱取25.00g（精確至0.01g）勻漿后的荔枝樣品于100mL離心管中，加入50mL乙腈，5-7gNaCl，用高速分散機以12000r/min均質(zhì)提取2min，以8000r/min高速離心5min;吸取上清液1.5mL置于QuEChERS凈化離心管[50mgPSA+150mgMgSO4]中渦旋1min，100000r/min離心5min;取上清液過0.22μm濾膜，濾液待測。

二、結(jié)果

1.14種農(nóng)藥的線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限、定量限、TIC色譜圖

蔬菜、水果農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T20769-2008的食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)，食品中農(nóng)藥最大殘留限量，描述方法進行相關(guān)測定，選擇0.02mg/L、0.04mg/L、0.08mg/L、0.12mg/L的14種混合農(nóng)藥，每種濃度重復(fù)測定6次。結(jié)果顯示，結(jié)果14種農(nóng)藥的相應(yīng)含量范圍中其線性相關(guān)系數(shù)均超過0.9994;農(nóng)藥定量限為0.02～0.08mg/kg，如表2所示，14種的農(nóng)藥TIC色譜圖見圖1。

2.樣品檢測結(jié)果

本研究實驗樣品從本地荔枝種植合作社選取，抽取相同品種樣品2個，分別為A、B，A、B兩個樣品均設(shè)置空白對照以及3個加標(biāo)回收，其中A樣品前處理按照GB/T20769-2008的標(biāo)準(zhǔn)方法執(zhí)行，B樣品前處理按照Quechers法執(zhí)行。最后樣品均在相同條件下的LCMS上進行檢測，結(jié)果顯示兩種前處理方法的檢測結(jié)果基本一致，平均回收率為73.6%～110.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.0%～4.7%，如表3。

三、討論

采用Quechers前處理法，結(jié)合超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，建立了荔枝中14種農(nóng)藥殘留的檢測方法。該方法前處理簡單、方便快速，具有良好的靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度，為荔枝中農(nóng)藥殘留的快速分析檢測提供了方法參考依據(jù)。

參考文獻：

[1]劉文靜，黃彪，傅建煒，潘葳，等.Quechers前處理法-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定荔枝和葡萄中18種三唑類農(nóng)藥殘留[J].農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全.2019.（2）：44-61.

[2]李雪，氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合QuEChERS方法檢測蔬菜、水果中37種農(nóng)藥殘留[J].食品安全導(dǎo)刊.2018.（6）：70-71.

[3]張嘉楠，曹秀梅，王愛卿，Quechers-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定果蔬中57種農(nóng)藥殘留量[J]，2018，27（4）：60-65.

[4]張煜卓，于湛，李碩，王妍，應(yīng)用QuEChERS技術(shù)與氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時檢測南果梨中16種農(nóng)藥殘留[J]，現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2019，46（2）：327-331.