納布啡對瑞芬太尼致大鼠痛覺過敏的作用

馮政 董?，| 王勝

【摘要】目的：觀察本實(shí)驗(yàn)劑量的瑞芬太尼是否能誘發(fā)大鼠產(chǎn)生痛覺過敏，靜脈注射納布啡后能否抑制大鼠痛覺過敏的發(fā)生及發(fā)展。方法：選擇健康的雄性SD大鼠，隨機(jī)分為5組，制作疼痛切口模型后泵注不同的藥物，測定熱縮足潛伏期及PKC表達(dá)水平。結(jié)果：比較各組大鼠熱縮組潛伏期，制作手術(shù)后切口疼痛模型后各組均縮短;靜脈泵注后R組大鼠熱縮足潛伏期較RN組、RI組大鼠縮短。與R組大鼠相比較，RN組、RI組大鼠PKC表達(dá)水平降低。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)劑量靜脈泵注瑞芬太尼導(dǎo)致大鼠產(chǎn)生了痛覺過敏。靜脈推注納布啡可以抑制瑞芬太尼導(dǎo)致的大鼠痛覺過敏，這種改變可能通過PKC途徑來產(chǎn)生。

【關(guān)鍵詞】納布啡;瑞芬太尼;痛覺過敏;PKC

【中圖分類號】R821.4+1

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】2095-6851（2019）09-080-02

阿片類藥物是最常用的鎮(zhèn)痛藥物及最有效的中樞性鎮(zhèn)痛藥物[1]，但作為治療疼痛的阿片類藥物在使用時(shí)卻可能使患者對疼痛的敏感性增強(qiáng)，這稱作阿片類藥物誘發(fā)的痛覺過敏（OIH），OIH發(fā)生的機(jī)制復(fù)雜。瑞芬太尼通常用于術(shù)中鎮(zhèn)痛。然而，許多臨床證據(jù)表明瑞芬太尼可以增強(qiáng)傷害性刺激的感受，這種稱為瑞芬太尼誘導(dǎo)的痛覺過敏[2]。本研究觀察芬太尼是否能誘發(fā)大鼠產(chǎn)生痛覺過敏，靜脈注射納布啡后能否抑制大鼠痛覺過敏的發(fā)生及發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料 選擇健康清潔雄性SD大鼠40只。隨機(jī)分為 5 組;測定每組熱縮足潛伏期，對照1組（C1）測定熱縮足潛伏期后七氟醚麻醉，取 L4-6節(jié)段脊髓，測定PKC表達(dá)水平;其余各組使用七氟醚麻醉后于大鼠右足底制作手術(shù)切口疼痛模型，2 h后測定各組大鼠熱縮足潛伏期;對照2組（C2）大鼠測定熱縮足潛伏期，七氟醚麻醉后取L4-6節(jié)段脊髓，測定PKC表達(dá)水平;余下各組大鼠留置尾靜脈導(dǎo)管，瑞芬太尼組（R組）以1μg/（kg·min）的速度經(jīng)尾靜脈導(dǎo)管輸注瑞芬太尼60 min，輸注完成2 h后測定熱縮足潛伏期，七氟醚麻后醉取L4-6節(jié)段脊髓，測定PKC表達(dá)水平;瑞芬太尼+納布啡組（RN組）以1μg/（kg·min）輸注瑞芬太尼60 min，輸注完成后靜脈推入納布啡1 mg/kg，2 h后測定熱縮足潛伏期，七氟醚麻后取L4-6節(jié)段脊髓，測定PKC表達(dá)水平;瑞芬太尼+PKC抑制劑組（RI組），以1μg/（kg·min）輸注瑞芬太尼60 min，輸注完成后靜脈推入PKC抑制劑，2 h后測定熱縮足潛伏期，取L4-6節(jié)段脊髓，測定PKC表達(dá)水平。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 大鼠尾靜脈穿刺置管，將大鼠至于足底測試儀籠內(nèi)，啟動儀器，足底測試儀啟動到停止的時(shí)間即為熱縮足潛伏期，共進(jìn)行5次試驗(yàn)，取中間3次平均值為熱縮足潛伏期值。使用七氟醚麻醉大鼠，大鼠麻醉后頸椎脫位處死。取L4-6段脊髓進(jìn)行Western Blot檢測。

1.3 統(tǒng)計(jì)結(jié)果 使用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。測量數(shù)據(jù)表示為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）。當(dāng)比較組內(nèi)的行為數(shù)據(jù)時(shí)，選擇重復(fù)測量設(shè)計(jì)的方差分析。比較兩組的蛋白質(zhì)印跡結(jié)果。采用t檢驗(yàn)。P <0.05被認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)熱縮足潛伏期比較 比較各組大鼠熱縮組潛伏期，制作手術(shù)后切口疼痛模型后各組均縮短;靜脈泵注后R組大鼠熱縮足潛伏期較RN組、RI組大鼠縮短，見表1。

2.2 各組大鼠PKC表達(dá)水平 與R組大鼠相比較，RN組、RI組大鼠PKC表達(dá)水平降低，見圖1。

3 討論

瑞芬太尼是一種超短效μ阿片受體特異性激動劑，代謝不依賴肝臟及腎臟的功能，主要通過組織酯酶和血漿水解代謝即使長時(shí)間輸注也不會蓄積，這些特性讓瑞芬太尼變成一種非常優(yōu)秀的靜脈麻醉藥物，但大劑量使用瑞芬太尼會造成患者術(shù)后對疼痛的敏感性增加，增加術(shù)后鎮(zhèn)痛藥物的需求，影響康復(fù)，給患者和醫(yī)生帶來很大的麻煩[3]。早期的以氯胺酮為代表的NMDA受體抑制劑通過抑制PKC表達(dá)，進(jìn)而抑制NMDA受體，以達(dá)到治療痛覺過敏的目的，該類藥物在臨床中并沒有起到顯著的臨床療效。納布啡誕生之初的目的就是為了減少純阿片類藥物的不良反應(yīng)，有研究表明[4]，選擇性κ受體激動劑可減少大鼠的痛覺過敏，但κ受體激動劑本身也可導(dǎo)致痛覺過敏的發(fā)生，因此本實(shí)驗(yàn)使用納布啡，一種μ受體拮抗劑和κ受體的激動拮抗劑實(shí)驗(yàn)納布啡是否能夠抑制瑞芬太尼導(dǎo)致的大鼠痛覺過敏的發(fā)生及發(fā)展過程。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，通過比較各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)熱縮足潛伏期。單純持續(xù)泵注瑞芬太尼組的大鼠出現(xiàn)了對疼痛的敏感化，推斷出靜脈持續(xù)泵注瑞芬太尼誘發(fā)了大鼠的痛覺過敏的產(chǎn)生，而使用瑞芬太尼及納布啡組大鼠的熱縮足潛伏期高于單純泵注瑞芬太尼組，與假手術(shù)組大鼠的熱縮足潛伏期相比并無顯著差異，可以認(rèn)為納布啡可以抑制瑞芬太尼導(dǎo)致的大鼠痛覺過敏的產(chǎn)生。

比較各組大鼠的PKC表達(dá)水平，單純泵注瑞芬太尼組大鼠PKC表達(dá)水平顯著高于假手術(shù)組;使用瑞芬太尼加納布啡及使用瑞芬太尼加PKC抑制劑組大鼠PKC表達(dá)水平低于單純泵注瑞芬太尼組大鼠;推測瑞芬太尼導(dǎo)致大鼠痛覺過敏可能通過PKC途徑來實(shí)現(xiàn);使用瑞芬太尼加PKC抑制劑組大鼠PKC表達(dá)水平低于使用瑞芬太尼加納布啡組大鼠，這與大鼠熱縮足潛伏期結(jié)果并不十分一致，大鼠痛覺過敏的產(chǎn)生可能除PKC通路外還有其他通路起著關(guān)鍵作用.

綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測納布啡可以抑制瑞芬太尼導(dǎo)致的大鼠痛覺過敏，瑞芬太尼導(dǎo)致大鼠痛覺過敏可能通過PKC途徑來實(shí)現(xiàn)，PKC在痛覺過敏的產(chǎn)生及維持方面有著重要的作用。

參考文獻(xiàn)：

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[4] 王熙， 吉林醫(yī)學(xué) 韓 J. 納布啡的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J]， 2017， 38（8）： 1565-1567.