簡陽市牛羊布魯氏菌病流行情況調(diào)查

湯龍梅 ，尹月，章文強，陳超，盧忠華，王梅，包俊梅*

（1.四川省簡陽市動物疫病預防控制中心，四川 簡陽 641400；2.四川大學華西公共衛(wèi)生學院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學系，四川 成都 610041；3.四川省簡陽市疾病預防控制中心，四川 簡陽 641400）

1 調(diào)查目的

布魯氏菌?。ú疾。┦怯刹剪斒暇秩霗C體，引起人畜共患的傳染性變態(tài)反應性疾病。人和家畜主要通過消化道、呼吸道和皮膚黏膜等途徑接觸感染[1-2]。家畜患病后常出現(xiàn)發(fā)熱、睪丸炎、乳腺炎、流產(chǎn)、不孕不育等癥狀，其中自發(fā)性流產(chǎn)是妊娠母畜感染布病的顯著特征[3]。布病不僅會給畜牧業(yè)帶來重大的經(jīng)濟損失，還會給人類健康造成危害，是威脅公共安全的潛在危險因素[4]。

2014年簡陽市報告了首例人間布病，以后每年均有一定數(shù)量的本地病例報告。本研究于2018年4月至6月在簡陽市內(nèi)開展了羊布魯氏菌病的橫斷面調(diào)查，通過收集既往牛羊布病的監(jiān)測數(shù)據(jù)，掌握家畜布病的流行現(xiàn)狀，分析布病的防控效果及其存在的問題，并提出有針對性的建議。

2 資料來源

規(guī)模羊場的養(yǎng)殖情況來源于簡陽市2018年1月規(guī)模場重大動物疫病普查；羊布魯氏菌病血清學資料來源于2016～2017年省級牛羊疫病定點監(jiān)測和2018年羊布魯氏菌病橫斷面調(diào)查；牛布魯氏菌病血清學資料來源于2016～2018年省級牛羊疫病定點監(jiān)測。

3 羊布魯氏菌病橫斷面調(diào)查

3.1 調(diào)查對象簡陽市轄區(qū)內(nèi)2月齡以上且未免疫布病疫苗的羊。

3.2 方法

3.2.1 抽樣方法根據(jù)《國家布魯氏菌病防治計劃（2016-2020年）》要求，抽樣應遵循先確定隨機采樣檢測的場群數(shù)，再確定個體樣本數(shù)的原則[5]。

（1）場群樣本量計算：根據(jù)簡單隨機抽樣方法的樣本量計算公式（檢驗水準α＝0.05，相應的Zα/2＝1.96，場群預期感染率p取30%，容許誤差d取10%），計算得出場群樣本量為81。

（2）個體樣本量計算：同理，參照上述公式，個體預期感染率p取1%，容許誤差d取0.5%，計算得出樣本量為1 522。

（3）抽樣過程：采用多階段整群隨機抽樣方法，首先根據(jù)地理位置和養(yǎng)殖場分布，隨機選取本地區(qū)賈家鎮(zhèn)、石橋鎮(zhèn)、石盤鎮(zhèn)、養(yǎng)馬鎮(zhèn)、踏水鎮(zhèn)、青龍鎮(zhèn)、禾豐鎮(zhèn)、三合鎮(zhèn)、施家鎮(zhèn)、江源鎮(zhèn)、武廟鄉(xiāng)、飛龍鄉(xiāng)、老君井鄉(xiāng)、靈仙鄉(xiāng)、新星鄉(xiāng)、云龍鎮(zhèn)、五星鄉(xiāng)、東溪鎮(zhèn)、金馬鎮(zhèn)19個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，采用簡單隨機抽樣方法在這些鄉(xiāng)鎮(zhèn)的所有養(yǎng)殖場內(nèi)抽取一定數(shù)量的羊，然后按照養(yǎng)殖規(guī)模確定采血數(shù)量。一類養(yǎng)殖場：羊養(yǎng)殖數(shù)量≥300頭，采集羊血樣50份；二類養(yǎng)殖場：100頭≤羊養(yǎng)殖數(shù)量＜300頭，采集羊血樣35份；三類養(yǎng)殖場：50頭≤羊養(yǎng)殖數(shù)量＜100頭，采集羊血樣25份；四類養(yǎng)殖場：羊養(yǎng)殖數(shù)量＜50頭，采集羊血樣15份；若養(yǎng)殖數(shù)量不足15頭，則對所有羊進行采血。

3.2.2 調(diào)查方法經(jīng)過統(tǒng)一培訓的畜牧站工作人員面對面訪談抽中的養(yǎng)殖場負責人，填寫“羊感染布魯氏菌檢測登記表”，包括養(yǎng)殖場的基本情況、家畜來源及種類等信息，并對抽中的羊采集血樣，利用虎紅平板凝集試驗（RBT）初篩，初篩陽性血清進一步做試管凝集試驗（SAT）復核。檢測方法和診斷標準依據(jù)《動物布魯氏菌病診斷技術（GB/T 18646-2002）》[6]。

3.3 指標定義場群：指同一牧場的或由人工柵欄、天然屏障隔離的一群動物，或?qū)儆谕凰姓吆凸芾碚叩囊蝗夯蚨嗳阂赘袆游锏募稀３鹾Y陽性：虎紅平板凝集試驗陽性。確診陽性：虎紅平板凝集試驗初篩陽性，試管凝集試驗復核仍為陽性。陽性場群：至少有1頭羊為確診陽性的場群。場群陽性率：指陽性場群占所調(diào)查場群的比例。個體陽性率：指確診陽性個體占所調(diào)查羊的比例?？刂疲褐高B續(xù)2年以上，牛布病個體陽性率在1%以下，羊布病個體陽性率在0.5%以下，所有染疫牛羊均已撲殺，且本地人間布病新發(fā)病例數(shù)不超過上一年；以縣為單位，達到布病控制標準的區(qū)域為控制區(qū)，未達到布病控制標準的區(qū)域為未控制區(qū)[5]。

3.4 統(tǒng)計學分析應用Excel 2016進行數(shù)據(jù)匯總和數(shù)據(jù)清理，用SPSS 23.0軟件對結(jié)果進行統(tǒng)計描述和統(tǒng)計推斷。定性資料用“率或構(gòu)成比”表示，并計算“率的95%置信區(qū)間（CI）”；多個樣本率的比較采用χ2檢驗，多個樣本率間的多重比較采用χ2分割法比較，檢驗水準α′＝0.012 5；若多個樣本率的比較不滿足χ2檢驗條件，則使用Fisher確切概率法比較。采用雙側(cè)檢驗，以P＜0.05表示統(tǒng)計學意義上的顯著差異。

4 調(diào)查結(jié)果

4.1 羊布病橫斷面調(diào)查結(jié)果本次研究實際調(diào)查了簡陽市20個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的65個羊養(yǎng)殖場，共采集血樣1 522份，有效血樣1 522份，個體有效完成率達100%。實驗室檢測發(fā)現(xiàn)，虎紅平板凝集試驗初篩出陽性血樣2份，其中經(jīng)試管凝集試驗確診陽性血樣1份，發(fā)現(xiàn)陽性場群1個，場群陽性率為1.54%（95%CI：0.00%～4.53%），個體陽性率為0.66‰（95%CI：0.00‰～1.94‰）。

4.2 既往牛羊布病監(jiān)測結(jié)果2016～2018年分別檢測奶牛血樣650份、367份和153份，分別檢出陽性血樣8份、6份和0份，奶牛布病檢出率分別為12.31‰、16.35‰和0‰，不同年份奶牛的布病檢出率差異沒有統(tǒng)計學意義（P＝0.324）。詳見表1。

表1 2016～2018年奶牛血樣布病檢測結(jié)果

2016～2017年分別檢測羊血樣5 458份、5 490份和1 522份，分別檢出陽性血樣150份、0份和1份，個體陽性率分別為27.48‰、0‰和0.66‰（詳見表2）。不同年份羊群的布病檢出率不全相同（χ2＝191.815，P＜0.001），其中2016年與2017年、2018年的布病檢出率均存在統(tǒng)計學差異（χ2＝152.975，P＜0.001；χ2＝40.464，P＜0.001）。

表2 2016～2018年羊血樣布病檢測結(jié)果

5 調(diào)查結(jié)論與分析

本次調(diào)查結(jié)果顯示，簡陽市牛羊布病個體流行率較低，但仍屬于布病未控制區(qū)域。與2016年比較，2017年和2018年羊的布病檢出率均明顯下降，這可能與2016年開展的布病監(jiān)測凈化行動有關，畜牧部門加強了對羊布病的大規(guī)模檢測，強制撲殺了陽性病畜并進行無害化處理，表明簡陽市采取的“監(jiān)測+撲殺”防控策略有效，這與國內(nèi)其他地區(qū)的調(diào)查結(jié)果一致[7-8]。由于產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級，2018年簡陽市已經(jīng)沒有規(guī)?；哪膛ｐB(yǎng)殖場，全市范圍內(nèi)僅剩零星散養(yǎng)戶，因此，應進一步摸排奶牛的養(yǎng)殖分布及其規(guī)模，以便開展后續(xù)工作。

國外研究表明，畜間布病的控制和消除是預防和控制人間布病的先決條件[9]。雖然當前簡陽市牛羊布病的個體流行率較低，但是畜間布病防控仍存在諸多難點。比如，布病防控經(jīng)費和人員設備不足，限制了工作的有效開展；小規(guī)模羊場的養(yǎng)殖周期短、流動快，從采血到檢測結(jié)果需要花費一段時間，去撲殺陽性病畜時會遇到病畜已被售出無法追蹤的情況；外地輸入羊及其制品的檢驗檢疫監(jiān)督制度不完善，部分活羊被羊肉湯館收購后即被就地屠宰；屠宰點設置尚不規(guī)范，路途運輸費用得不到補償，無法實現(xiàn)“集中屠宰”；經(jīng)濟補償額度和市場價格之間的差異影響了養(yǎng)殖戶參與檢測和撲殺的積極性；養(yǎng)殖戶的布病防控知識缺乏，也未意識到布病對人畜健康的危害。