西洋參不同部位丙二?；藚⒃碥蘸坎町愌芯?/h1>
2019-09-21 08:35:22逄世峰王博王佳鄭厚勝白玉潔鄭培和張浩許世泉王英平
特產(chǎn)研究 2019年3期
逄世峰，王博，王佳，鄭厚勝，白玉潔，鄭培和，張浩，許世泉，王英平
（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，長(zhǎng)春 130112）
西洋參（Panax quinquefolium L.）系五加科多年生草本植物[1]，具有改善神經(jīng)系統(tǒng)、改善血液循環(huán)、調(diào)節(jié)免疫功能、抗氧化等藥理活性作用[2-3]。人參皂苷為西洋參主要化學(xué)成分，各部位含量和組成不盡相同[4-5]，通常采用液相色譜法測(cè)定人參皂苷含量來(lái)評(píng)價(jià)西洋參品質(zhì)的優(yōu)劣[6-7]，但往往忽略具有獨(dú)特藥理活性的丙二酰基人參皂苷。由于丙二?；藚⒃碥盏牟环€(wěn)定性和標(biāo)準(zhǔn)品的缺乏，目前對(duì)其準(zhǔn)確定量仍然有難度[8]。本研究通過(guò)氨水水解，脫去丙二酰基人參皂苷的丙二?；?，將丙二?；藚⒃碥辙D(zhuǎn)化為相應(yīng)的人參皂苷，測(cè)定水解后樣品中人參皂苷含量，并與樣品中原有人參皂苷含量相減，再根據(jù)丙二?；藚⒃碥张c相應(yīng)中性皂苷分子量進(jìn)行換算，即得到丙二?；藚⒃碥蘸浚瑸槲餮髤⒅斜；藚⒃碥蘸繙y(cè)定提供了一種新方法。
1 儀器、試藥及材料
超高效液相色譜儀Acquity（Waters 公司）；Milli-Q Advantage A10 型超純水器（美國(guó)密理博公司）；人參皂苷 Rg1、Re、Rf、Ro、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；乙腈（色譜純，美國(guó)賽默飛世爾公司）；磷酸為優(yōu)級(jí)純，其他試劑均為分析純。
本試驗(yàn)所用西洋參均采自吉林省撫松縣中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所實(shí)驗(yàn)基地。將取得的樣品蘆頭、主根、須根分離，放入40 ℃烘箱烘干至恒重，粉碎，過(guò)60目篩，備用。
2 方法與結(jié)果
2.1 常規(guī)方法
按照已建立方法測(cè)定[9]。
2.2 氨水水解方法
按照已建立方法測(cè)定[10]。
2.3 丙二?；藚⒃碥蘸繐Q算
以樣品中丙二?；藚⒃碥諆H鏈接一個(gè)丙二?；?jì)算，公式如下：
C1＝丙二?；藚⒃碥蘸?；C2：相應(yīng)中性人參皂苷含量；M1：丙二?；藚⒃碥辗肿恿浚籑2：相應(yīng)中性人參皂苷分子量。
表1 人參皂苷分子量Tab.1 Molecular weight of ginsenosides
2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2.5 樣品測(cè)定
按照“2.1”、“2.2”項(xiàng)下測(cè)定方法操作，“2.3”項(xiàng)下轉(zhuǎn)換方法計(jì)算丙二?；藚⒃碥蘸?，結(jié)果見(jiàn)表2、表3、表4，色譜圖見(jiàn)圖1。
表2 西洋參根、須、蘆供試品水解前8 種人參皂苷含量Tab.2 The content of eight ginsenosides in taproot,lateral root and rhizome of American ginseng before hydrolysis
圖1 未水解樣品（A）、水解樣品（B）、標(biāo)準(zhǔn)品（C）超高效液相色譜圖Fig.1 UPLC chromatograms of unhydrolyzed sample、hydrolyzed sample and reference substances
表3 西洋參根、須、蘆供試品水解后8 種人參皂苷含量Tab.3 The content of eight ginsenosides in taproot,lateral root and rhizome of American ginseng after hydrolysis （mg/g）
表4 西洋參根、須、蘆中主要丙二?；藚⒃碥蘸縏ab.4 The content of main malonyl-ginsenosides in taproot,lateral root and rhizome of american ginseng （mg/g）
由表2、表3、表4可知，西洋參中主要含有二醇型丙二酰基人參皂苷，分別為 M-Rb1、M-Rc、M-Rb3、MRd；西洋參主根中丙二酰基人參皂苷占總皂苷比例高于蘆頭和須根，含量分別為51.09%、42.18%、36.87%；蘆中Ro、M-Rb3、M-Rd 含量均顯著高于主根和須根；根中Rg1、Re、Rb3、M-Rd均顯著低于須根和蘆頭；須中Rc、M-Rc 顯著高于主根和蘆頭。
3 討論
本試驗(yàn)對(duì)西洋參中主要人參皂苷進(jìn)行了對(duì)比研究，建立了西洋參中丙二?；藚⒃碥諟y(cè)定新方法，該方法具有操作簡(jiǎn)單、速度快、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，可作為檢測(cè)丙二?；藚⒃碥蘸康氖走x方法。
通過(guò)比較西洋參地下部位主要人參皂苷含量差異發(fā)現(xiàn)，西洋參須根中Rc、M-Rc 含量顯著高于其他部位，與逄世峰等[9]的研究結(jié)果一致。因此，人參皂苷Rc、M-Rc 含量可用于西洋參須根與主根和蘆頭的鑒別。
綜上所述，西洋參在皂苷含量和組成上均有較大差異，可根據(jù)實(shí)際需求合理利用西洋參資源，為西洋參合理開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
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西洋參（Panax quinquefolium L.）系五加科多年生草本植物[1]，具有改善神經(jīng)系統(tǒng)、改善血液循環(huán)、調(diào)節(jié)免疫功能、抗氧化等藥理活性作用[2-3]。人參皂苷為西洋參主要化學(xué)成分，各部位含量和組成不盡相同[4-5]，通常采用液相色譜法測(cè)定人參皂苷含量來(lái)評(píng)價(jià)西洋參品質(zhì)的優(yōu)劣[6-7]，但往往忽略具有獨(dú)特藥理活性的丙二酰基人參皂苷。由于丙二?；藚⒃碥盏牟环€(wěn)定性和標(biāo)準(zhǔn)品的缺乏，目前對(duì)其準(zhǔn)確定量仍然有難度[8]。本研究通過(guò)氨水水解，脫去丙二酰基人參皂苷的丙二?；?，將丙二?；藚⒃碥辙D(zhuǎn)化為相應(yīng)的人參皂苷，測(cè)定水解后樣品中人參皂苷含量，并與樣品中原有人參皂苷含量相減，再根據(jù)丙二?；藚⒃碥张c相應(yīng)中性皂苷分子量進(jìn)行換算，即得到丙二?；藚⒃碥蘸浚瑸槲餮髤⒅斜；藚⒃碥蘸繙y(cè)定提供了一種新方法。
1 儀器、試藥及材料
超高效液相色譜儀Acquity（Waters 公司）；Milli-Q Advantage A10 型超純水器（美國(guó)密理博公司）；人參皂苷 Rg1、Re、Rf、Ro、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；乙腈（色譜純，美國(guó)賽默飛世爾公司）；磷酸為優(yōu)級(jí)純，其他試劑均為分析純。
本試驗(yàn)所用西洋參均采自吉林省撫松縣中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所實(shí)驗(yàn)基地。將取得的樣品蘆頭、主根、須根分離，放入40 ℃烘箱烘干至恒重，粉碎，過(guò)60目篩，備用。
2 方法與結(jié)果
2.1 常規(guī)方法
按照已建立方法測(cè)定[9]。
2.2 氨水水解方法
按照已建立方法測(cè)定[10]。
2.3 丙二?；藚⒃碥蘸繐Q算
以樣品中丙二?；藚⒃碥諆H鏈接一個(gè)丙二?；?jì)算，公式如下：
C1＝丙二?；藚⒃碥蘸?；C2：相應(yīng)中性人參皂苷含量；M1：丙二?；藚⒃碥辗肿恿浚籑2：相應(yīng)中性人參皂苷分子量。
表1 人參皂苷分子量Tab.1 Molecular weight of ginsenosides
2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2.5 樣品測(cè)定
按照“2.1”、“2.2”項(xiàng)下測(cè)定方法操作，“2.3”項(xiàng)下轉(zhuǎn)換方法計(jì)算丙二?；藚⒃碥蘸?，結(jié)果見(jiàn)表2、表3、表4，色譜圖見(jiàn)圖1。
表2 西洋參根、須、蘆供試品水解前8 種人參皂苷含量Tab.2 The content of eight ginsenosides in taproot,lateral root and rhizome of American ginseng before hydrolysis
圖1 未水解樣品（A）、水解樣品（B）、標(biāo)準(zhǔn)品（C）超高效液相色譜圖Fig.1 UPLC chromatograms of unhydrolyzed sample、hydrolyzed sample and reference substances
表3 西洋參根、須、蘆供試品水解后8 種人參皂苷含量Tab.3 The content of eight ginsenosides in taproot,lateral root and rhizome of American ginseng after hydrolysis （mg/g）
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3 討論
本試驗(yàn)對(duì)西洋參中主要人參皂苷進(jìn)行了對(duì)比研究，建立了西洋參中丙二?；藚⒃碥諟y(cè)定新方法，該方法具有操作簡(jiǎn)單、速度快、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，可作為檢測(cè)丙二?；藚⒃碥蘸康氖走x方法。
通過(guò)比較西洋參地下部位主要人參皂苷含量差異發(fā)現(xiàn)，西洋參須根中Rc、M-Rc 含量顯著高于其他部位，與逄世峰等[9]的研究結(jié)果一致。因此，人參皂苷Rc、M-Rc 含量可用于西洋參須根與主根和蘆頭的鑒別。
綜上所述，西洋參在皂苷含量和組成上均有較大差異，可根據(jù)實(shí)際需求合理利用西洋參資源，為西洋參合理開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
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