食品中黃曲霉素檢測(cè)的應(yīng)用研究

閆紅紅

摘 要：在食品安全檢驗(yàn)檢測(cè)工作中，黃曲霉素的檢測(cè)一直是其中的重點(diǎn)。通過(guò)對(duì)黃曲霉素的前處理方法和檢測(cè)方法的研究和對(duì)比，找出適合的黃曲霉素檢測(cè)方法，從而促進(jìn)食品黃曲霉素檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展。

關(guān)鍵詞：黃曲霉素;食品安全;食品檢測(cè)

黃曲霉素是黃曲霉等真菌的次生代謝產(chǎn)物，對(duì)人體具有極強(qiáng)的毒性和致癌性，容易進(jìn)入到食品中，引起嚴(yán)重的食品安全事故。國(guó)家越來(lái)越重視食品安全，對(duì)于黃曲霉素的前處理技術(shù)和檢測(cè)方法的研究也更加重視。

一、黃曲霉素的前處理和常規(guī)檢測(cè)

黃曲霉素樣品提取中主要是利用各種溶劑萃取樣品中的目標(biāo)物質(zhì)，溶劑的選擇取決于黃曲霉素的自身理化性質(zhì)，同時(shí)考慮到雜質(zhì)提取和后期的凈化檢測(cè)等過(guò)程，溶劑多為甲醇溶液。一些新型提取技術(shù)，比如超臨界流體萃取技術(shù)、加壓流體萃取技術(shù)等等越來(lái)越廣泛地應(yīng)用于提取工作中。樣品提取中一些萃取出的雜質(zhì)會(huì)為之后的檢測(cè)帶來(lái)干擾，在提取后要對(duì)提取出的樣品做進(jìn)一步的凈化，減少雜質(zhì)含量，排除檢測(cè)干擾。

1.超臨界流體萃取技術(shù)

超臨界流體萃取技術(shù)是將超臨界流體作為萃取劑，將成分從混合物中分離，其中二氧化碳最為常用。利用超臨界流體萃取技術(shù)，可以從糧食粉塵中提取出黃曲霉素，將萃取過(guò)樣品的乙酸乙脂提取液蒸干，利用甲醇重新溶解，加入二氧化碳，可以進(jìn)行黃曲霉素提取。但是超臨界流體萃取技術(shù)需要專(zhuān)門(mén)的設(shè)備，成本較高，技術(shù)難度大，黃曲霉素回收率低，提取純度低，不能作為黃曲霉素的常規(guī)提取凈化方法。

2.加壓流體萃取技術(shù)

加壓流體萃取技術(shù)是在相對(duì)高的溫度和壓強(qiáng)下，利用少量溶劑在短時(shí)間內(nèi)對(duì)樣品進(jìn)行充分萃取的技術(shù)。加壓流體萃取技術(shù)提取率高，操作簡(jiǎn)便，需要的溶劑少，但是設(shè)備價(jià)格昂貴，還沒(méi)有得到廣泛使用。

3.固相萃取技術(shù)

固相萃取技術(shù)是由液固萃取和色譜分離相結(jié)合的一項(xiàng)前處理技術(shù)，主要用于樣品的分離、凈化和富集，可以減少樣品雜質(zhì)干擾，提高檢測(cè)靈敏度。固相萃取技術(shù)可以更有效地將黃曲霉素與雜質(zhì)分離，操作簡(jiǎn)單，應(yīng)用廣泛，是最為精確的前處理技術(shù)。

4.免疫親和層析技術(shù)

免疫親和層析技術(shù)是利用抗原抗體特異性結(jié)合原理，將黃曲霉素單克隆抗體固定于凝膠上，將含有毒素的提取液通過(guò)親和柱，與抗原抗體發(fā)生特異性結(jié)合，分離出黃曲霉素，雜質(zhì)則隨提取液流出，使黃曲霉素得到進(jìn)一步的凈化。免疫親和層析技術(shù)特異性和靈敏度高，回收率高，具有較高的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性，簡(jiǎn)單快捷，成本低，穩(wěn)定性高，凈化效果好，操作安全無(wú)污染。但在使用過(guò)程中對(duì)于相關(guān)條件的控制較為嚴(yán)格，技術(shù)仍然存在較多阻礙，難以廣泛應(yīng)用。

二、黃曲霉素檢測(cè)方法

1.薄層色譜法

薄層色譜法原理是將樣品提取凈化富集后，在薄層板上分離之后可以在紫外光照射下識(shí)別。薄層色譜法所用試劑簡(jiǎn)單，成本較低，操作較為容易，適合大量樣本的篩查。但同時(shí)其操作步驟繁瑣，靈敏度差，實(shí)驗(yàn)人員需要接觸大量的有毒試劑，因此已經(jīng)逐步停止使用。

2.液相色譜法

液相色譜法包括高效液相色譜法、超高效液相色譜法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，其中高效液相色譜法最為常用，在利用反相高效液相色譜對(duì)提取過(guò)后的黃曲霉素樣品進(jìn)行分離后，利用熒光檢測(cè)器測(cè)定含量，從而測(cè)出黃曲霉素含量。熒光檢測(cè)氣靈敏度高，信號(hào)強(qiáng)，適合黃曲霉素的檢測(cè)工作。但是黃曲霉素遇水容易發(fā)生熒光淬滅，在檢測(cè)前要進(jìn)行衍生化反應(yīng)，使其形成穩(wěn)定的衍生物。但是衍生方法增加了樣品的前處理步驟，使得操作更加繁瑣，但是檢出的靈敏度更高。其中柱后衍生操作更加簡(jiǎn)單，但是需要購(gòu)置專(zhuān)門(mén)的設(shè)備，成本較高，因此并未得到廣泛使用。超高效液相色譜法與高效液相色譜法相比，柱效更高，即使不經(jīng)過(guò)衍生化反應(yīng)，也能得到較高的靈敏度和響應(yīng)值，超高效液相色譜法在檢測(cè)食品中的黃曲霉素時(shí)，在沒(méi)有衍生的條件下，平均回收率較高，可以滿(mǎn)足食品黃曲霉素檢測(cè)的日常需要。液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)中，質(zhì)譜是一種高通量、高靈敏度和高選擇性的檢測(cè)器，可以檢測(cè)黃曲霉素，無(wú)需衍生化反應(yīng)，簡(jiǎn)化樣品前處理步驟，實(shí)現(xiàn)多毒素多組同時(shí)檢測(cè)，檢測(cè)效率大大提高，前處理簡(jiǎn)單，凈化效果好，檢測(cè)效率高，靈敏度較高，適用于食品谷物中的多組毒素殘留檢測(cè)和定量檢測(cè)，具有良好的應(yīng)用前景。

三、結(jié)語(yǔ)

黃曲霉素具有極強(qiáng)的毒性和致癌性，混入到食物中，會(huì)造成嚴(yán)重的食品安全事故。目前隨著黃曲霉素的前處理技術(shù)和檢測(cè)方法的完善和創(chuàng)新，黃曲霉素檢測(cè)更加準(zhǔn)確和便捷，傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)結(jié)果準(zhǔn)確，但過(guò)程繁瑣，無(wú)法適應(yīng)大批量的檢測(cè)工作，新型檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)速度快，但結(jié)果的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性需要進(jìn)一步提高，如何提高黃曲霉素檢測(cè)技術(shù)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，同時(shí)提高其便捷性，是黃曲霉素檢測(cè)的發(fā)展目標(biāo)。

參考文獻(xiàn)：

[1]王亞楠， 王曉斐， 王自良. 食品黃曲霉毒素總量檢測(cè)方法的研究與應(yīng)用[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)， 2018.

[2]李莉， 金銘特. 應(yīng)用高效液相色譜法檢測(cè)食品中黃曲霉毒素[J]. 食品安全導(dǎo)刊， 2018， No.203（12）：111.

[3]張萍， 彭西甜， 馮鈺锜. 食品中黃曲霉毒素檢測(cè)的樣品前處理技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 分析科學(xué)學(xué)報(bào)， 2018， 34（2）： 274-280.