皖南黃兔血清生化指標(biāo)的檢測與分析

張朝霞，丁海生，汪 勇，程廣龍，趙小偉，馬榮幸，趙輝玲，黃冬維*

（1安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，畜禽產(chǎn)品安全工程安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，合肥230031；2安徽省義華農(nóng)牧科技有限公司，池州245100）

我國是家兔養(yǎng)殖、兔肉生產(chǎn)加工和消費(fèi)大國。肉兔在我國家兔生產(chǎn)中占有非常重要的地位，占中國家兔現(xiàn)存欄數(shù)的絕大多數(shù)［1］。兔肉的營養(yǎng)特點(diǎn)是“三高三低”，即屬于高蛋白、高賴氨酸、高磷脂、低脂肪、低膽固醇和低熱量的肉類，且兔肉蛋白質(zhì)為完全蛋白質(zhì)，磷脂和不飽和脂肪酸含量較高［2］，對患有動脈硬化、冠心病、高血壓等的人群具有很好的保健作用。因此，我國居民對兔肉的消費(fèi)需求呈不斷上升的趨勢。皖南黃兔主要養(yǎng)殖于安徽池州、黃山等皖南山區(qū)，是安徽省義華農(nóng)牧科技有限公司與安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院聯(lián)合開展科技攻關(guān)，通過邊選育邊推廣的繁育措施，培育形成的背毛黃色、腹部少許白毛、獨(dú)具特色的中小型肉兔群體，其突出特點(diǎn)是耐粗飼、抗病力強(qiáng)、肉品質(zhì)好、營養(yǎng)價值高，無膻味，深受消費(fèi)者青睞。

血液是動物體內(nèi)環(huán)境的重要組成部分，血液生化水平是反映和影響家畜營養(yǎng)滿足程度、新陳代謝狀況、體內(nèi)外環(huán)境平衡狀況、機(jī)體生產(chǎn)性能和健康狀況的綜合因素［3-5］，也可以間接反映動物性食品的營養(yǎng)價值。本研究通過測定皖南黃兔的血清生化指標(biāo)，旨在揭示其生物學(xué)特性、種質(zhì)特性以及生長發(fā)育特性，以全面了解皖南黃兔不同發(fā)育階段的營養(yǎng)需求，為品種選育及飼養(yǎng)工作提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

選擇4周齡、8周齡和12周齡健康的皖南黃兔各12只（公母各半），禁食12 h后，于次日早晨用真空采血管（不含抗凝劑）采集試驗(yàn)兔耳緣靜脈血液4 mL，4℃冷藏過夜，2 500 r/min離心10 min，小心吸取上層血清，分裝到1.5 mL滅菌離心管，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 生化指標(biāo)測定

使用羅氏生化分析儀（c501）對血清生化指標(biāo)進(jìn)行檢測，測定指標(biāo)及具體方法如下：血糖（GLU）采用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法，膽固醇（CHOL）采用膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法，肌酐（CREA）采用苦味酸法，甘油三酯（TG）采用磷酸甘油氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法，尿素（UREA）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）均采用酶學(xué)速率法進(jìn)行測定，總蛋白（TP）采用雙縮脲法，白蛋白（ALB）采用溴甲酚綠法。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用Excel 2010軟件及SAS 9.1軟件統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)并進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan法進(jìn)行多重比較，結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同周齡皖南黃兔血糖、血脂指標(biāo)分析

由表1可知，4周齡公兔血清中GLU含量顯著高于8周齡母兔和12周齡公、母兔的血清中GLU含量，且各周齡公兔與母兔血清中GLU含量無明顯差異。4周齡公兔和母兔血清中CHOL含量均顯著高于8周齡和12周齡公母兔CHOL含量，且4周齡公兔血清中CHOL含量顯著高于4周齡母兔血清中CHOL含量，而8周齡和12周齡兔CHOL含量無明顯差異。血清中TG含量在不同周齡及性別的皖南黃兔間均無差異。

表1 不同周齡皖南黃兔血糖和血脂生化指標(biāo)比較Table 1 The comparison of blood glucose and lipids of Wannan yellow rabbits at differentweeks

2.2 不同周齡皖南黃兔血清蛋白及含氮代謝物分析

如表2所示，4周齡公兔和母兔血清中TP含量均顯著低于8周齡和12周齡公兔和母兔血清中TP含量，且4周齡和8周齡兔血清中TP含量在不同性別間存在顯著差異，而12周齡公兔與母兔間無明顯差異。4周齡公兔和母兔血清中ALB含量均顯著低于8周齡兔和12周齡公兔血清中ALB含量，而8周齡和12周齡兔血清中ALB含量無明顯差異，且各周齡公母兔之間血清中ALB含量差異不顯著。4周齡和8周齡兔血清中CREA含量顯著低于12周齡兔，而4周齡和8周齡兔血清中CREA含量無明顯差異，且各周齡公母兔之間血清中CREA含量差異不顯著。4周齡公兔血清中UREA含量顯著高于4周齡母兔及其他周齡公兔和母兔，而8周齡和12周齡公兔和母兔血清中UREA含量無明顯差異。

表2 不同周齡皖南黃兔血清蛋白及含氮代謝物水平分析Table 2 Analyses of serum protein and metabolites containing nitrogen of W annan yellow rabbits at different weeks

2.3 不同周齡皖南黃兔血清肝功能相關(guān)酶分析

對不同周齡、性別皖南黃兔血清中ALT和AST分析發(fā)現(xiàn)，4周齡公兔血清中ALT含量顯著低于8周齡和12周齡皖南黃兔，而4周齡母兔的血清中ALT含量顯著低于8周齡公兔和12周齡母兔。8周齡和12周齡兔血清中ALT含量無明顯差異，且各周齡公母兔之間血清中ALT含量差異不顯著。血清中AST含量在不同周齡及性別的皖南黃兔間均無明顯差異（表3）。

表3 不同周齡皖南黃兔肝功能相關(guān)酶水平分析Table 3 Analyses of the liver-associated enzyme of W annan yellow rabbits at different weeks

3 討論

血液中含有許多與動物生命活動密切相關(guān)的生化成份，它們的含量變化不僅可以反映動物機(jī)體的健康狀況，作為動物許多疾病診斷的重要依據(jù)，而且可以反映不同品種、性別、年齡動物的生理特征［6-7］。血液生化指標(biāo)的波動范圍是各種動物特有的生物學(xué)特性參數(shù)［7］。本研究通過對血清中血糖和膽固醇指標(biāo)測定發(fā)現(xiàn)，皖南黃兔血清中GLU和CHOL含量在4周齡時最高。血糖是能量代謝中最主要的功能物質(zhì)，表明皖南黃兔年齡較小時以能量利用為主。因此，在皖南黃兔周齡較小時，飼料中應(yīng)適當(dāng)添加葡萄糖以保證能量供應(yīng)。CHOL具有重要的生理作用，而過量攝入CHOL則會影響人類健康。本研究表明，年齡可以影響血清中GLU和CHOL含量，這與Dolka等［8］研究結(jié)果一致。血液膽固醇含量與肌肉膽固醇含量呈極顯著正相關(guān)［9］，因此，血液膽固醇含量也是評價肉質(zhì)的指標(biāo)之一。本研究中8周齡和12周齡皖南黃兔血清低膽固醇含量說明該品種肉質(zhì)優(yōu)良。

血清中TP和ALB含量是反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸代謝正常與否的指標(biāo)，在一定程度上代表了動物對蛋白質(zhì)的消化吸收程度及機(jī)體對蛋白質(zhì)的合成代謝狀況［10-11］，TP和ALB也是反映肝臟合成功能的主要指標(biāo)［12］。本研究表明，隨著皖南黃兔生長發(fā)育，血清中TP和ALB含量均升高，說明皖南黃兔周齡較大時以蛋白利用為主，機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收和代謝增強(qiáng)，飼料營養(yǎng)充足。性別只影響4周齡和8周齡皖南黃兔血清中TP含量，不影響血清中ALB含量。CREA是肌肉收縮時的能量來源和儲存形式，尹秀玲等［13］研究發(fā)現(xiàn)，塞北兔血清中的CREA含量要顯著高于獺兔（P＜0.05），這可能是由于塞北兔是大型肉兔，能量消耗比較大所致。本研究中，12周齡皖南黃兔血清中CREA含量顯著高于4周齡和8周齡皖南黃兔血清中CREA，說明隨著周齡的增大，肌肉更發(fā)達(dá)，能量消耗增大，性別對皖南黃兔血清中CREA含量無影響。UREA是動物體內(nèi)蛋白氮代謝主要終產(chǎn)物，能較為準(zhǔn)確的反映體內(nèi)蛋白代謝水平。臨床上，血清尿素氮是衡量腎功能的重要指標(biāo)，由肝臟合成經(jīng)腎臟排出，故也能反映機(jī)體肝腎機(jī)能的狀態(tài)［14］。4周齡公兔血清中UREA高，表明其蛋白質(zhì)的分解速率較快，4周齡母兔與其他周齡公母兔血清中UREA含量無差異，說明機(jī)體代謝機(jī)能和肝腎機(jī)能狀態(tài)穩(wěn)定。

ALT和AST在氨基酸的分解與合成中起重要作用，與生長發(fā)育速度和生產(chǎn)性能有較強(qiáng)的相關(guān)性［15］。本研究中4周齡、8周齡和12周齡皖南黃兔血清中AST的含量無顯著差異，而皖南黃兔血清中ALT含量隨著周齡的增大而增加，可能與皖南黃兔隨著周齡增長生長代謝越來越旺盛有關(guān)。性別不影響皖南黃兔血清中ALT和AST的含量。

血清生化指標(biāo)不僅能反映不同周齡和性別皖南黃兔的生長發(fā)育、生命活動和新陳代謝等基本情況特征，同時也體現(xiàn)出機(jī)體健康狀況與表型之間的相關(guān)性。Nazifi等［16］研究表明，性別顯著影響動物血液生化指標(biāo)。本研究表明，性別主要影響4周齡皖南黃兔TP、CHOL、UREA和8周齡TP水平，對其他指標(biāo)無顯著影響。周齡主要影響皖南黃兔GLU、CHOL、UREA、TP、ALB、CREA和ALT等指標(biāo)，且從本研究結(jié)果可以看出，家兔周齡較小時以能量利用為主，而周齡較大時以蛋白利用為主。因此，在選育過程中要根據(jù)生長發(fā)育階段特點(diǎn)科學(xué)飼喂，充分發(fā)揮皖南黃兔遺傳特性。