玉米赤霉烯酮對蛋雞生產(chǎn)性能、血液指標(biāo)和生殖激素水平的影響

凌阿茹，郭晉麗*，郭文博，楊俊花**，趙志輝

（1上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海201306；2上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所，上海201403）

玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEA）是禾谷鐮刀菌在適宜的溫度和濕度條件下產(chǎn)生的一種真菌毒素，廣泛存在于霉變的玉米、小麥和高粱等谷類作物中［1］。大量研究證實(shí)，ZEA及其代謝物能夠引起畜禽真菌毒素中毒［2］，影響內(nèi)臟器官發(fā)育［3］，還可導(dǎo)致動(dòng)物繁殖障礙［4］、消化系統(tǒng)功能紊亂［5］，給養(yǎng)殖業(yè)造成極大危害。已有研究發(fā)現(xiàn)，ZEA與內(nèi)源性雌激素在結(jié)構(gòu)上相似，可通過與雌激素受體（Estrogen receptor，ER）的競爭性結(jié)合，發(fā)生一系列擬雌激素效應(yīng)［6-7］，產(chǎn)生毒性。此外，ZEA與ER結(jié)合生成的化合物會(huì)轉(zhuǎn)移至胞核內(nèi)，調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)合成，進(jìn)一步影響細(xì)胞分裂和生長［8］。

蛋雞作為養(yǎng)殖業(yè)的重要組成部分，每年因真菌毒素污染造成的經(jīng)濟(jì)損失不容忽視。目前，國內(nèi)外關(guān)于ZEA單一毒素污染對蛋雞毒性作用的研究報(bào)道非常少。Borutova等［9］通過給肉雞飼喂3.44 mg/kg DON（Deoxynivalend）和3.36 mg/kg ZEA混合污染的飼料，發(fā)現(xiàn)混合毒素可以誘導(dǎo)肉雞氧化應(yīng)激進(jìn)而影響免疫功能；伍宇超等［10］研究發(fā)現(xiàn)，低劑量的ZEA并不會(huì)影響育成期蛋雞的生長性能，但會(huì)顯著影響其血清生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)。然而，目前關(guān)于ZEA對蛋雞的生產(chǎn)性能、毒性作用、安全閾值等仍沒有明確定論。

本試驗(yàn)選用ZEA標(biāo)準(zhǔn)品，采用直接灌胃的方式研究不同劑量ZEA處理對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、血常規(guī)指標(biāo)、血液生化指標(biāo)和生殖激素水平的影響，觀察ZEA對蛋雞的臨床毒性效應(yīng)，探究蛋雞對ZEA的安全劑量范圍，旨在為真菌毒素毒理學(xué)研究提供有價(jià)值的理論依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

ZEA標(biāo)準(zhǔn)品：淺褐色粉末，純度≥99%，Pribolab，新加坡，（北京普華仁生物技術(shù)開發(fā)有限公司）；乙醇、乙腈：色譜純，（Merck，美國）；氯化鈉（上海埃彼化學(xué)試劑有限公司）；血清生殖激素ELISA試劑盒（上海潤裕生物科技有限公司）。

標(biāo)準(zhǔn)品先用乙醇∶乙腈（4∶1，v∶v）溶解，后用生理鹽水稀釋，其中乙醇∶乙腈的終體積濃度控制在1%以下。

EMT-7300型多功能蛋品分析儀（Robotmation，日本）；EFG-0503型蛋殼強(qiáng)度測定儀（Robotmation，日本）；Sorvall ST-16R型高速冷凍離心機(jī)（Thermo Fisher，美國）；HB型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（英諾華，中國）；Au-5800型全自動(dòng)血液生化分析儀（Beckman，美國）；Infinite M-200型多功能酶標(biāo)儀（Tecan，瑞士）。

1.2 飼養(yǎng)管理與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

隨機(jī)選取同一批次、同一品種、體況良好、產(chǎn)蛋率一致的34周齡海蘭蛋雞100只，隨機(jī)分為5組，每組設(shè)4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只，于2017年10月10日至11月21日在上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所動(dòng)物房進(jìn)行飼養(yǎng)。采用直接灌胃的方式，對照組灌胃等量生理鹽水，試驗(yàn)組分別灌胃0.5 mg/kg、5 mg/kg、50 mg/kg和200 mg/kg ZEA（飼糧，每只雞按每天150 mg飼糧飼喂），預(yù)飼期2周，試驗(yàn)期4周，試驗(yàn)期間連續(xù)灌服ZEA，每天下午產(chǎn)蛋結(jié)束后進(jìn)行。選用3層階梯籠養(yǎng)，每籠1只，按照封閉式蛋雞養(yǎng)殖場規(guī)定飼養(yǎng)，保證每天充足光照16 h，室溫范圍16—20℃，濕度50%—60%。每日6：00喂料1次，自由采食、飲水。蛋雞飼喂基礎(chǔ)飼糧（表1）參照雞的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 33—2004）并結(jié)合羅愛瓊等［11］的方法配制。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels in basal diet（air dry basis） %

1.3 樣品采集與檢測

1.3.1 生產(chǎn)性能

每天詳細(xì)記錄各組的產(chǎn)蛋數(shù)、軟破殼蛋數(shù)、蛋重、采食量和死亡雞只數(shù)，每周測雞體重，計(jì)算整個(gè)試驗(yàn)期不同組的平均蛋重、產(chǎn)蛋率、采食量、料蛋比。計(jì)算公式如下：

平均蛋重（g）=平均每日總蛋重/總蛋數(shù)；

產(chǎn)蛋率=平均每日總蛋數(shù)/雞數(shù)×100%；

采食量（g/d）=每日消耗飼糧總量/雞數(shù)；

料蛋比=采食量/產(chǎn)蛋重。

1.3.2 蛋品質(zhì)測定

試驗(yàn)結(jié)束前3 d（2017年11月19—21日），連續(xù)收集各試驗(yàn)組雞蛋，每組隨機(jī)選取30枚雞蛋用多功能蛋品分析儀和蛋殼強(qiáng)度測定儀檢測以下指標(biāo)：蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋殼顏色等。

1.3.3 血常規(guī)指標(biāo)測定

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)（2017年11月21日），每只雞用真空管翅靜脈采血5 mL。其中，1 mL由加肝素鈉抗凝劑的真空管收集，30 min內(nèi)用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測定血常規(guī)指標(biāo)：白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、淋巴細(xì)胞總數(shù)（LY）、單核細(xì)胞數(shù)（MO）、中性粒細(xì)胞數(shù)（GR）、血紅蛋白濃度（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板總數(shù)（PLT）；4 mL由不含抗凝劑的真空管收集，3 000 r/min離心15 min，吸取上層血清，-20℃冷凍保存，用于血液生化指標(biāo)分析及激素水平測定。

1.3.4 臟器系數(shù)

采血結(jié)束后，每個(gè)試驗(yàn)組每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取3只雞，共60只進(jìn)行宰殺，手術(shù)分離心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、卵巢和子宮等器官，準(zhǔn)確稱重并根據(jù)如下公式計(jì)算：

臟器系數(shù)=臟器重量（g）/動(dòng)物體重（g）×100%。

1.3.5 血液生化指標(biāo)測定

用全自動(dòng)血液生化分析儀對以下指標(biāo)進(jìn)行測定：白蛋白（ALB）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、尿素（UREA）、堿性磷酸酶（ALP）、總膽紅素（TBILI）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、總蛋白（TP）、肌酐（CRE）、球蛋白（GLB）。

1.3.6 血清生殖激素水平分析

多功能酶標(biāo)儀對血清中以下激素水平進(jìn)行測定：促黃體素（Luteinizing hormone，LH）、卵黃蛋白原（Vitellogenin，VTG）、孕酮（Progesterone，P4）、β內(nèi)啡肽（β-endorphin，β-EP）、雌二醇（Estradiol，E2）、生長激素（Growth hormone，GH）和促卵泡素（Follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH）。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。差異顯著性檢驗(yàn)采用單因素方差分析（One-way ANOVA，LSD），其中P＜0.05為差異顯著、P＜0.01為差異極顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 ZEA對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可見，各試驗(yàn)組蛋雞體重均未見顯著變化。與對照組相比，只有5 mg/kg組產(chǎn)蛋率顯著提高，且顯著高于其他各組（P＜0.01）；同時(shí)50 mg/kg組的產(chǎn)蛋率還顯著低于0.5 mg/kg組（P＜0.05）。此外，5 mg/kg、50 mg/kg和200 mg/kg組的采食量均顯著高于對照組（P＜0.05或P＜0.01），200 mg/kg組還顯著高于0.5 mg/kg組（P＜0.05）。與對照組相比，0.5 mg/kg、5 mg/kg和50 mg/kg組平均蛋重顯著提高（P＜0.05或P＜0.01），200 mg/kg組卻顯著降低（P＜0.01）；與0.5 mg/kg組相比，5 mg/kg、50 mg/kg和200 mg/kg組平均蛋重均極顯著降低，且呈劑量效應(yīng)關(guān)系（P＜0.01）。與對照組相比，0.5 mg/kg組料蛋比無顯著變化（P＞0.05），5 mg/kg、50 mg/kg和200 mg/kg組均顯著提高（P＜0.05或P＜0.01），其中200 mg/kg組料蛋比顯著高于5 mg/kg和50 mg/kg組（P＜0.05）。

表2 不同劑量ZEA對蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of ZEA with different doses on laying performance in laying hens

2.2 ZEA對蛋品質(zhì)的影響

由表3可見，各試驗(yàn)組蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度、蛋白高度、哈氏單位均未見顯著變化。與對照組相比，0.5 mg/kg、5 mg/kg和50 mg/kg組蛋形指數(shù)均無顯著變化，只有200 mg/kg組顯著提高（P＜0.05）；0.5 mg/kg和50 mg/kg組蛋黃顏色顯著降低，而5 mg/kg和200 mg/kg組無顯著變化。0.5 mg/kg組蛋殼顏色較對照組顯著降低（P＜0.05），其余各組均無顯著變化，而與0.5mg/kg組相比，50mg/kg組蛋殼顏色顯著提高（P＜0.05）。

表3 不同劑量ZEA對蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effects of ZEA with different doses on egg quality

2.3 ZEA對蛋雞各組織臟器系數(shù)的影響

由表4可見，各試驗(yàn)組心、肝、脾、肺和子宮的臟器系數(shù)均無顯著差異。與對照組相比，50 mg/kg和200 mg/kg組腎臟系數(shù)顯著提高（P＜0.05）。隨著ZEA灌胃劑量的增加，卵巢系數(shù)有降低趨勢，但在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異，只有200 mg/kg組顯著低于對照組（P＜0.05）。

表4 不同劑量ZEA對蛋雞各組織臟器系數(shù)的影響Table4 Effects of ZEA with different doses on organ indexes in laying hens %

2.4 ZEA對蛋雞血常規(guī)指標(biāo)的影響

由表5可見，各試驗(yàn)組HGB、HCT、RBC、MCV、MCHC和PLT均未見顯著變化。與對照組相比，0.5 mg/kg組WBC和LY數(shù)量均無顯著變化，5 mg/kg、50 mg/kg和200 mg/kg組的WBC和LY數(shù)量均顯著增加（P＜0.01），且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系；同時(shí)，50 mg/kg和200 mg/kg組WBC和LY數(shù)量顯著高于5 mg/kg組（P＜0.01）。隨著ZEA灌胃劑量的增加，MO和GR數(shù)量逐漸增加，也呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，其中50 mg/kg和200 mg/kg組均顯著高于對照組（P＜0.01）。

表5 不同劑量ZEA對蛋雞血常規(guī)的影響Table 5 Effects of ZEA w ith different doses on hematological indices in laying hens

2.5 ZEA對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

由表6可見，各試驗(yàn)組除了UREA和CRE外，其他生化指標(biāo)均未呈現(xiàn)顯著差異。與對照組相比，0.5 mg/kg組UREA濃度無顯著變化，5 mg/kg和50 mg/kg組顯著升高（P＜0.05），200 mg/kg組極顯著升高（P＜0.01）。隨著ZEA灌胃劑量的增加，CRE濃度有上升的趨勢，與對照組相比，只有50 mg/kg和200 mg/kg組CRE濃度顯著升高（P＜0.05）。

表6 不同劑量ZEA對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響Table 6 Effects of ZEA w ith different doses on serum biochem ical parameter in laying hens

2.6 ZEA對蛋雞血液生殖激素水平的影響

由表7可見，各試驗(yàn)組血清中VTG、E2、GH和FSH水平均無顯著差異。與對照組相比，0.5 mg/kg組LH和P4水平均無顯著變化，5 mg/kg、50 mg/kg和200 mg/kg組LH水平均顯著降低（P＜0.01），P4水平均顯著提高（P＜0.05），呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系。此外，0.5 mg/kg和5 mg/kg組β-EP水平無顯著變化（P＞0.05），50 mg/kg和200 mg/kg組較對照組顯著提高（P＜0.05或P＜0.01），且200 mg/kg組顯著高于50 mg/kg組（P＜0.01）。

表7 不同劑量ZEA對蛋雞血液生殖激素水平的影響Table 7 Effects of ZEA w ith different doses on reproductive hormone levels in laying hens

3 討論

3.1 ZEA對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

Jia等［12］研究發(fā)現(xiàn)，ZEA污染量為0.2602 mg/kg的日糧對蛋雞產(chǎn)蛋量和采食量均無顯著影響。本試驗(yàn)中，當(dāng)ZEA劑量不高于0.5 mg/kg時(shí)，與對照組相比產(chǎn)蛋率和采食量均無顯著變化，與Jia等［12］研究結(jié)果一致。當(dāng)ZEA劑量達(dá)到5 mg/kg時(shí)，產(chǎn)蛋率、采食量和料蛋比較對照組均顯著提高，表明低劑量的ZEA能夠提高蛋雞產(chǎn)蛋性能。有研究顯示，禽類的產(chǎn)蛋性能與卵巢卵泡的生長發(fā)育密切相關(guān)［13］，筆者推測ZEA作為一種類雌激素，當(dāng)劑量為5 mg/kg時(shí)可促進(jìn)蛋雞性腺和卵泡發(fā)育，進(jìn)而提高蛋雞的產(chǎn)蛋率，但其作用機(jī)制仍需進(jìn)一步深入探究。本研究中，0.5 mg/kg的ZEA可以使蛋重顯著提高，當(dāng)ZEA劑量達(dá)到200 mg/kg時(shí)，蛋重顯著降低，表明高劑量的ZEA會(huì)產(chǎn)生過雌激素毒性作用，對卵巢造成損傷，降低蛋雞產(chǎn)蛋性能，有研究發(fā)現(xiàn)，ZEA會(huì)抑制肉雞、豬、狗和大鼠等雌性動(dòng)物的卵巢發(fā)育［14-17］。

3.2 ZEA對蛋品質(zhì)的影響

蛋品質(zhì)作為評價(jià)雞種優(yōu)劣的重要指標(biāo)，本試驗(yàn)中，對照組蛋形指數(shù)在正常值范圍內(nèi)，200 mg/kg組較對照組顯著提高，這可能與高劑量的ZEA影響蛋雞生殖功能和器官發(fā)育有關(guān)。ZEA與雌激素受體結(jié)合表現(xiàn)出弱雌激素活性，會(huì)造成動(dòng)物體內(nèi)生殖激素紊亂，生殖器官損傷，對動(dòng)物繁殖機(jī)能造成嚴(yán)重的影響［15］。有研究顯示，蛋殼顏色不僅與遺傳有關(guān)，還與殼上膜的量及其中所含色素的量有關(guān)，殼上膜是蛋殼的最外層，母雞殼上膜的分泌量不隨年齡的變化而提高，但在蛋重增大時(shí)，有限的殼上膜分布不到擴(kuò)大的蛋殼上，因此蛋殼顏色變淺［18］。在本研究中，與對照組相比，只有0.5 mg/kg組蛋殼顏色顯著降低，因此推測與其蛋重顯著提高有關(guān)。另外，與對照組相比，0.5 mg/kg和50 mg/kg組蛋黃顏色顯著降低，這可能與ZEA影響卵泡發(fā)育，導(dǎo)致色素沉積不充分有關(guān)。因?yàn)樯爻练e會(huì)隨卵巢中卵泡的發(fā)育而增強(qiáng)，而卵泡發(fā)育通常需要5—10 d，因此蛋黃完全著色需要5—10 d［13］，推測在此過程中ZEA破壞蛋雞的生殖發(fā)育系統(tǒng)，影響了卵泡發(fā)育，進(jìn)而影響色素沉積最終導(dǎo)致蛋黃顏色變淺，但其作用機(jī)制有待進(jìn)一步深入研究。

3.3 ZEA對蛋雞各組織臟器系數(shù)的影響

臟器系數(shù)能夠直觀地反映不同濃度外源性有毒有害物質(zhì)作用后的蛋雞內(nèi)臟器官生長發(fā)育或病變情況。臟器系數(shù)增大，提示臟器充血、水腫或增生肥大等變化；臟器系數(shù)減小，提示臟器萎縮及其他退行性疾病。Salem等［19］研究發(fā)現(xiàn)，40mg/kg b.w.的ZEA可使小鼠腎臟細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，從而對腎臟產(chǎn)生毒性作用。本研究中，隨著ZEA灌胃劑量的增加，各試驗(yàn)組的腎臟臟器系數(shù)逐漸增加，呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，當(dāng)ZEA灌胃劑量高于50 mg/kg，腎臟臟器系數(shù)較對照組均顯著提高，表明ZEA灌胃劑量高于50 mg/kg時(shí)，會(huì)誘導(dǎo)腎臟水腫充血，增生肥大，對腎臟造成明顯損傷。Jia等［20］研究發(fā)現(xiàn)，給妊娠母豬飼喂被ZEA污染的飼糧后，腎臟發(fā)生腫大，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。當(dāng)ZEA灌胃劑量達(dá)到200 mg/kg時(shí)，卵巢臟器系數(shù)顯著降低，表明200 mg/kg的ZEA會(huì)使蛋雞卵巢萎縮，造成損傷，進(jìn)一步證明了高劑量ZEA對蛋雞卵巢的損傷作用。Zwierzchowski等［21］也發(fā)現(xiàn)，0.2 mg/kg.b.w.的ZEA處理母豬后，會(huì)抑制其卵巢卵泡的生長發(fā)育，提示與ZEA誘導(dǎo)卵巢顆粒細(xì)胞發(fā)生凋亡有關(guān)。這些毒性作用，一方面與ZEA發(fā)揮類雌激素作用，與細(xì)胞質(zhì)雌激素受體結(jié)合、進(jìn)入細(xì)胞核導(dǎo)致染色體異常，抑制DNA和蛋白質(zhì)合成有關(guān)，另一方面與ZEA誘導(dǎo)細(xì)胞氧化損傷進(jìn)而發(fā)生凋亡相關(guān)［22］。

3.4 ZEA對蛋雞血常規(guī)指標(biāo)的影響

伍宇超等［10］通過在育成期蛋雞基礎(chǔ)日糧中添加0.4 mg/kg的ZEA發(fā)現(xiàn)，蛋雞血液中性粒細(xì)胞數(shù)顯著提高；Maaroufi等［23］發(fā)現(xiàn)，給雌性大鼠腹膜注射1.5—5.0 mg/kg的ZEA，48 h后大鼠血液白細(xì)胞數(shù)量顯著提高。本研究也發(fā)現(xiàn)當(dāng)ZEA灌胃劑量高于5 mg/kg時(shí)，蛋雞血液中WBC、LY和GR數(shù)量均顯著提高；當(dāng)劑量高于50 mg/kg時(shí)，MO數(shù)量顯著提高，可見當(dāng)ZEA高于5 mg/kg時(shí)可誘導(dǎo)蛋雞發(fā)生嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。

3.5 ZEA對蛋雞血液生化指標(biāo)的影響

尿素（UREA）和肌酐（CRE）水平是體現(xiàn)腎臟腎小球的濾過功能的重要指標(biāo)，當(dāng)腎臟受損時(shí)會(huì)引起UREA和CRE濃度升高。本試驗(yàn)中，當(dāng)ZEA灌胃劑量高于50mg/kg時(shí)，血清中UREA和CRE濃度較對照組均顯著提高，表明ZEA濃度在高于50 mg/kg時(shí)會(huì)嚴(yán)重?fù)p傷蛋雞腎臟。孫真真等［24］給蛋雞灌胃ZEA后也發(fā)現(xiàn)血清中UREA和CRE濃度顯著提高，與本研究結(jié)果一致，進(jìn)一步證明腎臟是ZEA毒性作用的另一靶標(biāo)器官。

3.6 ZEA對蛋雞血清生殖激素水平的影響

研究顯示，創(chuàng)傷后血漿內(nèi)β-EP水平升高，推測β-EP水平也是反應(yīng)創(chuàng)傷早期炎癥變化的重要標(biāo)志物之一［25］。本試驗(yàn)中，當(dāng)ZEA灌胃劑量高于5 mg/kg時(shí)，與對照組相比β-EP水平顯著提高，進(jìn)一步表明ZEA誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生了嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。促黃體素（LH）能誘導(dǎo)排卵前的卵泡生長發(fā)育并觸發(fā)排卵，促進(jìn)黃體形成同時(shí)分泌孕酮（P4）。在本研究中隨著ZEA灌胃劑量的增加，LH水平逐漸降低，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。當(dāng)ZEA劑量高于5mg/kg時(shí)，與對照組相比各試驗(yàn)組LH水平均極顯著降低，這可能與ZEA的類雌激素作用有關(guān)，由于雌激素對下丘腦和垂體發(fā)揮負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用，當(dāng)ZEA進(jìn)入蛋雞體內(nèi)后代替雌激素發(fā)揮作用，誘導(dǎo)垂體促性腺激素分泌水平降低，進(jìn)一步導(dǎo)致LH水平降低。而P4水平的極顯著提高，進(jìn)一步證明了ZEA是通過持續(xù)發(fā)揮類雌激素作用來誘導(dǎo)P4分泌水平提高的。

4 結(jié)論

①當(dāng)ZEA劑量高于5 mg/kg時(shí)，會(huì)降低平均蛋重、增加料蛋比，影響蛋雞的生產(chǎn)性能，同時(shí)對蛋殼和蛋黃顏色沉積也有一定的干擾作用。

②ZEA灌胃劑量高于5 mg/kg時(shí)，蛋雞血液中WBC、LY、GR、MO數(shù)量及內(nèi)分泌激素β-EP水平均顯著提高，表明ZEA誘導(dǎo)蛋雞產(chǎn)生嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。

③高劑量ZEA灌胃導(dǎo)致蛋雞腎臟水腫充血、臟器系數(shù)顯著提高，血液UREA和CRE含量提高，提示腎臟是ZEA對蛋雞毒性作用的另一靶標(biāo)器官。

④高劑量的ZEA不僅誘導(dǎo)蛋雞卵巢萎縮，而且會(huì)干擾性激素β-EP、LH、P4等的分泌。