“十八反”中藥配伍治療大鼠骨折鉬靶X線觀察實驗

王 帥

（南陽醫(yī)學高等?？茖W校醫(yī)學影像實驗室，河南 南陽 473058）

骨折愈合是一種復雜而有序的、多種細胞參與的、多種因素調(diào)控的動態(tài)過程。參與的細胞種類較多，涉及的信號通路和調(diào)節(jié)因子繁雜?；钛?，消腫止痛是中醫(yī)理論治療骨折的首要原則，手法復位固定驅(qū)散淤血，能使骨折愈合速度加快。鉬靶X射線檢查與普通X射線檢查軟組織相比具有較好的效果，本實驗采用X射線的光電吸收作用的特性對肌腱等軟組織分辨率較高的鉬靶X射線，分析大鼠骨折愈合過程骨痂中的密度，以探討烏頭與半夏改善微循環(huán)這一特性對骨折愈合的促進作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 由學校實驗設備處提供的健康成年大鼠20只，雌雄各半，體質(zhì)量在（230±20）g，制成骨折模型。隨機分為2組，每組10只。醫(yī)學實驗動物環(huán)境設施清潔級鼠類實驗室，普通飼料喂養(yǎng)，動物室溫度（25±2）℃。

1.2 實驗器材 鉬靶X射線機、骨折夾板。實驗過程對動物處置符合2006年科技部發(fā)布的善待實驗動物的指導性意見。

1.3 實驗方法 使用10%水合氯醛按體質(zhì)量乘0.3%腹腔麻醉后，若麻醉效果不佳適量追加藥量。烏頭、半夏各取60 g，由南陽市北京同仁堂臥龍路店提供，經(jīng)南陽醫(yī)學高等?？茖W校方劑學教研室唐成定副教授鑒定，加純凈水1000 mL，武火煎熬至沸騰后轉(zhuǎn)文火50 min，放涼密封放置冰箱備用。采取Marturano閉合骨折造模方法［1］，使大鼠右脛骨中段骨折，后立即復位。確定復位可靠后對照組逐層縫合，無菌紗布覆蓋切口，實驗組縫合切口后用無菌紗布浸蘸煎制后的半夏烏頭湯劑，覆蓋切口。2組分別再以石膏繃帶作石膏管型固定。

1.4 觀察指標 分別與2周、3周、4周麻醉后使用鉬靶X線機攝取正、側2個體位觀察手術及骨痂不同時期的密度及生長期情況。在不同時期處死標本后，沿骨干長軸垂直方向測量骨痂的最大直徑［2］。

1.5 X級攝影評分標準 參照骨痂的密度量及連接、塑形程度評分，骨折斷端模糊程度進行5級評定。1分：骨膜反應輕度，斷端邊緣稍模糊，無骨痂。2分：內(nèi)外骨痂密度略高于軟組織，斷端邊緣明顯模糊，骨折間隙1/2以上出現(xiàn)骨痂。3分：內(nèi)外骨痂密度近似于髓腔，斷端邊緣大部分消失，骨折間隙1/2以上骨痂連接。4分：內(nèi)外骨痂密度近似于皮質(zhì)骨，斷端邊緣趨于消失，骨折間隙1/2以上骨痂連接。5分：內(nèi)外骨痂密度同皮質(zhì)骨，斷端邊緣完全消失，并連接、塑形、髓腔再通。

1.6 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均值±標準差表示，組間比較采用單因素方差分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 2組骨折大鼠骨折斷端X線測量 大鼠20只均納入實驗分析，分析結果無遺漏。X射線檢查過后統(tǒng)一進行2組對比，作統(tǒng)計學處理，結果見表1及圖1～4。

表1 2組骨折大鼠X線攝影評分結果 （，分）

表1 2組骨折大鼠X線攝影評分結果 （，分）

組別 鼠數(shù) 術后2周 術后4周實驗組 10 2.132±0.140 3.832±0.220對照組 10 31.611±0.321 13.143±0.126 P值 ＜0.05 ＜0.01

圖1 實驗組術后照片

圖2 實驗組術后2周見少量骨痂形成

圖3 實驗組術后4周骨折線消失，大量骨痂形成

圖4 對照組術后

圖5 對照組術后2周骨折線清晰

圖6 對照組術后4周有少量骨痂形成

2.2 2組骨折大鼠骨痂組織BMD測量 實驗組用藥后4周時BMD值較對照組高，差異具有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表 2。

表2 2組骨折大鼠骨痂組織BMD測定 （，g·cm-2）

表2 2組骨折大鼠骨痂組織BMD測定 （，g·cm-2）

組別 鼠數(shù) 術后2周 術后4周實驗組 10 0.262±0.005 0.312±0.013對照組 10 0.254±0.003 0.258±0.006

3 討論

骨折在愈合過程中，骨痂的情況是判斷骨折愈合狀況最重要的指標。對骨痂的觀察主要有2個方面：一是骨痂的直徑，主要用于骨痂愈合的初中期。在骨折后期，隨著鈣化過程，骨痂直徑逐漸縮小，強度逐漸增加。中藥烏頭，其性辛苦大熱，有大毒。歸心肝脾腎經(jīng)，善祛風除濕、溫經(jīng)止痛，多用于風寒濕痹，關節(jié)疼痛，心腹冷痛，寒疝作痛等［3-4］。制半夏，性溫、味辛，有毒，歸脾胃肺經(jīng)，功善降逆止嘔、燥濕化痰、消痞散結，主治濕痰冷飲、嘔逆反胃、咳喘痰多、胸膈脹滿、痰厥頭痛、頭暈不眠、痰核、癭瘤、癰疽腫毒等病癥。烏頭配制半夏是中藥“十八反”的配伍禁忌，其配伍對肝腎功能均有損害［2］。但在現(xiàn)代臨床實踐研究中發(fā)現(xiàn)，制半夏和烏頭配伍可以祛除骨傷科疾病中的沉疴頑疾，主要利用方藥配伍猛烈之性，達到溫陽祛瘀以通絡、祛風散寒以除痹、舒經(jīng)鎮(zhèn)痛消腫，達到常規(guī)藥物及配方很難達到的治療目的［5-6］。

醫(yī)學影像科將鉬靶X射線稱之為乳腺攝影，其它軟組織影像顯示不及其效果。鉬靶X射線質(zhì)軟，管電壓較低一般在30 KV以下，較鎢靶相比灰霧度小。這一特性決定了鉬靶X射線波長為0.63 nm或0.71 nm，較鎢靶波長長3.0～4.0倍，使其穿透力較小，易于軟組織和小骨骼吸收。適合教學過程中的體小、肢體組織薄的動物X射線實驗［7］。根據(jù)鉬靶X射線能量特點，可增加組織間密度差，提高X射線照片對比度，分辨力強，使軟組織與個結構顯像保持完整，可獲取較穩(wěn)定，適宜的鉬靶X射線圖像。與普通X射線圖像具備明顯的診斷優(yōu)勢，有效提高了X射線診斷的準確性。大鼠體小，骨結構細密，使用普通X射線照片觀察結果不清。在一般的動物試驗中，為了測量后期骨痂愈合的情況，往往采用生物力學的方法，但這種方法只適用于后期骨痂強度較好的情況，不能顯示從初期到后期骨痂和鈣化的愈合過程，因此有很大的局限性［8-9］。

利用骨密度測量儀測量骨的鈣化程度在臨床教學及科研上都非常有效，但在教學過程的動物實驗研究來說應用相對比較困難。使用X線測量為工具來分析骨痂愈合過程中骨強度的變化，根據(jù)實驗及烏頭與制半夏的藥理作用證實了對骨折愈合的促進作用。

鉬靶X射線可以作為測量觀察大鼠骨折模型的科學方法，避免了普通鎢靶X射線的不足，利用乳腺攝影技術獲得了高質(zhì)量的影像信息，對于體厚較薄的組織、肌腱類的組織影像學檢查，既可以提高診斷效率，又可以降低患者檢查費用。同時又符合現(xiàn)所提出的熱點X線小劑量影像學檢查。