某規(guī)?；i場(chǎng)PRRSV及葡萄球菌混合感染的診斷

鄧珊珊，張 海，徐春志

（1．貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550025；2．貴陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽(yáng)，550081）

2017年12月貴州省某規(guī)?；i場(chǎng)的仔豬出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉、精神沉郁、呼吸急促、耳根皮膚呈紫色、病重仔豬很快死亡等臨床癥狀。發(fā)病后該養(yǎng)殖場(chǎng)使用多類抗生素藥物進(jìn)行治療后仍無(wú)明顯效果。豬場(chǎng)送檢2頭發(fā)病嚴(yán)重仔豬到實(shí)驗(yàn)室確診。為了弄清病因，采用流行病學(xué)調(diào)查、臨床病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室診斷等方法，確診為豬繁殖與呼吸綜合征病毒及葡萄球菌混合感染。本病例就豬繁殖與呼吸綜合征病毒及葡萄球菌的診治過(guò)程進(jìn)行總結(jié)和分析，現(xiàn)將病例報(bào)告如下。

1 發(fā)病情況

該規(guī)模化豬場(chǎng)總存欄數(shù)有5 000余頭，發(fā)病豬有100頭左右，病死率達(dá)50%，從2017年底開(kāi)始出現(xiàn)有母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等現(xiàn)象；所產(chǎn)仔豬出現(xiàn)食欲減退、呼吸困難和腹瀉等現(xiàn)象。發(fā)病后豬場(chǎng)獸醫(yī)對(duì)仔豬使用青霉素、鏈霉素等藥物進(jìn)行治療，但無(wú)明顯好轉(zhuǎn)，嚴(yán)重豬只很快死亡。

2 臨床癥狀

通過(guò)畜主主訴了解到，該豬場(chǎng)仔豬最初的生長(zhǎng)狀況較好，之后相繼出現(xiàn)精神沉郁、食欲減退、消瘦，行走無(wú)力，呼吸困難，豬只耳朵、腹部出現(xiàn)紫斑等癥狀；嚴(yán)重豬只很快死亡。

3 病理剖解變化

對(duì)送檢病死的2頭斷奶仔豬進(jìn)行剖檢發(fā)現(xiàn)病死豬腹股溝淋巴結(jié)腫大（圖1）；扁桃體腫大；肝臟表面有出血點(diǎn)（圖2）；肺臟腫大充血、出血、水腫；腎臟腫大、有針尖大小出血點(diǎn)（圖3）；脾臟充血、出血、有壞死斑點(diǎn)（圖4）；腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血、瘀血；病豬心包有大量積液。

圖1 腹股溝淋巴結(jié)腫大

圖2 肝臟有出血點(diǎn)

圖3 腎臟針尖狀出血點(diǎn)

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 細(xì)菌的分離培養(yǎng)

圖4 脾臟有壞死斑點(diǎn)

無(wú)菌取剖解的病死豬心臟、肝、脾、肺、腎接種于鮮血瓊脂平板，分別在有氧和厭氧條件下37 ℃培養(yǎng)24 h，結(jié)果長(zhǎng)出圓形凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤(rùn)，不透明的菌落。挑取單個(gè)細(xì)菌落進(jìn)行革蘭氏染色及顯微鏡觀察，油鏡下可觀察到革蘭氏陽(yáng)性球菌（圖5），經(jīng)生化實(shí)驗(yàn)鑒定為葡萄球菌。對(duì)分離細(xì)菌進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，結(jié)果顯示復(fù)方磺胺間甲基嘧啶鈉、多西環(huán)素、丁胺卡那等藥物敏感。

4.2 病毒檢測(cè)

圖5 10×100油鏡下革蘭氏陽(yáng)性球菌

分別取病死豬的脾臟、淋巴結(jié)、腦、肺臟等病料，研磨，離心提取上清，采用北京世紀(jì)元亨RNA提取試劑盒提取總RNA，分別應(yīng)用針對(duì)豬瘟病毒（目的片段235 bp）、豬圓環(huán)病毒2型（目的片段 1 154 bp）、豬偽狂犬病毒（目的片段217 bp）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（目的片段436 bp）的特異性引物進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增，產(chǎn)物通過(guò)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。豬瘟病毒、豬偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒2型未擴(kuò)增出特異性片段，送檢樣本中檢出豬繁殖與呼吸綜合征病毒病原核酸特異性片段，見(jiàn)圖6。

圖6 PRRSV PT-PCR檢測(cè)結(jié)果

5 確診

根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理剖解癥狀、細(xì)菌分離、生化實(shí)驗(yàn)、病毒PCR/RT-PCR擴(kuò)增，確診該規(guī)模化豬場(chǎng)送檢仔豬為豬繁殖與呼吸綜合征病毒及葡萄球菌混合感染。

6 防治

首先將發(fā)病豬挑出，單獨(dú)隔離飼養(yǎng)，建議緊急免疫豬繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗，可加倍劑量注射；將病死豬及時(shí)進(jìn)行無(wú)害化處理，對(duì)豬場(chǎng)環(huán)境進(jìn)行消毒處理。注意飼養(yǎng)管理環(huán)節(jié)中飲水、飼料衛(wèi)生；加強(qiáng)環(huán)境消毒，并注意防治、消毒藥物的交替使用，避免產(chǎn)生耐藥性；發(fā)病豬可參考細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果使用復(fù)方磺胺間甲基嘧啶鈉、多西環(huán)素、丁胺卡那等藥物進(jìn)行繼發(fā)感染治療，但要注意抗菌藥物交替使用，防止產(chǎn)生耐藥性。

加強(qiáng)管理，嚴(yán)格控制人員和物品的出入，各豬舍的飼養(yǎng)人員和獸醫(yī)技術(shù)人員禁止相互串門。對(duì)豬舍、轉(zhuǎn)豬的車輛、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)地進(jìn)行嚴(yán)格消毒，同時(shí)保證飲水干凈。對(duì)新購(gòu)買的豬只要加強(qiáng)隔離、檢疫；各豬群要做好疫苗免疫，及時(shí)抽樣檢測(cè)血清抗體水平，對(duì)免疫不合格的要及時(shí)補(bǔ)免。豬場(chǎng)制定出生物安全管理制度，并嚴(yán)格執(zhí)行。