基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的“川芎-延胡索”藥對(duì)作用機(jī)制研究

賀豐 朱立國(guó) 趙赫

摘要 目的：運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)理念和技術(shù)研究“川芎-延胡索”藥對(duì)的主要活性成分、靶點(diǎn)和藥理學(xué)作用機(jī)制。方法：通過(guò)檢索中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)（TCMSP）數(shù)據(jù)庫(kù)，結(jié)合口服生物利用度和類(lèi)藥性分析，篩選出川芎和延胡索的主要成分、靶點(diǎn)信息，采用Cytoscape軟件構(gòu)建活性成分-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，獲取的靶點(diǎn)信息，篩選核心靶點(diǎn)。利用DAVID在線(xiàn)分析工具對(duì)靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體（GO）功能富集分析和KEGG通路分析。結(jié)果：從“川芎-延胡索”藥對(duì)中篩選得到58個(gè)主要活性成分，相關(guān)作用于靶點(diǎn)220個(gè)，主要涉及在癌癥、信號(hào)傳導(dǎo)、免疫、細(xì)胞通訊及凋亡等生物學(xué)過(guò)程中的多條信號(hào)通路。結(jié)論：本研究初步揭示了“川芎-延胡索”藥對(duì)的主要活性成分、靶點(diǎn)及協(xié)同作用機(jī)制，為進(jìn)一步深入探討其藥理學(xué)作用提供了參考。

關(guān)鍵詞 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);川芎;延胡索;作用機(jī)制

Abstract Objective：To study the main active ingredients，targets and pharmacological mechanism of “Rhizoma Ligustici Chuanxiong-Rhizoma Corydalis” drug pair based on network pharmacology.Methods：The chemical components and targets related to Rhizoma Ligustici Chuanxiong-Rhizoma Corydalis were researched from the Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform（TCMSP）according to oral bioavailability（OB）and drug likeness（DL）.Cytoscape 3.6.0 software was used to build the active ingredient-target network model and screen for core targets.The GO and KEGG pathways in the targets were analyzed by DAVID.Results：58 active components were screened from “Rhizoma Ligustici Chuanxiong-Rhizoma Corydalis” drug pair，involving 220 related action targets.It mainly involved multiple signaling pathways such as cancer，signal transduction，immunity，cell communication and apoptosis signaling pathways.Conclusion：This paper preliminarily revealed the main active ingredients，targets and synergistic mechanism of the herbal pair of “Rhizoma Ligustici Chuanxiong-Rhizoma Corydalis”，providing a reference for further exploration of its pharmacological effects.

Key Words Network pharmacology; Rhizoma Ligustici Chuanxiong; Rhizoma Corydalis; Action mechanism

中圖分類(lèi)號(hào)：R285 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.10.009

“川芎-延胡索”為經(jīng)典的臨床搭配使用藥物組合。川芎性屬辛溫，具有活血化瘀，行氣開(kāi)郁，祛風(fēng)止痛的作用。臨床上婦科主要用于月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、產(chǎn)后瘀血疼痛;內(nèi)科常用于胸脅疼痛、頭痛眩暈;骨科常用于寒濕痹痛、跌打損傷。延胡索性溫，味辛、苦;具有活血散瘀、理氣止痛功效。臨床常用于胸脅、腕腹疼痛，經(jīng)閉痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻，跌撲腫痛。目前有關(guān)川芎和延胡索兩味藥材與疾病的關(guān)系，多從單一通路或靶點(diǎn)研究。對(duì)于二者搭配后出現(xiàn)的多通路、多靶點(diǎn)對(duì)疾病影響的研究較少。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)（Network Pharmacology）是近年來(lái)較為熱門(mén)的一種研究方法，它使用網(wǎng)絡(luò)分析計(jì)算后，將“疾病-基因-靶點(diǎn)-藥物”相互作用關(guān)系，以直觀(guān)圖形呈現(xiàn)，更好的揭示多成分藥物協(xié)同作用的特點(diǎn)[1]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的前瞻性、整體性特點(diǎn)還在指導(dǎo)新藥研發(fā)[2]，復(fù)方方劑的配伍規(guī)律探尋方面發(fā)揮了作用[3]。本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，結(jié)合基因功能注釋和京都基因與基因組百科全書(shū)（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG），預(yù)測(cè)“川芎-延胡索”藥對(duì)的活性成分、作用靶點(diǎn)、相關(guān)通路，以期更好的闡明“川芎-延胡索”配伍作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 中藥系統(tǒng)藥理學(xué)技術(shù)平臺(tái)TCMSP（http：//lsp.nwsuaf.edu.cn/tcmsp.php）;UniProt蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.uniprot.org）;David 6.8生物信息學(xué)分析數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//david.ncifcrf.gov）;Cytoscape軟件（版本：3.6.0）;GraphPad Prism 7.0統(tǒng)計(jì)軟件。

1.2 “川芎-延胡索”藥對(duì)活性成分的篩選 通過(guò)TCMSP平臺(tái)和文獻(xiàn)檢索2種方法收集川芎、延胡索兩味藥物中所含的化學(xué)成分。然后根據(jù)各個(gè)成分的吸收、分布、代謝與排泄（ADME）性質(zhì)選出川芎、延胡索可能的活性成分，再查閱文獻(xiàn)補(bǔ)充被淘汰或遺漏的有效成分，以增加預(yù)測(cè)結(jié)果的可信度。

1.3 “活性成分-靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與分析 ?再次通過(guò)TCMSP平臺(tái)檢索“1.2”中篩選出的活性成分的潛在靶點(diǎn)，使用Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)，將潛在靶點(diǎn)蛋白名稱(chēng)校正為物種為人的官方名稱(chēng)（Officical Symbol）。利用Cytoscape3.6.0統(tǒng)計(jì)軟件構(gòu)建“活性成分-靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng)絡(luò)模型并使用Network Analyzer插件對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析，查明網(wǎng)絡(luò)中化合物和靶點(diǎn)的權(quán)重。

1.4 “川芎-延胡索”藥對(duì)蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與分析 String數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//string-db.org，Version 10.5）[4]是一個(gè)收集了大量蛋白相互作用關(guān)系的數(shù)據(jù)庫(kù)，其中包含了經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證和通過(guò)生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)得到的數(shù)據(jù)，共涉及9 643 763個(gè)蛋白，1 380 838 440個(gè)相互作用。將“川芎-延胡索”藥對(duì)活性成分作用的蛋白靶點(diǎn)導(dǎo)入String數(shù)據(jù)庫(kù)，限定物種為人，獲取蛋白相互作用關(guān)系，結(jié)果保存成TSV格式，導(dǎo)入Cytoscape3.6.0統(tǒng)計(jì)軟件繪制相互作用網(wǎng)路。首先對(duì)此蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行總體分析，然后使用Cytoscape3.6.0統(tǒng)計(jì)軟件中的cytohubba插件確定最重要的10個(gè)蛋白互作關(guān)系，計(jì)算方法的選擇最大團(tuán)中心性（Maximal Clique Centrality，MCC）[5]。

1.5 基因功能和信號(hào)通路分析 使用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)，對(duì)“川芎-延胡索”藥對(duì)作用靶點(diǎn)進(jìn)行GO和KEGG Pathways分析，GO分析中選擇生物學(xué)過(guò)程（Biological Process，BP）、分子功能（Molecular Function，MF）、細(xì)胞組分（Cellular Component，CC）3個(gè)內(nèi)容。保存結(jié)果后，閾值設(shè)置為Pvalue<0.05，PDF<0.05進(jìn)行篩選，并按照涉及的靶點(diǎn)數(shù)目多少進(jìn)行排序，GO分析結(jié)果用GraphPad Prism 7.0統(tǒng)計(jì)軟件繪制條形圖，KEGG Pathway，用R語(yǔ)言繪制氣泡圖。

2 結(jié)果

2.1 “川芎-延胡索”藥對(duì)中活性成分的篩選 在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中，以“川芎”“延胡索”為關(guān)鍵詞分別進(jìn)行查詢(xún)，結(jié)果顯示（截止到2018年10月），與川芎有關(guān)的化學(xué)成分有189個(gè)，與延胡索有關(guān)的化學(xué)成分有77個(gè)。本研究根據(jù)化學(xué)成分的ADME性質(zhì)，以口服生物利用度（Oral Bioavailability，OB）≥30%和類(lèi)藥性（druglikeness，DL）≥0.18為條件對(duì)有關(guān)化合物進(jìn)行篩選[6]，結(jié)果川芎得到7個(gè)，延胡索得到49個(gè)。為了確保結(jié)果的全面性及可靠性，再次通過(guò)文獻(xiàn)查找川芎及延胡索有效化合物。文獻(xiàn)記載川芎的化學(xué)成分包含苯酞及其二聚體、生物堿、有機(jī)酸、多糖以及腦苷脂和神經(jīng)酰胺等類(lèi)成分[7-8]，其中藁本內(nèi)酯（ligustilide）被認(rèn)為是苯酞類(lèi)化合物中主要的活性化合物，具有鎮(zhèn)痛、抗炎等作用;阿魏酸（Ferulic Acid）是有機(jī)酚酸類(lèi)代表化合物，在阿爾茨海默病、細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激等方面研究較多;川芎嗪（tetramethylpyrazine）屬于生物堿，其研究主要集中在缺血再灌注損傷、細(xì)胞凋亡等領(lǐng)域[9];因此，川芎有效化合物共計(jì)10個(gè)。查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)延胡索化學(xué)成分包含生物堿、淀粉、樹(shù)脂、揮發(fā)油、多糖等，經(jīng)TCMSP篩選后包括了經(jīng)過(guò)驗(yàn)證有效成分，因此川芎-延胡索藥對(duì)篩選后共得到58個(gè)（含有一個(gè)共同成分）活性成分。見(jiàn)表1。

2.2 “活性成分-靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng)絡(luò)分析 使用TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)查找“表1”中活性成分的潛在靶點(diǎn)。通過(guò)Cytoscape 3.6.0統(tǒng)計(jì)軟件繪制“川芎-延胡索”藥對(duì)的“活性成分-靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng)絡(luò)圖。見(jiàn)圖1。圖中三角形代表活性成分，圓形代表作用靶點(diǎn)。藍(lán)色代表川芎活性成分及靶點(diǎn)，紅色代表延胡索活性成分及靶點(diǎn)，紫色代表二者共同活性成分及作用靶點(diǎn)，且具有互作關(guān)系的節(jié)點(diǎn)間用直線(xiàn)連接。一個(gè)節(jié)點(diǎn)的度值（degree）代表與該節(jié)點(diǎn)相連接的邊的條數(shù)，度值的大小即代表著與對(duì)應(yīng)節(jié)點(diǎn)的連接程度，亦即在網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵度，圖中節(jié)點(diǎn)的大小與度值相對(duì)應(yīng)。此網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中包含了277個(gè)節(jié)點(diǎn)和1 161條邊，277個(gè)節(jié)點(diǎn)中包括57個(gè)化學(xué)成分和220個(gè)作用靶點(diǎn)?；瘜W(xué)成分中延胡索49個(gè)，川芎9個(gè)（senkyunone在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中無(wú)靶點(diǎn)蛋白因此未在圖中顯示），及1個(gè)共有成分（sitosterol）。作用靶點(diǎn)中，延胡索有167個(gè)單獨(dú)潛在作用靶點(diǎn)，川芎有8個(gè)單獨(dú)潛在作用靶點(diǎn)，“川芎-延胡索”藥對(duì)共有成分潛在作用靶點(diǎn)3個(gè)，非共有成分共同潛在作用靶點(diǎn)42個(gè)”。川芎-延胡索”藥對(duì)每個(gè)活性成分平均作用于20.37（1 161/57）個(gè)靶點(diǎn)，每個(gè)靶點(diǎn)平均接受5.3（1 161/220）個(gè)藥物作用，反映了藥物和靶點(diǎn)多重互作的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)關(guān)系。從圖1可以看出，MOL000098槲皮素（quercetin）擁有最多的潛在靶點(diǎn)151個(gè)，其次是MOL000790異紫堇杷明（Isocorypalmine）和MOL000217（S）-斯氏紫堇堿[（S）-Scoulerine]都有36個(gè)潛在靶點(diǎn)。這些靶點(diǎn)高的化合物可能在“川芎-延胡索”藥對(duì)的藥理功能中發(fā)揮著相對(duì)重要的作用。另外，在220個(gè)潛在靶標(biāo)中，有73個(gè)靶點(diǎn)與2個(gè)及以上化合物分子相連接，說(shuō)明同一個(gè)靶點(diǎn)也能同時(shí)接受多個(gè)化合物對(duì)其調(diào)控，同樣呈現(xiàn)出中藥多成分、多靶點(diǎn)、整合調(diào)節(jié)的作用特點(diǎn)。在所有靶點(diǎn)中，PTGS2（前列腺素過(guò)氧化物合酶2）、PTGS1（前列腺素過(guò)氧化物合酶1）、SCN5A（5型鈉通道α亞基）擁有最多的配體，分別為48、44、44個(gè)。

2.3 “川芎-延胡索”藥對(duì)蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與分析 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)結(jié)果詳見(jiàn)圖2，圖中節(jié)點(diǎn)表示蛋白，邊表示蛋白之間的關(guān)聯(lián)，藍(lán)色代表川芎相關(guān)靶點(diǎn)，紅色代表延胡索相關(guān)靶點(diǎn)，紫色代表二者共同作用靶點(diǎn)，且圖中節(jié)點(diǎn)的大小與其連接度成正比。圖中共涉及212個(gè)節(jié)點(diǎn)，3 762條邊（其中F10a、GYRB、IGHG1、PRXC1A、TOP2、、CDKN2未在數(shù)據(jù)庫(kù)中找到，DIO1、DCAF與其他蛋白沒(méi)有相互作用，這8個(gè)蛋白不在相互作用網(wǎng)絡(luò)中體現(xiàn)）。使用cytohubba插件中MCC方法計(jì)算后，確定最重要的10個(gè)蛋白互作關(guān)系，結(jié)果如圖3所示。

2.4 靶點(diǎn)的GO富集分析及信號(hào)通路分析 使用DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)，對(duì)相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行GO和KEGG pathway富集分析，閾值設(shè)置為Pvalue<0.05，F(xiàn)DR<0.05。通過(guò)GO分析發(fā)現(xiàn)，“川芎-延胡索”作用的靶點(diǎn)基因主要富集在412個(gè)BP、28種MF和20類(lèi)CC中。圖4～6分別列出了顯著性較高的前10種。圖4顯示，藥對(duì)的靶點(diǎn)主要富集在調(diào)控細(xì)胞增殖、有機(jī)物應(yīng)答、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)、調(diào)調(diào)控細(xì)胞凋亡、控細(xì)胞死亡、正向調(diào)控分子功能、正向調(diào)控催化活性、內(nèi)源性刺激應(yīng)答、傷害應(yīng)答、激素刺激應(yīng)答等;在分子功能方面見(jiàn)圖5，主要富集在相同的蛋白結(jié)合、脂質(zhì)結(jié)合、蛋白二聚活性、酶結(jié)合、序列特異性DNA結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、胺結(jié)合、胺受體活性、藥物結(jié)合、配體依賴(lài)性核受體活性等方面;在細(xì)胞組分中細(xì)胞膜、細(xì)胞外區(qū)域、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)所占比例最大。見(jiàn)圖6。

此外，KEEG分析共得到24條信號(hào)通路。見(jiàn)圖7。圖7中圓點(diǎn)的顏色與大小由相關(guān)聯(lián)的基因數(shù)量和P值決定。通過(guò)圖7分析可知“川芎-延胡索”藥對(duì)主要涉及癌癥信號(hào)通路、信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)通路、免疫相關(guān)信號(hào)通路、細(xì)胞通訊相關(guān)通路及細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡相關(guān)通路。

3 討論

中藥具有多成分、多靶點(diǎn)、調(diào)節(jié)方式多樣性的特點(diǎn)，以往單一成分或靶標(biāo)的研究方法難以反映中藥的系統(tǒng)性[10]，并且按照中醫(yī)理論開(kāi)具的中藥處方可能不是簡(jiǎn)單的各自藥效的疊加，還會(huì)產(chǎn)生復(fù)雜的協(xié)同或衰減作用[11]，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)從相互連接的角度研究問(wèn)題，并整合中藥、蛋白、基因、疾病等多種數(shù)據(jù)庫(kù)，采用生物信息學(xué)手段分析問(wèn)題，探索藥物作用機(jī)制，其整體性、系統(tǒng)性的特點(diǎn)與中藥的特點(diǎn)不謀而合。川芎和延胡索是經(jīng)典的臨床搭配使用藥物組合，尤其在婦科和骨科搭配使用，二者協(xié)同可起到活血行氣、散瘀止痛的功效，尤其在月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、跌打損傷、脊柱退行性相關(guān)疾病中使用廣泛，如七制香附丸、杜仲壯骨丸、跌打損傷丸等成藥或方劑中都含有這2種藥物的搭配組合。本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)相關(guān)理念和技術(shù)，從“川芎-延胡索”藥對(duì)中篩選出58個(gè)活性成分，預(yù)測(cè)相應(yīng)靶點(diǎn)220個(gè)。通過(guò)分析以這些活性成分和靶點(diǎn)構(gòu)建的網(wǎng)絡(luò)模型，發(fā)現(xiàn)連接度前3名的化合物為槲皮素（quercetin）、異紫堇杷明（Isocorypalmine）、（S）-金黃紫堇堿[（S）-Scoulerine]。其中槲皮素作為屬于一種天然的黃酮類(lèi)化合物，在我們?nèi)粘Ｊ澄镏衼?lái)源非常豐富，大量研究表明具有廣泛的藥理學(xué)作用，如抗氧化、抗病毒、抗炎作用，在基礎(chǔ)研究中可療血管、呼吸、泌尿、代謝、骨骼及神經(jīng)系統(tǒng)疾病等[12]。異紫堇杷明（Isocorypalmine）為一種較新發(fā)現(xiàn)的生物堿[13]，它與多巴胺D1受體有很高的親和力[K（i）=83 nM][14]，能作為D1部分激動(dòng)劑和D2拮抗劑產(chǎn)生體內(nèi)效應(yīng)，可能是治療可卡因成癮的一種有前途的藥物[15-16]。（S）-金黃紫堇堿屬于異喹啉類(lèi)生物堿，有研究表明，它對(duì)NMDA受體拮抗劑地卓西平馬來(lái)酸鹽（MK-801）誘發(fā)的精神分裂癥的陽(yáng)性癥狀、陰性癥狀以及認(rèn)知障礙均有改善作用，而且在抗精神分裂癥的有效劑量下并不引起木僵等錐體外系不良反應(yīng)，提示金黃紫堇堿具有成為新型抗精神病藥的潛力，值得進(jìn)一步深入研究[17]。網(wǎng)絡(luò)中連接度排名前三的靶點(diǎn)為PTGS2、PTGS1和SCN5A。PTGS中文名為前列腺素過(guò)氧化物合酶，又稱(chēng)環(huán)氧化酶，是前列腺素生物合成的關(guān)鍵酶，PTGS有2種同工酶：一種是組成型PTGS1，另一種是誘導(dǎo)型PTGS2，其中靶點(diǎn)PTGS2被報(bào)道參與炎性反應(yīng)、細(xì)胞凋亡[18]、癌癥[19]等多種病理過(guò)程。PGTS1蛋白可促進(jìn)腫瘤進(jìn)展過(guò)程中的細(xì)胞增殖，它的選擇性剪接可導(dǎo)致多種轉(zhuǎn)錄變異[20]。SCN5A是一個(gè)完整的膜蛋白和抗四環(huán)素電壓門(mén)控鈉通道亞基。這種蛋白主要存在于心肌中，負(fù)責(zé)心電圖中動(dòng)作電位的初始上升。該基因缺陷是長(zhǎng)QT綜合征3型（LQT3）的病因之一，該基因還與心力衰竭有密切的關(guān)系[21]。上述活性成分和靶點(diǎn)可能在“川芎-延胡索”藥對(duì)中發(fā)揮比較關(guān)鍵的作用。

蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)結(jié)果顯示“川芎-延胡索”藥對(duì)的靶點(diǎn)間存在著復(fù)雜的交互關(guān)系，而不是獨(dú)立的發(fā)揮作用，網(wǎng)絡(luò)中共有212個(gè)節(jié)點(diǎn)，3 762條邊，經(jīng)過(guò)計(jì)算后發(fā)現(xiàn)VEGFA、TP53、TNF、PTGS2、MMP9、MAPK1、JUN、IL6、CASP3、AKT1等可能是“川芎-延胡索”藥對(duì)發(fā)揮作用的主要靶蛋白靶點(diǎn)。

通過(guò)GO富集分析可知，“川芎-延胡索”藥對(duì)的靶基因主要富集在調(diào)控細(xì)胞增殖、有機(jī)物應(yīng)答、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)、調(diào)調(diào)控細(xì)胞凋亡、控細(xì)胞死亡、正向調(diào)控分子功能、正向調(diào)控催化活性、內(nèi)源性刺激應(yīng)答、傷害應(yīng)答、激素刺激應(yīng)答等，這與文獻(xiàn)報(bào)道較為吻合說(shuō)明預(yù)測(cè)靶點(diǎn)的準(zhǔn)確性，為進(jìn)一步深入闡釋“川芎-延胡索”藥理作用機(jī)制提供依據(jù)。此外，“川芎-延胡索”藥對(duì)富集較多的靶點(diǎn)還有調(diào)控傳遞神經(jīng)沖動(dòng)、突觸傳導(dǎo)、神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)等，這些相似的生物學(xué)過(guò)程可能是“川芎-延胡索”藥對(duì)治療痛經(jīng)及脊柱相關(guān)疾病的有關(guān)因素，值得進(jìn)一步的研究。

KEGG通路分析篩選后共得到了24條信號(hào)通路，其中涉及癌癥相關(guān)信號(hào)通路的共12條，分別是癌癥相關(guān)通路、前列腺癌、胰腺癌、小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、非小細(xì)胞肺癌、慢性粒細(xì)胞白血病、結(jié)直腸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、子宮內(nèi)膜癌、黑色素瘤、急性骨髓性白血病。郭秀偉等報(bào)道川芎聯(lián)合順鉑組可以通過(guò)抑制HIF-1α的表達(dá)從而抑制肺癌干細(xì)胞樣細(xì)胞荷瘤裸鼠腫瘤組織的增殖和復(fù)發(fā)[22]。汝濤等發(fā)現(xiàn)川芎可以通過(guò)阻滯胰腺癌HS766T細(xì)胞G0/G1期，抑制細(xì)胞增殖并通過(guò)增加合成期細(xì)胞百分比促進(jìn)細(xì)胞凋亡的產(chǎn)生，在體外產(chǎn)生抑制胰腺癌HS 766T細(xì)胞的增殖的作用[23]。Xu D等[24]發(fā)現(xiàn)川芎嗪通過(guò)上調(diào)miR-211從而進(jìn)一步調(diào)控PI3K/AKT和mTOR信號(hào)通路的激活，抑制成髓細(xì)胞瘤生長(zhǎng)、遷移和侵襲。Gao JL等[25]研究發(fā)現(xiàn)延胡索和莪術(shù)組方可明顯降低腫瘤活性。因此推斷從中醫(yī)活血化瘀方向研究腫瘤的治療具有一定的前景。涉及信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)的通路有5條，分別是神經(jīng)活性配體-受體相互作用通路、鈣離子信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、ErbB信號(hào)通路、VEGF信號(hào)通路，這些信號(hào)通路參與細(xì)胞的增殖、分化、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、遷移等多種生物功能，還與神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)、血管的生成有關(guān)。涉及免疫相關(guān)信號(hào)通路有3條分別是TOLL樣受體信號(hào)通路、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、NOD樣受體信號(hào)通路，參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能。涉及細(xì)胞通訊相關(guān)通路有2條分別是黏著斑通路、間隙連接通路。涉及細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡相關(guān)通路有2條分別是凋亡相關(guān)通路、p53信號(hào)通路。

綜上所述，本研究以臨床常用藥對(duì)“川芎-延胡索”藥對(duì)為研究對(duì)象，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)相關(guān)理念和方法分析“川芎-延胡索”藥對(duì)所含的有效成分、作用靶點(diǎn)、生物學(xué)過(guò)程及相關(guān)通路，并構(gòu)建了化合物靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)及通路氣泡圖以解釋二者的協(xié)同作用機(jī)制。研究表明此藥對(duì)涉及多種信號(hào)通路和生物過(guò)程，體現(xiàn)了“多成分-多靶點(diǎn)-多途徑”的作用特點(diǎn)，上述研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致，為進(jìn)一步深入研究“川芎-延胡索”藥理作用奠定基礎(chǔ)。

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（2019-05-07收稿 責(zé)任編輯：王明）