煙草品種不同生育期抗旱性評(píng)價(jià)方法探討

李顯航 夏志林 喻奇?zhèn)?王軍 汪志威 吳迪 戴麗紅 李源 田茂竹 劉仁祥

摘 要：為了探究煙草品種不同生育期適宜的抗旱性評(píng)價(jià)方法，以7個(gè)煙草品種為供試材料，采用盆栽試驗(yàn)，分別在苗期4葉1心、還苗期、伸根期和旺長(zhǎng)中期等4個(gè)時(shí)期設(shè)置干旱脅迫處理，進(jìn)行煙草品種不同時(shí)期抗旱評(píng)價(jià)方法篩選及抗旱評(píng)價(jià)關(guān)鍵時(shí)期研究。結(jié)果表明，抗旱性度量值（drought resistance comprehensive evaluation values，D）和加權(quán)抗旱系數(shù)（weight drought resistance coefficient，WDC）均適用于評(píng)價(jià)煙草品種不同時(shí)期抗旱性強(qiáng)弱。煙草不同生育期，煙葉葉綠素a、b、類胡蘿卜素和丙二醛（MDA）含量可作為其還苗期抗旱評(píng)價(jià)指標(biāo)，計(jì)算煙葉D值可鑒定還苗期煙草品種抗旱性強(qiáng)弱。煙草伸根期為抗旱評(píng)價(jià)關(guān)鍵時(shí)期，以葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量為伸根期抗旱評(píng)價(jià)指標(biāo)，計(jì)算煙葉其D值或WDC值鑒定伸根期煙草品種抗旱性，并可預(yù)測(cè)旺長(zhǎng)中期煙草品種抗旱性強(qiáng)弱。

關(guān)鍵詞：煙草;品種;干旱脅迫;不同時(shí)期;評(píng)價(jià)方法

中圖分類號(hào)：S572

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1008-0457（2019）01-0035-08 國(guó)際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2019.01.007

煙草全生育期對(duì)水分要求高[1]，田間持水量低于50%以上，會(huì)使煙草產(chǎn)量和品質(zhì)降低[2]。貴州省煙草種植面積居全國(guó)第二[3]，煙區(qū)干旱發(fā)生頻率高[4-6]，土壤持水能力弱[7]，灌溉成本高[8]，難以從本質(zhì)上解決抗旱問題，干旱已成為貴州煙草生產(chǎn)主要限制因素之一，所以提高煙草本身的抗旱能力尤為重要。干旱脅迫發(fā)生時(shí)，植物體內(nèi)膜質(zhì)過氧化作用加強(qiáng)[9]，葉綠素、類胡蘿卜素合成受阻[10]，超氧陰離子自由基形成增多，導(dǎo)致細(xì)胞損傷[11]。傳統(tǒng)上煙草抗旱性評(píng)價(jià)常采用隸屬函數(shù)法，以供試煙草材料在干旱脅迫下，煙株煙葉所選指標(biāo)隸屬函數(shù)值的綜合平均值大小為依據(jù)，評(píng)價(jià)其抗旱性強(qiáng)弱[12]，但該方法不能較好消除因遺傳背景不同和個(gè)別指標(biāo)片面性引起的差異。近年來，作物抗旱性評(píng)價(jià)采用抗旱性度量值（drought resistance comprehensive evaluation values，D）和加權(quán)抗旱系數(shù)（weight drought resistance coefficient，WDC）等綜合評(píng)價(jià)方法，比單一評(píng)價(jià)方法更真實(shí)反映作物抗旱性強(qiáng)弱[13-14]。此外，前人對(duì)煙草抗旱性研究主要集中在苗期[15]、伸根期[16]、團(tuán)棵期[17]、旺長(zhǎng)期[18]、現(xiàn)蕾期和成熟期[19]等特定生育期，根據(jù)煙葉測(cè)定指標(biāo)綜合平均隸屬函數(shù)值評(píng)價(jià)、篩選煙草的抗旱性強(qiáng)弱和抗旱指標(biāo)，而針對(duì)不同時(shí)期采用多種方法評(píng)價(jià)煙草抗旱性強(qiáng)弱、探討適宜評(píng)價(jià)方法方面鮮見報(bào)道。本研究選用貴州煙草生產(chǎn)常用的K326等7個(gè)煙草品種為材料[20]，采用盆栽試驗(yàn)，在煙草苗期4葉1心、還苗期、伸根期和旺長(zhǎng)中期分別對(duì)煙株進(jìn)行干旱脅迫處理，測(cè)定煙葉葉綠素a、b、類胡蘿卜素和丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性的變化，比較不同時(shí)期供試煙草品種的抗旱性變化，篩選合適的抗旱指標(biāo)，探討各時(shí)期適宜的抗旱性評(píng)價(jià)方法，以期為煙草抗旱品種選擇和抗旱機(jī)制等研究提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料選用NC82、K326、TN90、韭菜坪2號(hào)、畢納1號(hào)、南江三號(hào)和紅花大金元等7個(gè)煙草品種，試驗(yàn)種子由貴州大學(xué)煙草科學(xué)研究中心提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用盆栽試驗(yàn)，完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在貴州大學(xué)煙草科研基地育苗大棚進(jìn)行。每盆（盆高45 cm、底徑25 cm、口徑35 cm）裝自然風(fēng)干、過0.5 cm篩、無前作的0～20 cm黃壤土15 kg，每盆施煙草專用復(fù)合肥N∶P2O5∶K2O=10∶11∶25共60 g。分別設(shè)置苗期（4葉1心）、還苗期（移栽后10 d）、伸根期（移栽后30 d）和旺長(zhǎng)中期（移栽后50 d）4個(gè)干旱脅迫處理時(shí)期，3次重復(fù)。各時(shí)期干旱處理及對(duì)照每重復(fù)10株，采用稱重法控制土壤含水量[16]。苗期連續(xù)干旱9 d再?gòu)?fù)水7 d;還苗期和伸根期干旱處理的土壤相對(duì)含水量為田間最大持水量的30%～35%，連續(xù)干旱21 d;旺長(zhǎng)中期干旱處理的土壤相對(duì)含水量為田間最大持水量的35%～40%，連續(xù)干旱21 d。煙苗于6葉1心時(shí)移栽，其余后期栽培管理同田間管理進(jìn)行。

1.3 項(xiàng)目測(cè)定及方法

1.3.1 取樣方法 苗期于煙株持續(xù)干旱處理開始后第3天、第6天和第9天的上午7：00～8：00之間每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取3株中部葉片混合，其余時(shí)期于持續(xù)干旱處理第7天、第14天和第21天的上午7：00～8：00之間取煙株中部葉片，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取3株，混合取樣裝入已做好標(biāo)記的50 ml規(guī)格離心管，然后放入液氮罐中，之后及時(shí)保存于-80℃超低溫冰箱中用于測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。

1.3.2 測(cè)定方法 葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量（mg/g）采用95%酒精浸提法。SOD活性（U/mg）測(cè)定和MDA含量（μmol/mg）測(cè)定參照張憲政[21]和李合生[22]的方法并略做改進(jìn)。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析

采用Microsoft Excel 2016整理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，SPSS 23進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

隸屬函數(shù)法參照汪志威等[16]方法，D值和WDC值參照尹利等[23]、孟慶立等[24]、祁旭升等[13]、謝小玉等[25]和羅俊杰等[14]的方法按以下步驟計(jì)算：

DC值表示各測(cè)量指標(biāo)的單項(xiàng)抗旱系數(shù)（drought resistance coefficient），式中xi和CKi分別為干旱脅迫和正常處理的指標(biāo)測(cè)定值。針對(duì)各指標(biāo)DC值，進(jìn)行因子分析，進(jìn)一步確定和評(píng)價(jià)各時(shí)期抗旱相關(guān)的重要指標(biāo)，將原來各單項(xiàng)性狀指標(biāo)轉(zhuǎn)換為n個(gè)新的相互獨(dú)立的隱性綜合指標(biāo)（用Fn表示），高度概括大量數(shù)據(jù)中的信息。之后按公式（2）、（3）和（4）分別計(jì)算因子權(quán)重系數(shù)（ωi）、各基因型各綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值μ（xi）和抗旱性度量值（D值）。

式中Pi為第i個(gè)綜合指標(biāo)的貢獻(xiàn)率，表示第i個(gè)指標(biāo)在所有指標(biāo)中的重要程度，xi、ximax和ximin分別表示第i個(gè)綜合指標(biāo)及第i個(gè)綜合指標(biāo)的最大值和最小值。以各指標(biāo)DC值為比較序列，D值為參考序列進(jìn)行灰色關(guān)聯(lián)度分析，獲得各指標(biāo)DC值與D值間的關(guān)聯(lián)度，按公式（5）和（6）分別計(jì)算各指標(biāo)權(quán)重系數(shù)（ωi（γ））和加權(quán)抗旱系數(shù)（WDC值），式中γi為各指標(biāo)關(guān)聯(lián)度。

最后，采用系統(tǒng)聚類，組間連接，平方歐氏距離方法，根據(jù)不同時(shí)期D值、WDC值和隸屬函數(shù)值依次進(jìn)行聚類，劃分供試煙草品種抗旱強(qiáng)度，評(píng)價(jià)適宜抗旱時(shí)期。

2 結(jié)果與分析

2.1 干旱脅迫對(duì)供試煙草品種測(cè)定指標(biāo)含量的影響

由表1可知，苗期除NC82和韭菜坪2號(hào)干旱脅迫下葉綠素a含量與對(duì)照差異顯著，其余品種差異不顯著，各品種干旱脅迫下葉綠素b含量和類胡蘿卜素含量與對(duì)照差異均顯著，MDA含量除K326差異顯著，其余品種差異不顯著，SOD活性除TN90差異不顯著，其余品種差異顯著。還苗期MDA含量除K326和畢納1號(hào)差異不顯著，SOD活性除TN90、韭菜坪2號(hào)和紅花大金元差異不顯著，其余品種的剩余測(cè)定指標(biāo)與對(duì)照差異均顯著。伸根期K326的SOD活性差異不顯著，其余品種測(cè)定指標(biāo)與對(duì)照差異均顯著。旺長(zhǎng)中期MDA含量在NC82、南江三號(hào)和紅花大金元差異顯著，其余品種差異均不顯著，SOD活性在TN90、畢納1號(hào)和南江三號(hào)差異不顯著，其余品種差異均顯著。說明所選指標(biāo)與干旱脅迫有關(guān)系。

2.2 ?干旱脅迫下煙草品種抗旱性評(píng)價(jià)方法篩選

由表2可知，根據(jù)D值抗旱性排序結(jié)果，苗期和還苗期抗旱性強(qiáng)的煙草品種均為TN90和紅花大金元，抗旱性弱分別為NC82和畢納1號(hào)、NC82和K326;伸根期和旺長(zhǎng)中期抗旱性強(qiáng)煙草品種為紅花大金元和NC82，抗旱性弱為TN90。根據(jù)WDC值進(jìn)行抗旱性排序，苗期和還苗期抗旱性強(qiáng)煙草品種分別為TN90和韭菜坪2號(hào)、TN90和紅花大金元，抗旱性弱均是NC82和畢納1號(hào);伸根期和旺長(zhǎng)中期抗旱性強(qiáng)煙草品種為紅花大金元和NC82，抗旱性弱分別為TN90和K326、畢納1號(hào)和TN90。結(jié)果表明，各時(shí)期D值和WDC值評(píng)價(jià)煙草品種的抗旱性結(jié)果基本一致，并與隸屬函數(shù)值評(píng)價(jià)結(jié)果類似。苗期和還苗期抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果相似，伸根期和旺長(zhǎng)中期抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果相似，但苗期和還苗期抗旱性與伸根期和旺長(zhǎng)中期抗旱性較不一致。說明采用D值和WDC值適用于評(píng)價(jià)煙草抗旱性強(qiáng)弱，鑒定苗期的抗旱性，可同時(shí)預(yù)測(cè)還苗期煙草品種的抗旱性強(qiáng)弱，鑒定伸根期的抗旱性，可同時(shí)預(yù)測(cè)旺長(zhǎng)中期供試煙草品種的抗旱性強(qiáng)弱。

2.3 干旱脅迫下煙草品種適宜抗旱鑒定時(shí)期選擇

根據(jù)不同時(shí)期D值、WDC值和隸屬函數(shù)值依次進(jìn)行聚類劃分煙草品種抗旱強(qiáng)度，苗期D值、WDC值和隸屬函數(shù)值聚類λ分別在5、5和10處時(shí)，將供試煙草種質(zhì)抗旱強(qiáng)度分別劃分為4、3、3種類型。其中D值聚類高抗為TN90，敏感為畢納1號(hào)，低抗為NC82，其余為中度抗旱型品種;WDC值聚類結(jié)果中抗旱為K326和畢納1號(hào)，敏感為NC82，其余為高抗型品種;隸屬函數(shù)值聚類結(jié)果高抗為TN90和南江三號(hào)，敏感為K326，其余為中抗品種。還苗期D值、WDC值和隸屬函數(shù)值聚類λ分別在6、6和2處時(shí)，將供試煙草種質(zhì)抗旱強(qiáng)度分別劃分為3、3、4種類型，相同抗旱強(qiáng)度品種相似，并與苗期相似。

伸根期D值、WDC值和隸屬函數(shù)值聚類λ分別在5、8和8處時(shí)，將供試煙草種質(zhì)抗旱強(qiáng)度分別劃分為3、4、3種類型，其中D值聚類結(jié)果高抗為紅花大金元，敏感為K326和TN90，其余為中抗品種;WDC值聚類結(jié)果為高抗為紅花大金元，敏感為K326和畢納1號(hào)，低抗為TN90，其余為中抗品種;隸屬函數(shù)值聚類強(qiáng)度劃分結(jié)果與D值和WDC值相似。旺長(zhǎng)中期D值、WDC值和隸屬函數(shù)值聚類λ分別在5、3和5處時(shí)，將供試煙草種質(zhì)抗旱強(qiáng)度分別劃分為2、3、3種類型，相同抗旱強(qiáng)度品種相似，抗旱強(qiáng)度結(jié)果與伸根期相似。

苗期和還苗期的D值、WDC值和隸屬函數(shù)值抗旱強(qiáng)度劃分結(jié)果均相似，伸根期和旺長(zhǎng)中期的D值、WDC值和隸屬函數(shù)值抗旱強(qiáng)度劃分結(jié)果均相似，但相同煙草品種抗旱強(qiáng)度劃分略有差異，苗期和還苗期與伸根期和旺長(zhǎng)中期相同抗旱強(qiáng)度煙草品種較不一致。同時(shí)，根據(jù)同一品種、同一時(shí)期抗旱強(qiáng)度不變，結(jié)合干旱脅迫下煙草品種抗旱性評(píng)價(jià)方法篩選結(jié)果（表2），苗期和還苗期抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果相似，伸根期和旺長(zhǎng)中期抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果相似，但苗期、還苗期抗旱性與伸根期、旺長(zhǎng)中期抗旱性較不一致。此外，伸根期和旺長(zhǎng)期是煙株產(chǎn)質(zhì)形成的關(guān)鍵時(shí)期，表明應(yīng)選擇伸根期作為抗旱鑒定的最佳時(shí)期。

2.4 抗旱性鑒定指標(biāo)篩選

由表3可知，還苗期MDA含量與D值呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，還苗期和伸根期D值均與葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量極顯著正相關(guān)，旺長(zhǎng)中期D值和類胡蘿卜素含量顯著負(fù)相關(guān)，與SOD活性顯著正相關(guān)。伸根期WDC值與葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量均極顯著正相關(guān)，旺長(zhǎng)中期與MDA含量顯著負(fù)相關(guān)。伸根期和旺長(zhǎng)中期D值和WDC值均與葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量極顯著正相關(guān)，說明伸根期可選擇葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量，計(jì)算D值或WDC值來評(píng)價(jià)煙草抗旱性。根據(jù)伸根期和旺長(zhǎng)中期抗旱性評(píng)價(jià)結(jié)果相似，鑒定伸根期抗旱性強(qiáng)弱，同時(shí)可預(yù)測(cè)旺長(zhǎng)中期煙草品種抗旱性強(qiáng)弱。

3 結(jié)論與討論

作物抗旱機(jī)制復(fù)雜，需選擇合適的評(píng)價(jià)方法[26]。D值和WDC值是一個(gè)無量綱純數(shù)，能很好相互消除作物各指標(biāo)單位不同帶來的差異，降低個(gè)別指標(biāo)的片面性，結(jié)果更能真實(shí)反映作物品種自身抗旱性強(qiáng)弱特點(diǎn)[27]，近年已在玉米[28]、油菜[29]和小麥[30]等作物抗旱評(píng)價(jià)中得到大量應(yīng)用。研究表明，作物抗旱性評(píng)價(jià)采用多指標(biāo)與多方法相結(jié)合的綜合評(píng)價(jià)方法比較可靠，單一評(píng)價(jià)方法很難全面準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)作物抗旱性強(qiáng)弱[31]。黎冬華等[32]通過計(jì)算D值，評(píng)價(jià)劃分了10份芝麻的抗旱強(qiáng)度，并結(jié)合SSR、SRAP和AFLP分子標(biāo)記，獲得與耐旱相關(guān)性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記，證明了D值評(píng)價(jià)作物抗旱性強(qiáng)弱的可靠性。本研究發(fā)現(xiàn)，D值和WDC值是存在本質(zhì)區(qū)別的無量綱純數(shù)，說明可排除因D值、WDC值無本質(zhì)區(qū)別，用以評(píng)價(jià)供試煙草品種抗旱性引起的片面性差異。前人關(guān)于煙草品種抗旱性研究多采用單一的隸屬函數(shù)值方法評(píng)價(jià)煙草抗旱性強(qiáng)弱，劃分煙草抗旱強(qiáng)度等級(jí)。干旱脅迫條件下，吳迪等[33]利用隸屬函數(shù)評(píng)價(jià)法，將煙草苗期17份材料劃分為5個(gè)抗旱類型，盛業(yè)龍等[34]計(jì)算各測(cè)定指標(biāo)的綜合隸屬函數(shù)值大小，對(duì)煙草苗期20份供試材料進(jìn)行抗旱強(qiáng)弱排序，汪志威等[16]在煙草伸根期時(shí)，根據(jù)所測(cè)指標(biāo)平均隸屬函數(shù)值評(píng)價(jià)了煙草13份材料抗旱性強(qiáng)弱，并劃分為3類抗旱強(qiáng)度。本研究采用D值和WDC值評(píng)價(jià)、劃分的煙草品種苗期和伸根期抗旱強(qiáng)度結(jié)果分別與吳迪等[33]和汪志威等[16]研究結(jié)果相似，但相同抗旱強(qiáng)度煙草品種略有變化，這可能除了年際間因素影響外，與D值和WDC值評(píng)價(jià)更準(zhǔn)確反映煙草自身抗旱強(qiáng)弱密切相關(guān)。本研究表明，各時(shí)期供試煙草品種D值和WDC值抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果、抗旱強(qiáng)度劃分與隸屬函數(shù)法評(píng)價(jià)結(jié)果趨勢(shì)一樣。而各指標(biāo)間關(guān)聯(lián)度不一樣，供試材料間權(quán)重系數(shù)不一致，但同一品種D值與WDC值抗旱性強(qiáng)弱順序相似，說明采用D值和WDC值評(píng)價(jià)煙草品種抗旱性可靠。

然而，煙草生長(zhǎng)時(shí)期較多，單一時(shí)期抗旱性不能全面反應(yīng)各時(shí)期煙草品種抗旱性強(qiáng)弱變化特點(diǎn)。同時(shí)，前人關(guān)于煙草品種抗旱強(qiáng)弱研究主要集中在單一時(shí)期，關(guān)于苗期、還苗期、伸根期和旺長(zhǎng)中期等連續(xù)時(shí)期，研究抗旱適宜鑒定時(shí)期未見報(bào)道。干旱脅迫下，馬文廣等[35]和趙洪春等[36]均以測(cè)定所選指標(biāo)的平均隸屬函數(shù)值大小為依據(jù)，分別評(píng)價(jià)6份和20份煙草品種在苗期的抗旱性強(qiáng)弱，王俊等[17]根據(jù)測(cè)定指標(biāo)含量值，采用聚類分析法劃分了6個(gè)烤煙材料伸根期抗旱性強(qiáng)弱。本研究供試煙草品種在苗期和還苗期的D值和WDC值抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果相似，伸根期和旺長(zhǎng)中期的D值和WDC值抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果相似，且均與隸屬函數(shù)法評(píng)價(jià)結(jié)果趨勢(shì)相似，研究結(jié)果與汪燦等[37-38]同樣采用D值和WDC值分別關(guān)于薏苡苗期和成株期兩時(shí)期抗旱性鑒定結(jié)果相似。表明苗期和還苗期的抗旱性強(qiáng)弱較一致，伸根期和旺長(zhǎng)中期的抗旱性強(qiáng)弱較一致。說明采用D值和WDC值能較好的反映煙草品種各時(shí)期抗旱性強(qiáng)弱。此外，研究發(fā)現(xiàn)，伸根期和旺長(zhǎng)中期，煙草抗旱性強(qiáng)度與苗期和還苗期抗旱性強(qiáng)度較不一致，本結(jié)果與林杰[23]采用隸屬函數(shù)法評(píng)價(jià)煙草品種旺長(zhǎng)期、現(xiàn)蕾期和開花期三個(gè)時(shí)期抗旱強(qiáng)弱變化表現(xiàn)趨勢(shì)相似。而貴州省干旱發(fā)生時(shí)間多為伸根期和旺長(zhǎng)期[4-6]，且伸根期、旺長(zhǎng)期是決定煙株產(chǎn)、質(zhì)的關(guān)鍵時(shí)期。根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，伸根期和旺長(zhǎng)中期的抗旱性強(qiáng)弱基本一致，說明在煙草生產(chǎn)中，應(yīng)選擇伸根期作為評(píng)價(jià)、鑒定煙草品種抗旱性強(qiáng)弱的最佳時(shí)期。

目前，前人根據(jù)單一時(shí)期的抗旱性評(píng)價(jià)結(jié)果，只進(jìn)行相應(yīng)時(shí)期煙草品種的抗旱指標(biāo)篩選，而是否適用于其他時(shí)期未有報(bào)道。葉綠素參與植物光合作用，光合作用為植物提供所需的物質(zhì)和能量，類胡蘿卜素是細(xì)胞內(nèi)源抗氧化劑，可減輕細(xì)胞膜脂過氧化[39]。本研究表明，苗期和還苗期供試煙草品種抗旱性分別與葉綠素和類胡蘿卜素含量呈正相關(guān)、顯著正相關(guān)關(guān)系。說明葉綠素含量增加，光合作用增強(qiáng)，煙株抗逆性提高;類胡蘿卜素含量增加，消除和減輕由干旱脅迫產(chǎn)生的活性損傷，增強(qiáng)了煙株抗旱性，試驗(yàn)結(jié)果與童文杰等[40]研究表明，在干旱脅迫下，烤煙抗旱能力與葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量顯著正相關(guān)結(jié)果一致。同時(shí)，煙草還苗期抗旱強(qiáng)弱與MDA含量顯著負(fù)相關(guān)，本結(jié)果與Shtereva L等[41]和王仁剛等[42]研究指出，煙株膜質(zhì)過氧化程度越低，煙株抗旱性越強(qiáng)，在煙草還苗期選擇MDA含量可評(píng)價(jià)煙草抗旱性強(qiáng)弱結(jié)論一致。此外，伸根期和旺長(zhǎng)中期抗旱強(qiáng)弱與葉綠素和類胡蘿卜素含量極顯著正相關(guān)、與SOD正相關(guān)、MDA含量負(fù)相關(guān)，表明干旱逆境下，煙株抗氧化酶活性強(qiáng)，可減輕煙株膜質(zhì)過氧化程度，增強(qiáng)煙株抗旱性。試驗(yàn)結(jié)果與汪志威等[20]研究表明，MDA含量和SOD活性等指標(biāo)可作為煙草伸根期的抗旱評(píng)價(jià)指標(biāo)。說明葉綠素和類胡蘿卜素含量增加，SOD活性增強(qiáng)，減輕膜質(zhì)氧化程度，增強(qiáng)煙株抗旱性。

綜上，本研究?jī)H探討煙草生產(chǎn)主要的4個(gè)時(shí)期抗旱性強(qiáng)弱變化及適宜時(shí)期評(píng)價(jià)方法，應(yīng)進(jìn)一步結(jié)合分子標(biāo)記等分子手段驗(yàn)證各時(shí)期抗旱強(qiáng)弱，進(jìn)行抗旱機(jī)制研究。D值和WDC值均適用于評(píng)價(jià)不同時(shí)期煙草品種的抗旱性。苗期和還苗期抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果相似，伸根期和旺長(zhǎng)中期抗旱評(píng)價(jià)結(jié)果相似，根據(jù)伸根期和旺長(zhǎng)期是煙株產(chǎn)質(zhì)形成關(guān)鍵時(shí)期，應(yīng)選擇伸根期作為評(píng)價(jià)煙草品種抗旱性強(qiáng)弱的最佳時(shí)期。選擇葉綠素a、b、類胡蘿卜素和MDA含量，計(jì)算D值評(píng)價(jià)還苗期煙草品種抗旱性強(qiáng)弱;選擇葉綠素a、b和類胡蘿卜素含量，計(jì)算D值或WDC值評(píng)價(jià)伸根期煙草品種抗旱性，并可預(yù)測(cè)旺長(zhǎng)中期煙草品種抗旱性強(qiáng)弱。

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