頂空—固相微萃取—?dú)庀嗌V法測(cè)定黃瓜中9種有機(jī)磷農(nóng)藥

葉慧星 陶昆 曹巧巧 蔡輝 黃曉歡 王琳佳

摘要：該研究建立了頂空固相微萃取-氣相色譜法測(cè)定黃瓜中9種有機(jī)磷農(nóng)藥的分析方法。獲得優(yōu)化的最佳條件為：攪拌速度500r/min，萃取時(shí)間10min，萃取溫度60℃。9種有機(jī)磷農(nóng)藥的平均加標(biāo)回收率達(dá)到89%～112%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均<10%。

關(guān)鍵詞：頂空；固相微萃?。粴庀嗌V；黃瓜；有機(jī)磷農(nóng)藥

有機(jī)磷農(nóng)藥，是指含磷元素的有機(jī)化合物農(nóng)藥。其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的廣泛使用，導(dǎo)致在農(nóng)作物中發(fā)生不同程度的殘留。有機(jī)磷農(nóng)藥與人體發(fā)生大劑量或反復(fù)接觸之后，會(huì)出現(xiàn)一系列中毒癥狀如出汗、語言失常等，嚴(yán)重者會(huì)出現(xiàn)呼吸麻痹，甚至導(dǎo)致死亡[1]。在我國，黃瓜的種植方式分為大棚種植和露地栽培。在栽培過程中，廣大農(nóng)戶選擇性價(jià)比高的有機(jī)磷農(nóng)藥。長期食用有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的黃瓜會(huì)增加患肺癌的幾率，損傷神經(jīng)系統(tǒng)，影響人體的正常生殖功能[2]。而在有機(jī)磷農(nóng)殘檢測(cè)中，主要的前處理方法有液-液萃?。↙LE）[3]、超臨界流體萃?。⊿FE）、固相萃取（SPE）[4]等。固相微萃?。⊿PME）是近年發(fā)展起來的一種無溶劑快速技術(shù)，具有簡便、靈敏和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)[5]。這種技術(shù)正在農(nóng)藥殘留檢測(cè)領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用。

本實(shí)驗(yàn)研究了頂空固相微萃取（HS-SPME）與氣相色譜聯(lián)用，合并萃取、富集和色譜分析過程一步完成，建立了一個(gè)測(cè)定黃瓜中9種有機(jī)磷農(nóng)藥的簡便、靈敏度較高的方法。這9種選擇測(cè)定的有機(jī)磷農(nóng)藥分別為：敵敵畏、甲基對(duì)硫磷、速滅靈、對(duì)硫磷、二嗪磷、樂果、倍硫磷、毒死蜱、殺螟硫磷。此方法顯示有較高的準(zhǔn)確度和精密度，為黃瓜中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留研究提供了一定的參考依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

島津GC2010 PLUS型氣相色譜儀，配火焰光度檢測(cè)器（FPD）帶分流/不分流進(jìn)樣口；Talboys Prefessional磁力加熱攪拌器（17.8cm陶瓷面板）；聚二甲基硅氧烷（PDMS，100μm）萃取頭及手柄（美國Supelco公司）；T10高速勻漿機(jī)（德國IKA公司）。

1.2 主要試劑與實(shí)驗(yàn)用水

質(zhì)量濃度為0.1mg/mL的9種有機(jī)磷農(nóng)藥（敵敵畏、速滅靈、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、樂果、二嗪磷、毒死蜱、倍硫磷、殺螟硫磷）混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液（國家標(biāo)準(zhǔn)總局）；色譜純甲醇，氯化鈉為分析純；實(shí)驗(yàn)用水為一級(jí)水。

1.3 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)用黃瓜購于某地大潤發(fā)超市。稱取去皮黃瓜肉100g，加100ml水置于高速勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿。取樣品液2.0ml加入1.0g氯化鈉，用本法進(jìn)行測(cè)定。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 色譜條件。色譜柱：SE-30石英毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.33μm）；采用程序升溫方式進(jìn)樣分析：初溫150℃，保持2min后以6℃/min升溫至250℃；進(jìn)樣口溫度：260℃；載氣柱流速為2.0ml/min，尾吹氣流量28ml/min；進(jìn)樣不分流2min后分流，分流比為30：1；FPD檢測(cè)器溫度：280℃。

1.4.2 頂空固相微萃取方法。于12ml安瓿瓶中加入10μl有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)液、2.0ml樣品基質(zhì)溶液，然后放入3.8cmPTFE涂層磁力攪拌子，密封安瓿瓶放入70℃水中進(jìn)行水浴。萃取頭經(jīng)260℃進(jìn)樣口活化5min后，向下推置針頭于瓶內(nèi)液面上方頂空處，離樣品液面高度為1.0cm，在磁力攪拌器500r/min條件下萃取10min。萃取完成后，直接插入進(jìn)樣口隨載氣進(jìn)入色譜柱經(jīng)火焰光度檢測(cè)器測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 萃取頭選擇。根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥強(qiáng)極性的性質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)選取膜厚為85μm的PA商用萃取頭。

2.2 萃取條件優(yōu)化

2.2.1 攪拌速率與萃取頭在頂空中的高度。取混合標(biāo)準(zhǔn)品10μl，用10mL水稀釋作為實(shí)驗(yàn)樣品。攪拌速度分別為300、400、500、600、7000r/min，在恒溫60℃下萃取10min后，在GC進(jìn)樣口解吸5min后色譜分析，從色譜數(shù)據(jù)分析，攪拌速度定為500r/min，萃取頭在頂空中高度為1.0cm處可得到理想的萃取效果。

2.2.2 萃取時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)考察了萃取時(shí)間為5、10、15、20min的峰面積變化。出于實(shí)驗(yàn)周期及工作效率的考慮，萃取時(shí)間定為10min。

2.2.3 萃取溫度。通過水中有機(jī)磷農(nóng)藥的萃取來優(yōu)化頂空固相微萃取的溫度。萃取時(shí)間定為10min，分別考察40～70℃萃取溫度對(duì)萃取效率變化的影響。數(shù)據(jù)分析得出溫度60℃時(shí)萃取效果最佳，故選取萃取溫度為60℃。

2.3 方法評(píng)價(jià)

2.3.1 線性回歸分析。分別吸取稀釋倍數(shù)為2～100倍的有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)液10μl于12ml安瓿瓶中，加2.0ml黃瓜果肉基質(zhì)溶液，按優(yōu)化條件進(jìn)行頂空固相微萃取后，供氣相色譜測(cè)定。

2.3.2 準(zhǔn)確度和精密度試驗(yàn)。取空白樣品按優(yōu)化條件進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，取高、低兩個(gè)加標(biāo)水平，分別加入10μL和20μL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行測(cè)定5次，結(jié)果列于表1。待測(cè)組分平均回收率均在89%～112%之間，5次平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD小于10%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和回收率均滿足痕量分析的要求。

3 結(jié)束語

固相微萃取將傳統(tǒng)的液-液萃取的繁瑣操作優(yōu)化為一步完成萃取、富集和色譜進(jìn)樣，是一種簡便快速、無溶劑消耗的萃取濃縮技術(shù)，其精密度和準(zhǔn)確度均能滿足測(cè)定要求，可用于測(cè)定黃瓜中的有機(jī)磷農(nóng)藥組分。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉小瓊，王曉媛，李慶聰，戴余波，李金濤.有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（01）： 17-19，30.

[2]馬昕.農(nóng)藥殘留檢測(cè)研究進(jìn)展[J].青海農(nóng)林科技，2018（03）：56-59.

[3]丁明，鐘冬蓮，湯富彬，等.固相萃取/液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定竹筍中丁烯氟蟲腈農(nóng)藥殘留研究[J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（3）：372～376.

[4]董春洲，王文芳. 頂空固相微萃取氣相色譜法測(cè)定馬鈴薯中有機(jī)氯農(nóng)藥[J]. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2006，40（5）：364～367.

[5]董春洲，王文芳.頂空固相微萃取氣相色譜法測(cè)定蘿卜中有機(jī)氯農(nóng)藥及類似物[J]. 化學(xué)分析計(jì)量，2007，16（2）：17～19.

基金項(xiàng)目：2017年浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新項(xiàng)目，編號(hào)2017R471010。

作者簡介：葉慧星，女，1998年4月，研究方向?yàn)槭称钒踩c檢測(cè)。

通訊作者：陶昆，女，1978年1月，碩士，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，研究方向?yàn)槭称钒踩c檢測(cè)。