硫辛酸注射液仿制藥與原研藥的制劑質(zhì)量比較及其小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)研究

田園 孔德志 劉紫琪 張賽航 任雷鳴

摘 要 目的：對(duì)硫辛酸注射液的原研藥與國(guó)內(nèi)2個(gè)廠(chǎng)家的仿制藥進(jìn)行制劑質(zhì)量比較及小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)研究，探討一致性評(píng)價(jià)方法的項(xiàng)目。方法：依據(jù)《中國(guó)藥典》的相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，檢測(cè)并比較3個(gè)廠(chǎng)家硫辛酸注射液樣品的理化性質(zhì)（性狀、pH、滲透壓等）、含量、有關(guān)物質(zhì)及小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)（n=10）中的半數(shù)致死量（LD50）及以注射液原液注射給藥后小鼠（n=30）死亡情況。結(jié)果：原研藥與2個(gè)仿制藥在理化性質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查方面均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，3個(gè)樣品含量均為95%～105%;急性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示2個(gè)仿制藥的LD50值（LD50：247.911 mg/kg，95%置信區(qū)間222.209～277.999 mg/kg;LD50：215.291 mg/kg，95%置信區(qū)間196.637～235.053 mg/kg）明顯低于原研藥的LD50值（LD50：266.534 mg/kg，95%置信區(qū)間250.597～283.418 mg/kg），但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。取注射液原液直接單劑量注射時(shí)，3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示2個(gè)仿制藥引起的小鼠的死亡數(shù)（26、28只）與原研藥（19只）比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05），且給藥后原研藥小鼠出現(xiàn)竄動(dòng)和驚叫等興奮性反應(yīng)，而2個(gè)仿制藥呈現(xiàn)抑制性反應(yīng)。結(jié)論：硫辛酸注射液的2個(gè)仿制藥與原研藥在制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面均符合《中國(guó)藥典》的有關(guān)規(guī)定，但是急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異較大，難以證明這2個(gè)仿制藥與原研藥的一致性;在注射液的一致性評(píng)價(jià)項(xiàng)目中建議納入急性毒性實(shí)驗(yàn)。

關(guān)鍵詞 一致性評(píng)價(jià);硫辛酸注射液;含量;有關(guān)物質(zhì);理化性質(zhì);急性毒性實(shí)驗(yàn)

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To compare the quality of original preparations of Thioctic acid injection and generic preparations from 2 domestic manufacturers， discuss the acute toxicity test of mice and to investigate the project of consistency evaluation methods. METHODS： According to the quality standard that stated in Chinese Pharmacopeia， physicochemical properties （characters， pH， osmotic pressure， etc.， contents and related substances of samples of Thioctic acid injection as well as LD50 in acute toxicity test （n=10）， and mortality of mice after administration of injection solution （n=30） were compared among 3 manufacturers. RESULTS： The physicochemical properties as and related substances of the original drug and 2 generic drugs were all in line with the quality standard; the contents of 3 samples ranged 95%-105%. The acute toxicity test results showed that the LD50 values of 2 generic drugs （LD50： 247.911 mg/kg， 95% confidence interval： 222.209-277.999 mg/kg;LD50： 215.291 mg/kg， 95% confidence interval： 196.637-235.053 mg/kg） were smaller than that of original drug （LD50： 266.534 mg/kg， 95% confidence interval： 250.597-283.418 mg/kg）， but there was no statistical difference （P>0.05）. The results of 3 repeated experiments showed that there was statistical significance in the number of animal death caused by the 2 generic drugs （26， 28） was more than that of the original drug （19） （all P<0.05）， when injection solution was injected into mice in a single dose. After administration of the original drug， mice showed excitatory reactions such as movement and squeal， while 2 generic drugs showed inhibitory reactions. CONCLUSIONS： 2 generic drugs of Thioctic acid injection and the original drug all conform to the relevant regulations of Chinese Pharmacopoeia in terms of preparation quality standards， but the results of acute toxicity test are quite different， so it is difficult to prove the consistency between the 2 generic drugs and the original drug. Therefore， acute toxicity test is necessary for the consistency evaluation of injections.

KEYWORDS? ?Consistency evaluation; Thioctic acid injection; Content; Related substances; Physicochemical properties; Acute toxicity test

硫辛酸（1，2-二硫戊環(huán)-3-戊酸）是一種強(qiáng)效天然抗氧化劑，兼具水溶性和脂溶性，廣泛存在于各種原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中，能直接清除多種自由基和活性氧，尚能再生機(jī)體的其他抗氧化物以及螯合金屬離子[1-3]。硫辛酸注射液（德國(guó)史達(dá)德大藥廠(chǎng)）在2005年進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)，用于治療糖尿病周?chē)窠?jīng)病變引發(fā)的感覺(jué)異常[4-5]。隨后，該藥的國(guó)產(chǎn)仿制藥也獲批上市。截至2019年6月，筆者通過(guò)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局網(wǎng)站查詢(xún)到目前共有11家藥廠(chǎng)在生產(chǎn)此藥。由于歷史原因，我國(guó)仿制藥品的質(zhì)量仍有一定的提升空間，因此開(kāi)展仿制藥一致性評(píng)價(jià)很有必要。目前，藥品的一致性評(píng)價(jià)工作已經(jīng)不單單局限在口服固體制劑，注射劑的一致性評(píng)價(jià)工作也已經(jīng)在開(kāi)展。在2018年國(guó)家藥品監(jiān)督管理局頒布的《已上市化學(xué)仿制藥（注射劑）一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求（征求意見(jiàn)稿）》中要求：對(duì)于不具有完整、充分的安全性、有效性數(shù)據(jù)的已上市注射劑，都要開(kāi)展藥品再評(píng)價(jià)。但由于該文件中未列出具體再評(píng)價(jià)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)，因此筆者希望通過(guò)本研究對(duì)硫辛酸注射液國(guó)產(chǎn)仿制藥與原研藥的制劑質(zhì)量及毒性一致性評(píng)價(jià)方法進(jìn)行探索。經(jīng)查詢(xún)，有文獻(xiàn)報(bào)道了國(guó)內(nèi)仿制藥注射用硼替佐米以及注射用丙戊酸鈉與進(jìn)口原研產(chǎn)品的質(zhì)量一致性研究，該研究主要開(kāi)展了理化性質(zhì)、雜質(zhì)檢查、含量等項(xiàng)目的對(duì)比，最終認(rèn)為仿制藥與原研藥的質(zhì)量具有一致性[6-7]。但是原研藥與仿制藥的毒性是否一致也是一項(xiàng)十分重要的指標(biāo)，鑒于注射劑的急性毒性試驗(yàn)對(duì)于制藥企業(yè)是一個(gè)常規(guī)的安全性評(píng)價(jià)手段，筆者擬對(duì)德國(guó)史達(dá)德大藥廠(chǎng)的硫辛酸注射液（原研藥，規(guī)格：12 mL ∶ 300 mg）與國(guó)內(nèi)2018年銷(xiāo)售額排行前兩名（經(jīng)筆者調(diào)查所得）的硫辛酸注射液仿制藥（三者主成分質(zhì)量濃度一致）進(jìn)行理化性質(zhì)、含量測(cè)定、有關(guān)物質(zhì)檢查和小鼠急性毒性試驗(yàn)的對(duì)比研究，通過(guò)結(jié)果比較探討一致性評(píng)價(jià)的檢測(cè)項(xiàng)目。

1 材料

1.1 儀器

安捷倫1260高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫公司）;Cubis微量天平（德國(guó)Sartorius公司）;pH測(cè)定儀（梅特勒-托利多儀器有限公司）;VAPRO 5600滲透壓儀（美國(guó)Wescor公司）。

1.2 藥品與試劑

硫辛酸對(duì)照品（北京恒元啟天化工技術(shù)研究所和北京世紀(jì)奧科生物技術(shù)有限公司聯(lián)合研制，批號(hào)：17072705，供實(shí)驗(yàn)室藥品檢驗(yàn)用，純度：99.52%）;硫辛酸注射液A藥（原研藥，德國(guó)史達(dá)德大藥廠(chǎng)，批號(hào)：72009，規(guī)格：12 mL ∶ 300 mg）;硫辛酸注射液B藥（仿制藥，國(guó)內(nèi)某藥廠(chǎng)，批號(hào)：180601，規(guī)格：6 mL ∶ 150 mg）;硫辛酸注射液C藥（仿制藥，國(guó)內(nèi)某藥廠(chǎng)，批號(hào)：17961140，規(guī)格：6 mL ∶ 150 mg）;磷酸二氫鉀、磷酸均為分析純;甲醇、乙腈均為色譜純;超純水由Thermo Scientific Nanopure超純水機(jī)制備。

1.3 動(dòng)物

SPF級(jí)昆明小鼠18～22 g，♀♂各半，由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（冀）2018-004，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證編號(hào)：1808006。實(shí)驗(yàn)前在溫度23 ℃左右、相對(duì)濕度50%左右、明暗各12 h的實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)1周，期間自由飲食飲水。

2 方法與結(jié)果

2.1 理化性質(zhì)檢查

參照2015年版《中國(guó)藥典》（四部）[8]，對(duì)3種硫辛酸注射液（A藥、B藥和C藥）的性狀、pH、顏色、滲透壓等質(zhì)控項(xiàng)目進(jìn)行對(duì)比考察，結(jié)果顯示原研藥與2個(gè)仿制藥在理化性質(zhì)檢查方面均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，詳見(jiàn)表1。

2.2 含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Waters symmtry C18（100 mm×3.0 mm，3.5 μm），流動(dòng)相：0.1%磷酸水-乙腈? ? ? ?（70 ∶ 30，V/V）[9]，流速：1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm，柱溫：35 ℃;進(jìn)樣量：5 μL。

2.2.2 溶液制備 對(duì)照品溶液：精密稱(chēng)取硫辛酸對(duì)照品10.0 mg，置于5 mL棕色量瓶中，用50%乙腈水溶解稀釋至刻度，避光4 ℃保存。供試品溶液：精密量取3個(gè)批號(hào)的硫辛酸注射液各100.0 μL，分別置于5 mL棕色量瓶中，用50%乙腈水稀釋至刻度，避光4 ℃保存。

2.2.3 方法學(xué)考察 （1）專(zhuān)屬性。由于仿制藥B藥和C藥處方中均含有苯甲醇，故分別取苯甲醇溶液、硫辛酸對(duì)照品溶液及A藥、B藥和C藥制備成的供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)樣分析，結(jié)果顯示各檢測(cè)成分分離良好，苯甲醇對(duì)主藥色譜峰的分析未見(jiàn)干擾，色譜見(jiàn)圖1。

（2）精密度。取上述對(duì)照品溶液，在“2.2.1”項(xiàng)下條件重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得硫辛酸峰面積的RSD為0.34%（n=6）;連續(xù)3 d測(cè)定，硫辛酸峰面積的RSD為3.92%（n=3），表明儀器日內(nèi)、日間精密度均良好。

（3）重復(fù)性。按“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液制備方法制備供試品溶液（批號(hào)：72009）6份，按“2.2.1”項(xiàng)下條件分別進(jìn)樣分析，測(cè)得硫辛酸峰面積的RSD為0.16%（n=6），表明試驗(yàn)重復(fù)性良好[10]。

（4）標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)與線(xiàn)性范圍。分別精密吸取硫辛酸對(duì)照品適量，制備成質(zhì)量濃度為0.123 3、0.197 2、0.246 5、0.394 4、0.493 0、0.788 8、0.986 0 mg/mL的溶液進(jìn)樣分析，對(duì)質(zhì)量濃度（x）與峰面積（y）進(jìn)行回歸計(jì)算，得線(xiàn)性方程結(jié)果為y=3 530.2x-61.25（R2=0.999 8）。表明硫辛酸檢測(cè)質(zhì)量濃度線(xiàn)性范圍為0.123 3～0.986 0 mg/mL。

（5）穩(wěn)定性。硫辛酸為見(jiàn)光易分解藥物，取供試品（批號(hào)：72009）溶液在室溫避光條件下放置0、1、2、4、8、12、24、48 h后，按“2.2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)樣分析，測(cè)得硫辛酸峰面積的RSD為1.39%（n=6），表明供試品溶液在室溫避光條件下放置48 h內(nèi)穩(wěn)定。

（6）方法耐用性。取供試品（批號(hào)：72009）溶液，考察方法在不同品牌色譜柱、柱溫、流動(dòng)相、檢測(cè)波長(zhǎng)下的耐用性。結(jié)果表明，各因素在試驗(yàn)范圍內(nèi)變動(dòng)時(shí)，供試品中硫辛酸含量的RSD均<2%（n=3），表明本試驗(yàn)色譜條件對(duì)不同品牌色譜柱、柱溫、流動(dòng)相和檢測(cè)波長(zhǎng)的耐用性較好，結(jié)果見(jiàn)表2。

（7）加樣回收率。取已知含量的硫辛酸注射液（批號(hào)：72009）共9份，并按硫辛酸注射液質(zhì)量濃度的80%、100%、120% 精密取適量硫辛酸對(duì)照品各3份，混合后分別進(jìn)樣，記錄峰面積，測(cè)定回收率，結(jié)果表明方法準(zhǔn)確度較好，詳見(jiàn)表3。

2.2.4 含量測(cè)定 取3個(gè)廠(chǎng)家的樣品，制備成供試品溶液后進(jìn)樣，計(jì)算注射液中硫辛酸的含量，取平均值。結(jié)果，A藥和B、C藥的含量均在95%～99%，符合要求（95%～105%），結(jié)果見(jiàn)表4。

2.3 注射液中有關(guān)物質(zhì)檢查

根據(jù)《歐洲藥典》硫辛酸有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)條件[11]，對(duì)3個(gè)廠(chǎng)家的樣品進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，每個(gè)雜質(zhì)峰的峰面積要小于硫辛酸峰面積的0.1%[12]。條件如下：色譜柱為DIKMA Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為乙腈-0.7 g/L磷酸二氫鉀（用磷酸調(diào)pH為3）-甲醇? ? （8 ∶ 41 ∶ 51，V/V/V），流速為1.2 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為215 nm，柱溫為35 ℃，進(jìn)樣量為20 μL，記錄色譜圖至25 min?？傠s質(zhì)峰面積不得超過(guò)對(duì)照溶液主峰峰面積的2倍（1.0%）[13]。用不加校正因子的主成分自身對(duì)照法，測(cè)得A、B、C各樣品中總雜質(zhì)含量分別為0.016 9%、0.006%和0.005%，B、C藥總雜質(zhì)含量均低于原研藥，2個(gè)仿制藥與原研藥在有關(guān)物質(zhì)檢查方面均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2.4 小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)

2.4.1 實(shí)驗(yàn)方法 采用Bliss法，進(jìn)行小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)[14-16]。首先對(duì)A藥進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，得出最大劑量和最小劑量范圍。將小鼠隨機(jī)分為250.0、225.0、202.5、182.3 mg/kg 4個(gè)劑量組，組間距r=0.9，給藥體積為0.10? ? ?mL/10 g，每組10只，尾靜脈注射給藥。182.3 mg/kg 和202.5 mg/kg 這2個(gè)劑量組未見(jiàn)小鼠死亡，因此，最小劑量基本可以確定在202.5 mg/kg（引起小鼠零死亡的較高劑量）。之后，將劑量調(diào)整為202.5、225.0、250.0、276.0、309.0 mg/kg繼續(xù)給藥，309.0 mg/kg劑量仍不能致小鼠完全死亡，故仍需要升高劑量;最終，正式實(shí)驗(yàn)設(shè)定A藥的劑量組為203.6、231.4、263.0、298.9、339.7 mg/kg，組間距r=0.88，給藥體積為0.14 mL/10 g。同理，B藥和C藥按照上述方法進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，B藥采用187.0、212.5、250.0、277.8、308.7 mg/kg 5個(gè)劑量組進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn);C藥采用164.6、187.0、212.5、250.0、277.8 mg/kg 5個(gè)劑量進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn);對(duì)照組靜脈注射同體積的生理鹽水。正式實(shí)驗(yàn)時(shí)，每日取小鼠30只，隨機(jī)分為3組，各組分別靜脈注射最低劑量的A藥、B藥或C藥，每日上午9：00給藥;次日同法給予第二個(gè)劑量的A藥、B藥或C藥，直至完成所有劑量的給藥。每組實(shí)驗(yàn)后需記錄14 d內(nèi)小鼠的活動(dòng)、體質(zhì)量及死亡數(shù)。觀察期結(jié)束后，將存活小鼠處死，解剖主要臟器觀察是否發(fā)生變化[17]。

2.4.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用t檢驗(yàn)分別比較仿制藥與原研藥的半數(shù)致死量（LD50）之間差異是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。單劑量一次性給藥的小鼠急性毒性試驗(yàn)結(jié)果，以死亡只數(shù)表示，采用χ2檢驗(yàn)分別比較仿制藥與原研藥組間的差異。小鼠體質(zhì)量（g）變化數(shù)據(jù)采用實(shí)測(cè)值計(jì)算x±s，多組間體質(zhì)量均數(shù)的比較采用單因素方差分析。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.4.3 小鼠的LD50 采用SPSS 22.0軟件的Probit回歸法對(duì)急性毒性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行LD50及95%置信區(qū)間的計(jì)算[18]，結(jié)果見(jiàn)表5。

由表5可見(jiàn)，仿制藥與原研藥的小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（LD50）存在差別：266.534 mg/kg（A藥）>247.911 mg/kg（B藥）>215.291 mg/kg（C藥）;但是，3組間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析時(shí)，差異未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.4.4 小鼠的急性毒性表現(xiàn) A藥：231.4 mg/kg和203.6 mg/kg劑量組給藥后小鼠無(wú)任何異常表現(xiàn);另外3個(gè)劑量組中約70%的小鼠給藥后立即出現(xiàn)四肢僵直，在籠內(nèi)竄動(dòng)、驚叫，持續(xù)約3 min，呈現(xiàn)興奮性反應(yīng)。B藥：各劑量組給藥后有30%～80%小鼠表現(xiàn)為側(cè)臥、四肢抽搐、呼吸急促以及翻正反射消失，約2 min后恢復(fù)正常。C藥：各劑量組給藥后有30%～70%小鼠表現(xiàn)為俯臥癱軟、全身輕微顫抖，約5 min后恢復(fù)正常;B、C藥均呈現(xiàn)抑制性反應(yīng)。

2.4.5 小鼠的體質(zhì)量變化 實(shí)驗(yàn)前（0 d）A藥、B藥和C藥組小鼠的體質(zhì)量，在組間和組內(nèi)（每組的各劑量組間）比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。14 d后小鼠的體質(zhì)量，僅A藥298.9 mg/kg劑量組與對(duì)照組比較，體質(zhì)量顯著降低（P=0.033）;其余各劑量組以及B藥和C藥各劑量組小鼠體質(zhì)量與對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。各組小鼠體質(zhì)量比較見(jiàn)圖2。

2.5 3個(gè)樣品原液給藥后小鼠死亡情況比較

盡管上述B藥和C藥的LD50值明顯低于A藥，但是統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示3個(gè)樣品的LD50值差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。為了合理比較A、B、C 3個(gè)樣品靜脈注射的毒性大小，筆者進(jìn)一步做了A、B、C 3個(gè)樣品原液?jiǎn)未戊o脈注射給藥后小鼠死亡情況的比較實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分3批進(jìn)行，每批取小鼠30只，♀♂各半，將小鼠隨機(jī)分為3組，每組10只，各組分別尾靜脈注射A藥、B藥或C藥原液。綜合A、B、C? 3藥的LD50值（依次為266.534、247.911、215.291 mg/kg），選取中間毒性的B藥的LD50值作為給藥劑量更容易比較3個(gè)樣品藥物的毒性大小，因此選取250 mg/kg（質(zhì)量濃度：25 mg/mL，給藥體積：0.1 mL/10 g）這一劑量。每日上午9：00給藥，每日1批，連續(xù)3 d，比較14 d內(nèi)小鼠的最終死亡情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法見(jiàn)“2.4.2”項(xiàng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6。

如表6所示，B、C 2個(gè)仿制藥之間死亡只數(shù)無(wú)差異（26、28只），但B、C 2個(gè)仿制藥分別與A藥（19只）比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;由此可以看出A藥（原研藥）的毒性小，B、C藥的毒性較大。

3 討論

參考2015年版《中國(guó)藥典》及仿制藥一致性評(píng)價(jià)技術(shù)有關(guān)研究報(bào)道[7，19-20]，筆者對(duì)3個(gè)不同廠(chǎng)家硫辛酸注射液的理化性質(zhì)和含量等進(jìn)行了檢測(cè)與比較，結(jié)果表明理化性質(zhì)和含量測(cè)定結(jié)果均無(wú)明顯差異，表明原研藥與仿制藥在制劑質(zhì)量方面基本一致。然而在小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)中，筆者發(fā)現(xiàn)盡管B藥和C藥的LD50值在數(shù)值上明顯低于原研藥，但是三者差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。鑒于LD50易受多種因素影響，筆者又設(shè)計(jì)了采用藥品原液直接單劑量一次性給藥的平行對(duì)比實(shí)驗(yàn)。3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，仿制藥B藥和C藥的毒性大于原研藥，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見(jiàn)表6）。此外，在小鼠給藥后的中毒表現(xiàn)方面，原研藥小鼠出現(xiàn)竄動(dòng)和驚叫等興奮性反應(yīng)，而2種仿制藥呈現(xiàn)抑制性反應(yīng);提示仿制藥誘發(fā)小鼠急性毒性反應(yīng)的機(jī)制可能與原研藥不同。雖然在有關(guān)物質(zhì)檢查方面，B藥和C藥2個(gè)仿制藥的未知雜質(zhì)含量均低于原研藥，卻無(wú)法排除未知雜質(zhì)對(duì)急性毒性實(shí)驗(yàn)的影響，可能有必要對(duì)未知雜質(zhì)進(jìn)行定性、定量研究和毒理學(xué)研究。B藥和C藥2個(gè)仿制藥均比原研藥多添加了苯甲醇這一輔料，苯甲醇也可能是這2個(gè)仿制藥毒性較大的因素。急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，這2個(gè)仿制藥與原研藥存在較明顯的差異。

盡管在本研究中，2個(gè)硫辛酸注射液仿制藥在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面均符合《中國(guó)藥典》的有關(guān)規(guī)定，但是小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻有明顯差異;因此難以證明這2個(gè)硫辛酸注射液仿制藥與原研藥在安全性方面的一致性。我國(guó)化學(xué)仿制藥（注射劑）一致性評(píng)價(jià)工作剛剛起步，因此，若僅僅依據(jù)注射液的理化性質(zhì)、含量和有關(guān)物質(zhì)檢查來(lái)評(píng)判一致性，似乎存在一定的問(wèn)題。筆者認(rèn)為，對(duì)于化學(xué)仿制藥（注射劑）一致性評(píng)價(jià)工作，注射液的急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有重要的參考價(jià)值，建議增加對(duì)此項(xiàng)的評(píng)價(jià)。

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（收稿日期：2019-04-28 修回日期：2019-06-14）

（編輯：劉 萍）