白藜蘆醇/羥丙基-β-環(huán)糊精/殼聚糖緩釋微球的體外釋放度及其在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)的考察

于琛琛 張純剛 尹麗 周旖璇 程嵐 康廷國(guó)

摘 要 目的：考察白藜蘆醇/羥丙基-β-環(huán)糊精/殼聚糖緩釋微球（RES/HP-β-CD/Chitosan）的體外釋放度及其在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)。方法：采用槳法考察RES原料藥、RES/HP-β-CD包合物（RES/HP-β-CD）和RES/HP-β-CD/Chitosan在水中12 h內(nèi)的體外釋放度。比較灌胃給予大鼠RES原料藥、RES/HP-β-CD和RES/HP-β-CD/Chitosan后720 min內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征。結(jié)果：與RES原料藥比較，RES/HP-β-CD的體外釋放度明顯增加，120 min的累積釋放度為87%;與RES/HP-β-CD比較，RES/HP-β-CD/Chitosan的體外釋放明顯減緩，釋放時(shí)間明顯延長(zhǎng)，12 h的累積釋放度為72%。RES原料藥、RES/HP-β-CD、RES/HP-β-CD/Chitosan在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)cmax分別為473.3、2 492.2、590.5 ng/mL，t1/2分別為2.6、0.5、4.6 h，AUC0-12 h分別為514.7、824.6、2 778.5 ng·h/mL。與RES原料藥比較，RES/HP-β-CD和RES/HP-β-CD/Chitosan的相對(duì)生物利用度分別為172.5%和540.0%。結(jié)論：RES/HP-β-CD/Chitosan具有良好的緩釋作用，且生物利用度明顯高于RES原料藥和RES/HP-β-CD。

關(guān)鍵詞 白藜蘆醇;羥丙基-β-環(huán)糊精;殼聚糖;釋放度;藥動(dòng)學(xué);大鼠

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To investigate in vitro release rate and in vivo pharmacokinetics of Resveratrol/hydroxypropyl-β- cyclodextrin/chitosan sustained-release pellets （RES/HP-β-CD/Chitosan） in rats. METHODS： In vitro release rate of RES raw materials， RES-HP-β-CD complexes （RES/HP-β-CD） and RES/HP-β-CD/Chitosan in water within 12 h were investigated by paddle method. The pharmacokinetic characteristics of RES raw materials， RES/HP-β-CD and RES/HP-β-CD/Chitosan were compared within 720 min after intragastric administration. RESULTS： Compared with RES raw materials， in vitro release rate of RES/HP-β-CD was increased significantly， and 120 min accumulative release rate reached 87%. Compared with RES/HP-β-CD， in vitro release rate of RES/HP-β-CD/Chitosan were relieved significantly; release time prolonged significantly; 12 h accumulative release rate was 72%. The pharmacokinetic parameters of RES raw materials， RES/HP-β-CD and RES/HP-β-CD/Chitosan included that cmax were 473.3， 2 492.2， 590.5 ng/mL; t1/2 were 2.6， 0.5， 4.6 h; AUC0-12 h were 514.7， 824.6， 2 778.5 ng·h/mL. Compared with RES raw materials， relative bioavailability of RES/HP-β-CD and RES/HP-β-CD/Chitosan were 172.5% and 540.0%. CONCLUSIONS： RES/HP-β-CD/Chitosan shows good sustained-release effect， and its bioavailability is significantly higher than that of RES raw materials， RES/HP-β-CD.

KEYWORDS? ?Resveratrol; Hydroxypropyl-β-cyclodextrin; Chitosan; Release rate; Pharmacokinetics; Rats

白藜蘆醇（Resveratrol，RES），化學(xué)名為3，5，4’-三羥基芪，是非黃酮類(lèi)多酚化合物[1-2]，其主要存在于花生、葡萄、虎杖等植物中[3-8]。研究表明，RES具有廣泛的藥理作用，主要包括免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗炎、抗病毒、保護(hù)心血管等作用[9-14]。RES屬于生物藥劑學(xué)分類(lèi)系統(tǒng)（BCS）Ⅱ藥物，其易溶于乙醇、甲醇、二甲基亞砜等有機(jī)溶劑，然而在水中的溶解度極低，僅為30 μg/mL [15-16]，且具有光不穩(wěn)定性。由于RES的水溶性差、性質(zhì)不穩(wěn)定、生物利用度低，限制了其在臨床上的應(yīng)用。

羥丙基-β-環(huán)糊精（HP-β-CD）是β-CD葡萄糖殘基上的羥基發(fā)生醚化反應(yīng)引入羥丙基所產(chǎn)生的產(chǎn)物，其水溶性較大[17]。殼聚糖（Chitosan）是一種生物黏附材料，通過(guò)黏附作用及親水凝膠特性，可以延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的滯留時(shí)間和釋放時(shí)間，增加藥物的吸收。藥物與HP-β-CD制備成包合物后，能夠顯著提高藥物的溶解度和溶出度。本課題組采用溶劑法制備出了RES/HP-β-CD包合物（RES/HP-β-CD），并在此基礎(chǔ)上加入Chitosan制備成RES/HP-β-CD/Chitosan緩釋微球（RES/HP-β-CD/Chitosan）。以期通過(guò)HP-β-CD解決RES的釋放問(wèn)題，同時(shí)結(jié)合殼聚糖的生物黏附特性和緩慢釋放特性，實(shí)現(xiàn)延長(zhǎng)RES在體內(nèi)的釋放時(shí)間，提高其生物利用度。本文主要就RES/HP-β-CD/Chitosan的體外釋放度及其在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)進(jìn)行考察。由于RES具有光不穩(wěn)定性，故本研究中所有操作過(guò)程全部避光。

1 材料

1.1 儀器

FA1004 精密電子天平（天津天馬衡基儀器有限公司）;LC-2010A 高效液相色譜儀（日本島津公司）;Vortex-5 渦旋混合器（海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司）;TGL-16g 高速離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）;UV1600紫外分光光度計(jì)（上海美普達(dá)儀器有限公司）;Bioq-8000噴霧干燥儀[匯和堂生物工程設(shè)備（上海）有限公司]。

1.2 藥品與試劑

RES原料藥（武漢遠(yuǎn)成共創(chuàng)科技有限公司，批號(hào)：20171225，純度：98%）;RES對(duì)照品（南京森貝伽生物科技有限公司，批號(hào)：111535-201502，純度：98%）;卡馬西平對(duì)照品（內(nèi)標(biāo)，上海哈靈生物科技有限公司，批號(hào)：100142-201605，純度：98%）;RES/HP-β-CD/Chitosan（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院自制，批號(hào)：20180321，RES含量：12%）;HP-β-CD（山東濱州智源生物科技有限公司，批號(hào)：20171201）;Chitosan（濰坊海之源生物制品有限公司，批號(hào)：160815A）;乙腈（瑞典歐森巴克化學(xué)公司，色譜級(jí)）;醋酸（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）。

1.3 動(dòng)物

健康SD大鼠18只，♂，體質(zhì)量（250±20） g，由遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（遼）2015-0001。

2 方法與結(jié)果

2.1 制劑中RES的含量測(cè)定

2.1.1 紫外吸收波長(zhǎng)的選擇 取干燥至恒質(zhì)量的RES對(duì)照品適量，置于量瓶中，加1%醋酸10 mL，超聲（功率：180 W，頻率：59 kHz，時(shí)間：2 min，下同）溶解，并用無(wú)水乙醇稀釋成質(zhì)量濃度為5 μg/mL的溶液，同法配制相應(yīng)濃度的輔料溶液，采用紫外分光光度法，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描。結(jié)果顯示，RES在307 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，輔料對(duì)其測(cè)定無(wú)干擾，故選擇307 nm波長(zhǎng)作為RES的含量測(cè)定波長(zhǎng)，紫外光譜圖見(jiàn)圖1。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱(chēng)取干燥至恒質(zhì)量的RES對(duì)照品30 mg，置于100 mL量瓶中，加1%醋酸10 mL，超聲溶解，并用無(wú)水乙醇定容至刻度，制成RES貯備液。分別精密移取RES貯備液0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 mL，置于100 mL量瓶中，無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，制成質(zhì)量濃度為1.8、2.4、3.0、3.6、4.2、4.8、5.4、6.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。采用紫外分光光度法，在307 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)（y），質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x）進(jìn)行回歸分析，得回歸方程為y=0.130 1x-0.009 2（R2=0.999 7），結(jié)果表明，RES質(zhì)量濃度在1.8～6.0 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。

2.1.3 精密度試驗(yàn) 取RES/HP-β-CD/Chitosan，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量，置于100 mL量瓶中，加1%醋酸10 mL，超聲，使RES溶解，放冷，加無(wú)水乙醇定容至刻度，搖勻，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1 mL，置于100 mL量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，制成RES質(zhì)量濃度分別為2.8、4.2、5.4 μg/mL（低、中、高質(zhì)量濃度）的供試品溶液。在307 nm波長(zhǎng)處測(cè)定供試品溶液中RES吸光度，每個(gè)濃度重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算日內(nèi)精密度;連續(xù)測(cè)定3 d，計(jì)算日間精密度。結(jié)果顯示，低、中、高質(zhì)量濃度供試品溶液的日內(nèi)RSD分別為0.30%、0.32%、0.25%（n=3）;日間RSD分別為0.48%、0.21%、0.27%（n=3），均符合方法學(xué)要求。

2.1.4 回收率試驗(yàn) 分別稱(chēng)取24、30、36 mg的RES對(duì)照品以及RES/HP-β-CD/Chitosan相應(yīng)處方量的輔料于100 mL量瓶中，加1%醋酸10 mL，超聲，使RES溶解，放冷，加無(wú)水乙醇定容至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1 mL，置于100 mL量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，每個(gè)濃度制備3份，在307 nm波長(zhǎng)處測(cè)定RES吸光度，計(jì)算含量。以RES的測(cè)得值與加入值進(jìn)行比較，計(jì)算回收率。結(jié)果顯示，平均回收率分別為100.00%、100.24%、99.70%（n=3），符合方法學(xué)要求。

2.1.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液，在室溫下放置0、1、2、4、8、12 h后，在307 nm波長(zhǎng)處測(cè)定RES吸光度。結(jié)果顯示，吸光度的RSD<1%（n=6），表明供試品溶液在室溫條件下放置12 h的穩(wěn)定性良好。

2.2 體外釋放度的測(cè)定

參照2015年版《中國(guó)藥典》（四部）第二法（槳法）測(cè)定體外釋放度[18]。將相當(dāng)于RES 300 mg的RES原料藥、RES/HP-β-CD、RES/HP-β-CD/Chitosan分別置于（37±0.5） ℃、體積為900 mL的水中，轉(zhuǎn)速為100 r/min，分別在預(yù)定的時(shí)間點(diǎn)（RES原料藥和RES/HP-β-CD為0、5、10、15、30、60、90、120 min，RES/HP-β-CD/Chitosan為0、1、2、3、4、6、8、12 h）取樣5 mL（同時(shí)補(bǔ)充5 mL 水），經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，用水適當(dāng)稀釋后，在307 nm波長(zhǎng)處測(cè)定RES吸光度，計(jì)算累積釋放度（Q），繪制體外釋放曲線。RES原料藥、RES/HP-β-CD和RES/HP-β-CD- Chitosan的體外釋放曲線見(jiàn)圖2。

由圖2顯示，與RES原料藥比較，RES/HP-β-CD的體外釋放度明顯增加，5 min時(shí)釋放度達(dá)到最大，且在120 min內(nèi)保持穩(wěn)定，120 min的累積釋放度為87%;與RES/HP-β-CD比較，RES/HP-β-CD/Chitosan的體外釋放明顯減緩，釋放時(shí)間明顯延長(zhǎng)，12 h的累積釋放度為72%。

2.3 生物樣品中RES的含量測(cè)定

2.3.1 RES系列對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取RES對(duì)照品適量，用甲醇溶解定容，制備成質(zhì)量濃度為1.0? ? mg/mL的RES貯備液。精密量取RES貯備液適量，用甲醇制成質(zhì)量濃度分別為0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、25 μg/mL的系列對(duì)照品溶液，于4 ℃冰箱保存，備用。

2.3.2 RES系列質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密量取RES貯備液適量，用甲醇將其稀釋成低、中、高質(zhì)量濃度（0.2、1.0、20 μg/mL，下同）的RES質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)溶液，于4 ℃冰箱保存，備用。

2.3.3 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 精密稱(chēng)取卡馬西平對(duì)照品適量，用甲醇溶解定容，制成質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL的內(nèi)標(biāo)貯備液。精密量取內(nèi)標(biāo)貯備液適量，用甲醇稀釋成質(zhì)量濃度為25 μg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液。

2.3.4 色譜條件 色譜柱：Agilent Extend C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）;預(yù)柱：Phenomenex C18（4.0 mm×2.0 mm，5 μm）;流動(dòng)相：乙腈-水（30 ∶ 70，V/V）;流速：1.0 mL/min;進(jìn)樣量：30 μL;檢測(cè)波長(zhǎng)：307 nm;柱溫：30 ℃。

2.3.5 血漿樣品的處理 取100 μL血漿，置于1.5 mL EP管中，依次加入甲醇10 μL、內(nèi)標(biāo)溶液10 μL、0.5%醋酸50 μL，渦旋1 min，再加入乙腈200 μL沉淀蛋白，? ? ?12 000 r/min離心10 min，取上清液30 μL進(jìn)樣分析。

2.3.6 專(zhuān)屬性考察 取大鼠空白血漿100 μL，按“2.3.5”項(xiàng)下方法操作，將其中加入10 μL內(nèi)標(biāo)溶液改為加入10 μL甲醇，然后進(jìn)樣測(cè)定;將加入RES對(duì)照品溶液的空白血漿，按“2.3.5”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)樣測(cè)定;取“2.4”項(xiàng)下給藥后5 min大鼠血漿樣品，按“2.3.5”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果顯示，在該色譜條件下，RES與內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間分別為4.911、10.291 min，兩者分離度良好，且血漿內(nèi)源性物質(zhì)不干擾RES的測(cè)定，色譜圖見(jiàn)圖3。

2.3.7 標(biāo)準(zhǔn)曲線與定量下限考察 取大鼠空白血漿8份，按“2.3.5”項(xiàng)下方法操作，將其中加入10 μL甲醇改為加入10 μL RES系列對(duì)照品溶液，制成質(zhì)量濃度分別為10、20、50、100、200、500、1 000、2 500 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品，進(jìn)樣測(cè)定。以RES質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x），RES與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值為縱坐標(biāo)（y），采用加權(quán)最小二乘法進(jìn)行回歸，得回歸方程為y=0.004 6x+0.092（r=0.999 2），RES質(zhì)量濃度在10～2 500 ng/mL范圍內(nèi)與峰面積的線性關(guān)系良好，定量下限為10 ng/mL。

2.3.8 精密度和準(zhǔn)確度試驗(yàn) 取低、中、高質(zhì)量濃度的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.3.5”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，每個(gè)濃度測(cè)定6次，連續(xù)測(cè)定3 d，考察日內(nèi)、日間精密度與準(zhǔn)確度。結(jié)果顯示，日內(nèi)精密度分別為2.88%、2.15%、1.68%（n=6）;日間RSD分別為2.72%、2.04%、1.98%（n=3），準(zhǔn)確度分別為（100.00±2.88）%、（100.80±2.17）%、（98.60±1.65）%（n=6），均符合要求。

2.3.9 提取回收率 取低、中、高質(zhì)量濃度的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.3.5”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)樣測(cè)定，每個(gè)濃度測(cè)定6次，記錄峰面積為A1;另取大鼠空白血漿100 μL，加入甲醇10 μL，乙腈200 μL，渦旋5 min，經(jīng)12 000 r/min離心10 min，取上清液，再加入相應(yīng)質(zhì)量濃度的RES對(duì)照品溶液和內(nèi)標(biāo)溶液，進(jìn)樣分析，每個(gè)濃度測(cè)定3次，記錄峰面積為A2。以A1與A2的比值計(jì)算提取回收率。結(jié)果顯示，低、中、高質(zhì)量濃度的提取回收率分別為（98.2±1.0）%、（99.4±0.7）%、（101.2±2.7）%（n=3）。按照上述方法測(cè)得內(nèi)標(biāo)的提取回收率為98.6%（n=3）。

2.3.10 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取大鼠空白血漿100 μL，按“2.3.5”項(xiàng)下方法操作，將其中加入10 μL甲醇改為加入10 μL低、中、高質(zhì)量濃度RES對(duì)照品溶液，制成RES血漿樣品，每個(gè)濃度進(jìn)行3樣本分析，分別考察室溫放置2 h、處理后4 ℃放置24 h、凍融循環(huán)1次、凍融循環(huán)3次、? -20 ℃放置30 d的穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，RES血漿樣品在上述條件下的RE均在±15%內(nèi)，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.4 藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)

將18只SD大鼠隨機(jī)分為RES原料藥組、RES/HP- β-CD組、RES/HP-β-CD/Chitosan組，每組6只，分別灌胃給予RES原料藥、RES/HP-β-CD和RES/HP-β-CD/Chitosan，給藥量以RES計(jì)為20 mg/kg[17]，灌服前，樣品均混懸于0.5%羧甲基纖維素鈉溶液中。實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食12 h，自由飲水，分別于給藥后5、10、15、30、45、60、120、240、360、480、720 min眼眶取血0.5 mL，置于肝素化EP管中，4 000 r/min離心10 min，取上清液，于-20 ℃下冷凍保存。按“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定不同時(shí)間血漿樣品中RES的濃度，繪制藥-時(shí)曲線，采用DAS 3.0軟件計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。RES原料藥、RES/HP-β-CD和RES/HP-β-CD/? Chitosan在大鼠體內(nèi)的藥-時(shí)曲線見(jiàn)圖4，藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見(jiàn)表2。

由表2顯示，與RES原料藥組，RES/HP-β-CD 組的cmax明顯升高;與RES/HP-β-CD組比較，RES/HP-β-CD/Chitosan組的tmax明顯延長(zhǎng)，cmax明顯降低，AUC0-12 h明顯增加。與RES原料藥相比，RES/HP-β-CD和RES/HP- β-CD/Chitosan的相對(duì)生物利用度分別為172.5%和540.0%。

3 討論

本課題組先通過(guò)制備RES/HP-β-CD 提高RES的體外釋放度;再利用Chitosan是自然界廣泛存在的多糖，具有良好的生物相容性、生物黏附性的特性，且對(duì)細(xì)胞無(wú)毒[19]，對(duì)RES/HP-β-CD 進(jìn)行改良，制得RES/HP-β-CD/Chitosan。本文體外釋放度試驗(yàn)和大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究均表明，與RES原料藥比較，RES/HP-β-CD的體外釋放度明顯增加，體內(nèi)藥物濃度也明顯增加;與RES/HP-β- CD 比較，RES/HP-β-CD/Chitosan的釋放明顯減緩;且RES/HP-β-CD/Chitosan的AUC0-12 h是RES原料藥的5.5倍。該緩釋載藥系統(tǒng)提高藥物生物利用度的主要原因如下：（1）由于Chitosan在稀酸條件下，氨基質(zhì)子化，形成NH3+。質(zhì)子化后，正電荷互相排斥使得Chitosan分子鏈呈舒展?fàn)顟B(tài)，黏度增大，在微球表面形成凝膠，延緩藥物釋放;（2）由于細(xì)胞膜表面為負(fù)電荷，通過(guò)正、負(fù)電荷吸引Chitosan與黏膜產(chǎn)生黏附作用，延長(zhǎng)藥物在胃腸道的滯留時(shí)間，從而增加藥物生物利用度[20];（3）Chitosan可以改變 F肌動(dòng)蛋白（F-actin）的分布從而影響細(xì)胞間緊密連接的，通過(guò)打開(kāi)連接增加黏膜的通透性，使藥物更好地吸收[21]。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] CHANG CW，WONG CY，WU YT，et al. Development of a solid dispersion system for improving the oral bioavailability of resveratrol in rats[J]. Euro J Drug Metab Pharmacokinet，2017，42（2）：239-249.

[ 2 ] 張敏，焦楊.虎杖酶解液中白藜蘆醇萃取工藝初步研究[J].林業(yè)科技通訊，2019（6）：16-19.

[ 3 ] 王琴飛，李景明，張如蓮.花生中白藜蘆醇及其衍生物的研究進(jìn)展[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，2009，24（10）：145-152.

[ 4 ] 殷向靜.山葡萄果實(shí)轉(zhuǎn)錄組分析及白藜蘆醇調(diào)控機(jī)理研究[D].咸陽(yáng)：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2016.

[ 5 ] 韋曉，汪奇峰，黃慧，等.白藜蘆醇治療糖尿病的分子作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥房，2018，29（18）：2576-2580.

[ 6 ] 尹弟，陳春霞，閔夢(mèng)君，等.基于雌激素代謝調(diào)控的白藜蘆醇對(duì)MNNG誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌變的抑制作用[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2019，35（7）：922-928.

[ 7 ] 李先寬，李赫宇，李帥，等.白藜蘆醇研究進(jìn)展[J].中草藥，2016，47（14）：2568-2578.

[ 8 ] PARK EJ，PEZZUTO JM. The pharmacology of resveratrol in animals and humans[J]. Biochim Biophys Acta，2015，1852（6）：1071-1113.

[ 9 ] POONIA N，KAUR NARANG J，LATHER V，et al. Resveratrol loaded functionalized nanostructured lipid carriers for breast cancer targeting：systematic development，characterization and pharmacokinetic evaluation[J]. Colloids Surf B Biointerfaces，2019.DOI：10.1016/j.colsurfb. 2019.06.004.

[10] BHULLAR KS，HUBBARD BP. Lifespan and healthspan extension by resveratrol[J]. Biochim Biophys Acta，2015，1852（6）：1209-1218.

[11] LU J，ZHENG Y，YANG J，et al. Resveratrol alleviates inflammatory injury and enhances the apoptosis of fibroblastlike synoviocytes via mitochondrial dysfunction and ER stress in rats with adjuvant arthritis[J]. Mol Med Rep，2019，20（1）：463-472.

[12] OCOLOTOBICHE EE，BANEGAS YC，GUERCI AM. Modulation of ionizing radiation-induced damage in human blood lymphocytes by in vivo treatment with resveratrol[J]. Int J Radiat Biol，2019.DOI：10.1080/09553002. 2019.1625489.

[13] PRYSYAZHNA O，WOLHUTER K，SWITZER C，et al. Blood pressure-lowering by the antioxidant resveratrol is counterintuitively mediated by oxidation of cGMP-dependent protein kinase[J]. Circulation，2019，140（2）：126- 137.

[14] AMIDON GL，LENNERNAS H，SHAH VP，et al. A theoretical basis for a biopharmaceutic drug classification：the correlation of in vitro drug product dissolution and in vivo bioavailability[J]. Pharm Res，1995，12（3）：413-420.

[15] SPOGLI R，BASTIANINI M，RAGONESE F，et al. Solid dispersion of resveratrol supported on magnesium dihydroxide （Resv@MDH） microparticles improves oral bioavailability[J]. Nutrients，2018，10（12）：E1925.

[16] YUAN C，LIU B，LIU H. Characterization of hydroxypropyl-β-cyclodextrins with different substitution patterns via FTIR，GC-MS，and TG-DTA[J]. Carbohydr Polym，2015.DOI：10.1016/j.carbpol.2014.10.070.

[17] PANDITA D，KUMAR S，POONIA N，et al. Solid lipid nanoparticles enhance oral bioavailability of resveratrol，a natural polyphenol[J]. Food Res Int，2014.DOI：10.1016/j.foodres.2014.05.059.

[18] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：四部[S]. 2015年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：121-124.

[19] CROISIER F，JEROME C. Chitosan-based biomaterials for tissue engineering[J]. Eur Polym J，2013，49（4）：780- 792.

[20] 黃倩. N-三甲基殼聚糖包衣去氫駱駝蓬堿脂質(zhì)體制備及其在大鼠體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)[D].蘇州：蘇州大學(xué)，2013.

[21] ARTURSSON P，LINDMARK T，DAVIS SS，et al. Effect of chitosan on the permeability of monolayers of intestinal epithelial-cells （Caco-2）[J]. Pharm Res，1994，11（9）：1358-1361.

（收稿日期：2019-06-14 修回日期：2019-07-15）

（編輯：鄒麗娟）