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    玄參葉的形態(tài)解剖學(xué)研究

    2019-09-10 07:22:44李漓許光明趙凡陳乃宏周小江

    李漓 許光明 趙凡 陳乃宏 周小江

    〔摘要〕 目的 為玄參葉的開發(fā)利用和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。方法 按生藥學(xué)常規(guī)方法對玄參葉進(jìn)行形態(tài)解剖學(xué)研究,其中組織切片采用徒手切片和石蠟切片相結(jié)合的方法,葉表面制片采用撕取表皮的方法,葉表面掃描電鏡觀察采用脫水、干燥、噴金后常規(guī)掃描的方法,組織、葉表面、粉末圖均采用顯微拍攝。結(jié)果 找出了玄參葉的性狀和顯微鑒別特征。結(jié)論 此研究可作為鑒定玄參葉的依據(jù)。

    〔關(guān)鍵詞〕 玄參葉;玄參;性狀鑒定;顯微特征

    〔中圖分類號〕R282.5? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ?〔文章編號〕doi:10.3969/j.issn.1674-070X.2019.02.010

    玄參為玄參科植物玄參Scropularia ningpoensis Hemsl.的干燥根, 具有清熱涼血、滋陰降火、解毒散結(jié)的功效,主用于熱入營血、溫毒發(fā)斑、熱病傷陰、舌絳煩渴、津傷便秘、骨蒸勞嗽、目赤、咽痛、白喉、瘰疬、癰腫瘡毒[1]。玄參藥用歷史悠久,始載于漢代的《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為中品。梁代《本草經(jīng)集注》云:“根甚黑”。宋代《開寶本草》中記載:“莖方大,高四五尺,紫赤色而有細(xì)毛,葉如掌大而尖長。根生青白,干即紫黑”?!侗静輬D經(jīng)》曰:“其根尖長,生青白,干即紫黑。新者潤膩。一根可生五七枚”。明代《本草綱目》中記載:“花有紫白二種”,并釋其名“玄,黑色也”。

    玄參主要含環(huán)烯醚萜類、苯丙素類、有機(jī)酸類、黃酮類、三萜皂苷類、多糖等成分,具有解熱、抗炎、抗氧化、保肝、抗疲勞、降壓、抗動脈硬化等作用[2-6]。玄參作為大宗中藥材,市場年需求量8 000~10 000噸,而玄參的藥用部位為根,采收后,其地上部分白白丟棄,而玄參葉是其中很重要的一部分。前期我們研究發(fā)現(xiàn),在玄參葉中含有哈巴苷和哈巴俄苷等有效成分,因此,玄參葉的綜合開發(fā)利用變得非常有價值和意義。

    為了開發(fā)利用玄參葉這一白白丟棄的資源,我們特對玄參葉進(jìn)行形態(tài)解剖學(xué)研究,以期找出其主要鑒別點(diǎn),為其質(zhì)量控制提供依據(jù)。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1? 材料

    玄參葉藥材分別于2017年10月、12月和2018年7月采自新邵縣常春藤中藥材種植基地,經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室周小江教授鑒定為玄參科植物玄參Scropularia ningpoensis Hemsl.的新鮮和干燥葉。

    1.2? 儀器與試藥

    JSM-6380 LV型掃描電鏡(日本電子株式會社),XS-2000生物顯微鏡(南京江南光電股份公司);Histo STAT-820型石蠟切片機(jī)(美國Reichert公司)?;瘜W(xué)試劑均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1? 方法

    按生藥學(xué)常規(guī)方法對玄參葉進(jìn)行形態(tài)組織學(xué)研究,其中組織切片采用徒手切片和石蠟切片相結(jié)合的方法,葉表面制片采用撕取表皮的方法,組織、葉表面、粉末圖均采用顯微拍攝。

    葉表面掃描電鏡觀察:自新鮮玄參葉片上取0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm大小的樣品,置10%的水合氯醛溶液中浸泡30 min,,超聲波處理5 min清洗表面雜質(zhì),并用水洗去殘留的水合氯醛,處理后的樣品加2%的戊二醛溶液浸泡,并放置4 ℃冰箱中固定4 h,取出,磷酸鹽緩沖液清洗3次,再用1%的鋨酸固定2 h。固定后的樣品用30%乙醇清洗3次后,依次用50%、70%、90%、100%乙醇脫水,每次10 min,其中100%乙醇脫水2次。脫水后的樣品用丙酮、丙酮-乙酸異戊酯(1∶1)、乙酸異戊酯各清洗1次,放入臨界點(diǎn)干燥器樣品室中進(jìn)行CO2臨界點(diǎn)干燥,粘貼,噴金。并按常規(guī)方法進(jìn)行掃描、拍照。

    2.2? 結(jié)果

    2.2.1? 藥材性狀? 本品常皺縮或破碎,完整者展開后呈卵形或卵狀披針形,長18~35 cm,寬7~20 cm。邊緣具細(xì)鋸齒,稀為不規(guī)則的細(xì)重鋸齒,葉端漸尖,基部楔形、圓形或近心形;上表面棕黃綠色或棕黃色,下面顏色稍淺;葉脈為羽狀網(wǎng)脈,中脈在葉下表面顯著隆起;葉柄長2~4.5 cm。質(zhì)脆,易碎。氣微,味微苦。

    2.2.2? 顯微鑒定? 葉橫切面 上、下表皮均為1列細(xì)胞,上表皮細(xì)胞類長方形,下表皮細(xì)胞類方形,壁稍厚。上、下表面均著生有腺毛。柵欄組織僅存在于上表皮下方,為1列長橢圓形細(xì)胞,海綿組織為4~5列不規(guī)則的橢圓形細(xì)胞,排列疏松。主脈在下方顯著突出。上表皮下方有1~3列厚角組織,下表皮內(nèi)方有3~9列厚角組織;維管束為無限外韌型,半月形,木質(zhì)部較寬,由導(dǎo)管和木薄壁細(xì)胞組成,有的形成層不明顯,韌皮部由篩管、伴胞和韌皮薄壁細(xì)胞組成。

    葉表面觀 上表皮細(xì)胞垂周壁較平直,未見氣孔;腺毛多見,腺頭為2個細(xì)胞,可見棕黃色分泌物,柄為單細(xì)胞。下表皮細(xì)胞垂周壁波狀彎曲,氣孔為不等式或不定式,副衛(wèi)細(xì)胞3~5個;腺毛多見,有兩種,一種腺毛的腺頭為2個細(xì)胞,可見棕黃色分泌物,腺柄為單細(xì)胞;另一種腺毛僅在葉脈處可見,腺頭為單細(xì)胞,細(xì)胞很小,可見棕黃色分泌物,腺柄由1~7個細(xì)胞組成,長而略彎曲,有的中間柄細(xì)胞溢縮。

    葉表面掃描電鏡觀察 葉上表面可見明顯的隆起皺褶和皺紋,腺毛的頭細(xì)胞明顯。下表面氣孔多見,橢圓形;腺毛多見,有兩種,一種腺毛的腺頭為2個細(xì)胞;另一種腺毛僅在葉脈處可見。

    粉末 青綠色或墨綠色。葉下表皮碎塊眾多,細(xì)胞垂周壁波狀彎曲,氣孔為不等式或不定式,副衛(wèi)細(xì)胞3~5個。腺毛多見,有兩種,一種腺毛的腺頭為2個細(xì)胞,可見棕黃色分泌物,腺柄為單細(xì)胞;另一種腺毛的腺頭為單細(xì)胞,細(xì)胞很小,可見棕黃色分泌物,常斷裂,腺柄由1~7個細(xì)胞組成,長而略彎曲,有的中間柄細(xì)胞溢縮,長100~620 μm,基部直徑20~30 μm。導(dǎo)管眾多,多為網(wǎng)紋或螺紋導(dǎo)管,直徑10~30 μm,長65~310 μm。

    3 討論

    對葉橫切面進(jìn)行顯微觀察時,我們發(fā)現(xiàn)韌皮部外側(cè)有3~5列壁稍厚的細(xì)胞,懷疑是厚壁組織,但經(jīng)對葉片主脈進(jìn)行縱切面觀察后,確定為韌皮薄壁細(xì)胞;對葉片下表面進(jìn)行顯微觀察時,對采自新邵縣常春藤中藥材種植基地的玄參葉進(jìn)行了100多個制片觀察,最終確定頭為單細(xì)胞、柄由1~7個細(xì)胞組成的腺毛僅在葉脈上著生;對于葉表面,我們不僅進(jìn)行光學(xué)顯微下觀察,而且進(jìn)行了掃描電鏡觀察,這樣更清晰地鑒定了葉表皮細(xì)胞、氣孔、腺毛等特征;通過本研究,找出了玄參葉的形態(tài)解剖學(xué)鑒別特征,為玄參葉的質(zhì)量控制和開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

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