白酒中乳酸含量檢測(cè)方法

王曉玉　蒲小蘭　安軍　王娃金　林書蘭

摘要：在本文的介紹中，我們重點(diǎn)提到了白酒中乳酸含量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，通過(guò)建立測(cè)定白酒中的乳酸含量，得出關(guān)于乳酸含量的相應(yīng)檢測(cè)方法。研究結(jié)果顯示白酒中的乳酸在一定濃度范圍內(nèi)與峰面積呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，為此我們需要在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中尋找出更為準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、快速的乳酸含量檢測(cè)方法，將其應(yīng)用到日后的白酒乳酸含量檢測(cè)作業(yè)中，使得所測(cè)出的乳酸含量數(shù)據(jù)能夠更加真實(shí)、可靠。

關(guān)鍵詞：白酒;乳酸;含量;檢測(cè)方法

【中圖分類號(hào)】R197??? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A???? 【文章編號(hào)】1004-7484（2019）10-0220-03

關(guān)于白酒中乳酸含量的檢測(cè)方法研究這一話題，我們進(jìn)行了對(duì)比分析，基于不同試驗(yàn)情況下總結(jié)出了不同乳酸含量檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn);其次，酸類物質(zhì)的出現(xiàn)主要源于白酒中的一些呈香呈味物質(zhì)，這類物質(zhì)在白酒微量成分中所占據(jù)的比例較大，研究證明一些濃香型白酒的口感受該物質(zhì)的影響較大;此外，白酒中乳酸含量的多少將會(huì)直接影響到白酒品質(zhì)的好壞，進(jìn)而受到制酒者的格外關(guān)注?？梢哉f(shuō)對(duì)白酒中的乳酸含量進(jìn)行的檢測(cè)，將會(huì)在很大程度上影響著整個(gè)制酒工業(yè)的發(fā)展，對(duì)白酒的勾兌以及一些白酒生產(chǎn)工藝的控制都有著較為深遠(yuǎn)的影響。

1儀器與試劑

1.1 儀器：高效液相色譜儀（二極管陣列檢測(cè)器）Agilent1200;十萬(wàn)分之一分析天平;

1.2 試劑：甲醇、乙腈為色譜純，水為實(shí)驗(yàn)室一級(jí)用水（超純水），磷酸、磷酸二氫鉀均為分析純。乳酸對(duì)照品（含量89.9%），Dr. Ehrenstorfer Gmbh;L-乳酸對(duì)照品（含量90.08%），阿拉丁;DL-乳酸對(duì)照品（含量85%），百靈威;乙酸對(duì)照品（含量99+%），Alfa Aesar;

1.3 樣品：實(shí)驗(yàn)室提供白酒

2 樣品測(cè)定

2.1 對(duì)照品溶液的制備：分別精密稱定乳酸對(duì)照品80mg、乙酸對(duì)照品65mg，置25mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，得對(duì)照品儲(chǔ)備液，精密吸取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液0.125mL，0.25mL，0.5mL，1.0mL，2.0mL各置5mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，即得對(duì)照品工作液，供制作標(biāo)準(zhǔn)曲線用。

2.2 樣品制備：方法一：樣品直接用0.45μm濾膜過(guò)濾，備用。

方法二：取1mL酒樣于10mL進(jìn)口塑料離心管，氮吹（40℃）至剩約0.5mL，再用水稀釋至2mL，用0.45μm濾膜過(guò)濾，備用。

2.3色譜條件：色譜柱：Agilent，（250mm×4.6mm，5μm）;檢測(cè)波長(zhǎng)210nm，流速為1.0mL/min。

對(duì)照品色譜圖及光譜

3 色譜條件的確定

3.1 磷酸二氫鉀緩沖液pH的選擇：其它色譜條件保持不變，分別使用兩種pH的磷酸二氫鉀緩沖液作流動(dòng)相，考察出峰情況。

對(duì)照品、樣品直接用0.45μm濾膜過(guò)濾，上機(jī)測(cè)試，色譜條件：100%0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液作流動(dòng)相;柱溫40℃;進(jìn)樣量20 μL;其中0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的pH分別調(diào)至2.5及2.0，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，兩種pH條件下出峰情況無(wú)明顯差異，故pH，選擇2.0。

3.2 流動(dòng)相的篩選：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了三種流動(dòng)相：①100%0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液，②甲醇-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（5：95），③乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）。

對(duì)照品照“上述配制乳酸（198.68mg/L）及乙酸（523.5mg/L）單標(biāo)，樣品直接用0.45μm濾膜過(guò)濾，上機(jī)測(cè)試，其它色譜條件：柱溫為40℃;進(jìn)樣量為20 μL;0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的pH為2.0。

三種流動(dòng)相下標(biāo)品出峰情況沒(méi)有明顯差異，在第三種流動(dòng)相下樣品目標(biāo)峰分離度較好，故選用乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）作為本方法的流動(dòng)相。

3.3 柱溫的選擇：樣品直接用0.45μm濾膜過(guò)濾，上機(jī)測(cè)試，分別考察柱溫40℃和25℃時(shí)樣品出峰情況。其它色譜條件：流動(dòng)相為乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）;進(jìn)樣量20 μL;0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的pH為2.0。

兩種溫度對(duì)出峰無(wú)明顯差異，考慮到高溫可能影響色譜柱的壽命，故選用25℃。

3.4進(jìn)樣量的選擇：樣品按兩種方法各處理一份，上機(jī)測(cè)試，分別考察了進(jìn)樣20μL和5μL樣品的出峰情況。其它色譜條件：流動(dòng)為相乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）;柱溫為25℃;0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液的pH為2.0。

兩種情況下標(biāo)品均能能到較好的分離，樣品的出峰情況則有兩種：①直接過(guò)濾進(jìn)樣，進(jìn)樣量大的分離效果比進(jìn)樣量小的稍差;②樣品氮吹，這種情況下，進(jìn)樣量不影響出峰效果，均能達(dá)到良好分離。

最終確定的色譜條件：色譜柱Agilent，ZORBAX SB-Aq（250mm×4.6mm，5μm）;檢測(cè)波長(zhǎng)210nm;乙腈-0.1mol/L磷酸二氫鉀緩沖液（1：99）作流動(dòng)相;流速1.0mL/min;柱溫25℃;進(jìn)樣量20 μL（氮吹除醇）、5 μL（直接進(jìn)樣）。

4樣品制備方式的確定

樣品水浴/電熱板揮干溶劑的處理方式所得結(jié)果重現(xiàn)性差且乙酸峰會(huì)出現(xiàn)丟失，故考慮采用40℃水浴同時(shí)氮吹的方式除醇。

可以發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是水浴/電熱板揮干、還是氮吹吹干溶劑的方式，結(jié)果均不理想，考慮可能是在揮干溶劑的過(guò)程中造成的損失，而水浴或電熱板的方式均不能較好的控制除去的溶劑的量，故采用40℃水浴加氮吹的方式除去一定量的溶劑（主要是易揮發(fā)的醇）后再用水定容到原體積。實(shí)驗(yàn)中考察了氮吹后剩余不同體積的出峰情況：取1mL酒樣于10mL進(jìn)口塑料離心管，40℃氮吹至剩余約0.9mL、0.8mL、0.7mL、0.6mL、0.5mL、0.4mL、0.3mL，再用水稀釋至2mL，用0.45μm濾膜過(guò)濾，上機(jī)測(cè)定。

從樣品中乳酸及乙酸的分離情況來(lái)看，當(dāng)剩余0.3mL～0.5mL時(shí)，均能得到良好分離，當(dāng)剩余0.6mL～0.9mL時(shí)，分離度較差。從定量結(jié)果來(lái)看，隨著剩余體積的減少，含量也隨之減少;究其原因，一方面可能是氮吹帶來(lái)的損失;另一方面，剩余體積越多，除醇越少，峰分離越差，直接影響積分，進(jìn)而影響定量結(jié)果。綜合考慮，選擇氮吹至剩余0.5mL。氮吹處理方法為：取1mL酒樣于10mL進(jìn)口塑料離心管，40℃氮吹至剩余約0.5mL，再用水稀釋至2mL，用0.45μm水相有機(jī)濾膜過(guò)濾，備用。

5 精密度試驗(yàn)

取一份樣品，連續(xù)測(cè)定6次乳酸的精密度，結(jié)果見(jiàn)表3。

結(jié)果表明，該方法精密度良好。

6回收率試驗(yàn)

吸取1 mL已知含量的樣品，按上述方法二樣品處理，結(jié)果如表4。

加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確度高，方法可靠

7 結(jié)論與討論

通過(guò)本次對(duì)白酒中乳酸含量進(jìn)行檢測(cè)實(shí)驗(yàn)后，我們可以發(fā)現(xiàn)高效液相色譜法不但可以準(zhǔn)確無(wú)誤的檢測(cè)出白酒中乳酸的含量，同時(shí)其還具有檢測(cè)效率快、檢測(cè)準(zhǔn)確度高等特點(diǎn)。此外，與傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)中所使用的氣相色譜測(cè)試法相比，高效液相色譜法適用范圍更廣。

8 結(jié)束語(yǔ)

綜上，本文針對(duì)“白酒中乳酸含量檢測(cè)方法”這一話題展開(kāi)了一個(gè)深刻的論述，研究發(fā)現(xiàn)白酒中所含有的乳酸成分將會(huì)在一定程度上影響著白酒的制酒口感，對(duì)白酒制酒工藝以及白酒的品質(zhì)有著很大的關(guān)聯(lián)性，為此，在實(shí)際白酒成分檢測(cè)作業(yè)中，氣相色譜法配FID檢測(cè)器可以測(cè)定白酒中大多數(shù)有機(jī)酸，但作為四大酸之一的乳酸則在FID上沒(méi)有響應(yīng)，查閱相關(guān)資料可知，采用高效液相色譜儀直接進(jìn)樣，可同時(shí)分析出白酒中乳酸及乙酸的含量，彌補(bǔ)了氣相色譜儀不能直接分析乳酸的缺點(diǎn)?；趥髟诩铀贆z測(cè)速度的同時(shí)，擴(kuò)大了樣品濃度范圍、提高了檢測(cè)的精密度和準(zhǔn)確度，對(duì)科學(xué)指導(dǎo)白酒生產(chǎn)有著重要的意義。

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