外周血T細(xì)胞亞群與突發(fā)性耳聾發(fā)病的關(guān)系

李偉　佘文勝　吳新宇　 胡縣

[摘要] 目的 探討外周血T細(xì)胞亞群與突發(fā)性耳聾發(fā)病及預(yù)后的關(guān)系。 方法 選取2016年8月～2018年8月湖北省鄂州市中心醫(yī)院收治的76例突發(fā)性耳聾患者作為研究組，另選取同期進行健康檢查的健康體檢者60名作為對照組。研究組患者采用常規(guī)治療，連續(xù)治療10 d，檢測并比較兩組外周血T細(xì)胞亞群水平。根據(jù)療效將研究組分為有效組（54例）和無效組（22例），根據(jù)研究組外周血T細(xì)胞亞群失衡情況，將患者分為正常組（27例）和失衡組（49例），比較兩組治療的有效率。 結(jié)果 與對照組比較，研究組治療前外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+明顯較低，而CD8+明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。研究組治療后外周血CD4+和CD4+/CD8+明顯升高，CD8+明顯降低，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。研究組治療后外周血CD3+、CD4+與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），而CD4+/CD8+明顯較低，CD8+明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。與有效組比較，無效組CD3+、CD4+及CD4+/CD8+明顯較低，而CD8+明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。正常組的治療有效率為88.89%，明顯高于失衡組的61.22%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論 突發(fā)性耳聾的發(fā)病與外周血T細(xì)胞亞群失衡存在一定關(guān)系，免疫功能障礙可能影響突發(fā)性耳聾患者的聽力恢復(fù)。

[關(guān)鍵詞] 外周血;T細(xì)胞亞群;突發(fā)性耳聾;發(fā)病;預(yù)后

[中圖分類號] R764.437 ? ? ? ? ?[文獻標(biāo)識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-7210（2019）06（c）-0106-04

Relationship between peripheral blood T cell subsets and onset of sudden deafness

LI Wei1 ? SHE Wensheng1 ? WU Xinyu1 ? HU Xian2

1.Department of Otolaryngology， Ezhou Central Hospital， Hubei Province， Ezhou ? 463000， China; 2.Department of Cardiothoracic Surgery， Ezhou Central Hospital， Hubei Province， Ezhou ? 463000， China

[Abstract] Objective To investigate the relationship between peripheral blood T cell subsets and onset and prognosis of sudden deafness. Methods Seventy-six patients with sudden deafness admitted to Ezhou Central Hospital from August 2016 to August 2018 were selected as the study group. Another 60 healthy people who underwent health examination during the same period were selected as the control group. The patients in the study group received routine treatment for 10 d. The level of peripheral blood T cell subsets of the two groups was detected and compared. According to the curative effect， the study group were divided into effective group （54 cases） and ineffective group （22 cases）， the level of peripheral blood T cell subsets of the two groups was compared. According to the imbalance of peripheral blood T cell subsets of the study group， the patients were divided into normal group （27 cases） and imbalance group （49 cases）， the effective rate of the two groups was compared. Results Compared with the control group， CD3+， CD4+ and CD4+/CD8+ in peripheral blood of the study group before treatment were significantly lower， while CD8+ was significantly higher， the differences were statistically significant （P < 0.05）. The peripheral blood CD4+ and CD4+/CD8+ in the study group were significantly increased and CD8+ was significantly decreased after treatment compared with those before treatment， the differences were statistically significant （P < 0.05）. Compared with the control group， there was no significant difference in CD3+ and CD4+ in peripheral blood after treatment in the study group （P > 0.05）， but CD4+/CD8+ was significantly lower and CD8+ was significantly higher in the study group （P < 0.05）. Compared with the effective group， CD3+， CD4+ and CD4+/CD8+ in the ineffective group were significantly lower， while CD8+ was significantly higher， the differences were statistically significant （P < 0.05）. The effective rate of treatment in the normal group （88.89%） was significantly higher than that in the imbalance group （61.22%） （P < 0.05）. Conclusion The onset of sudden deafness is related to the imbalance of peripheral blood T cell subsets. Immune dysfunction may affect the hearing recovery of sudden deafness patients.

[Key words] Peripheral blood; T cell subsets; Sudden deafness; Onset; Prognosis

突發(fā)性耳聾是耳鼻喉科常見的一種急癥，是指由不明原因?qū)е碌囊环N突發(fā)感音神經(jīng)性聽力損失[1]。突發(fā)性耳聾患者在不明原因的情況下在數(shù)分鐘、數(shù)小時、甚至3 d內(nèi)聽力急劇下降，并常伴隨耳鳴、眩暈、惡心等癥狀，嚴(yán)重影響患者的社交與日常生活[2]。突發(fā)性耳聾發(fā)病原因復(fù)雜，目前尚無特效藥物和治療方法，臨床常采用綜合療法，但其治療效果存在不確定性[3-4]。臨床上對于突發(fā)性耳聾的發(fā)病機制尚不完全明確，目前普遍認(rèn)為與血管栓塞、病毒感染、自身免疫等存在密切聯(lián)系[5-6]。近年來國內(nèi)關(guān)于突發(fā)性耳聾與血液微循環(huán)及病毒感染關(guān)系的研究較多，但關(guān)于免疫功能在突發(fā)性耳聾疾病過程中作用的研究較為少見。已有研究證實，內(nèi)淋巴囊是內(nèi)耳免疫應(yīng)答中心，內(nèi)耳并非免疫豁免器官[7]。當(dāng)病原刺激內(nèi)耳，內(nèi)淋巴囊外免疫活性細(xì)胞增多，其可通過豐富的血管網(wǎng)與循環(huán)中的巨噬細(xì)胞、相關(guān)淋巴細(xì)胞及亞群相互作用，引發(fā)免疫應(yīng)答反應(yīng)[8]。本研究探討外周血T細(xì)胞亞群與突發(fā)性耳聾發(fā)病及預(yù)后的關(guān)系，旨在為探索突發(fā)性耳聾發(fā)病過程中免疫因素所起的作用提供線索?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年8月～2018年8月湖北省鄂州市中心醫(yī)院（以下簡稱“我院”）收治的76例突發(fā)性耳聾患者作為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者均符合《突發(fā)性耳聾診斷依據(jù)和療效分級》[9]中關(guān)于突發(fā)性耳聾的診斷標(biāo)準(zhǔn);②患者意識清醒，無惡性疾病;③均為單側(cè)耳聾。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有腦血管病史，并遺留神經(jīng)系統(tǒng)損害者;②近期有出血或手術(shù)史的患者;③合并肝腎功能障礙或心肺功能不全者;④抑郁癥患者;⑤妊娠期或哺乳期婦女。研究組男41例，女35例;年齡32～71歲，平均（45.83±7.25）歲;病程1～7 d，平均（4.87±1.62）d;左側(cè)耳聾44例，右側(cè)耳聾32例;平均聽閾（74.15±6.81）dB。另選取同期在我院進行健康檢查的健康體檢者60名為對照組，其中男33名，女27名;年齡30～69歲，平均（42.37±5.83）歲。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。所有研究對象均知情且同意參與本研究。研究已經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)通過。

1.2 治療方法

研究組突發(fā)性耳聾患者采用常規(guī)治療，包括靜脈滴注地塞米松（石藥集團歐意藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號：20160709，規(guī)格：5 mg）10 mg/次，1次/d;口服維生素C顆粒（甘肅扶正藥業(yè)科技股份有限公司，生產(chǎn)批號：20160507，規(guī)格：2 g）2 g/次，1次/d，同時給予口服甲鈷胺片（江蘇迪賽諾制藥有限公司，生產(chǎn)批號：20160529，規(guī)格：0.5 mg）等營養(yǎng)神經(jīng)藥物。連續(xù)治療10 d。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 外周血T細(xì)胞亞群檢測 ?研究組患者于治療前和治療后、對照組研究對象于入組時，采集空腹靜脈血5 mL，采用Beckman Coulter Cytomics FC500型流式細(xì)胞儀測定外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。CD4+/CD8+正常參考值1.40～2.00。

1.3.2 純音測聽 ?研究組患者于治療前及治療后采用微機控制聽力計測量純音聽閾，以0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 kHz的氣導(dǎo)聽閾，患者在各頻率聽閾的算術(shù)平均值即為平均聽閾。

1.4 療效評價標(biāo)準(zhǔn)

參考《突發(fā)性耳聾診斷依據(jù)和療效分級》[9]對治療后的研究組患者療效進行評價。若患者在0.25～4.00 kHz的平均聽力提高≥15 dB，則認(rèn)為治療有效;若患者在0.25～4.00 kHz的平均聽力提高<15 dB，則認(rèn)為治療無效。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

研究數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0軟件處理。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料以例數(shù)或百分比表示，組間比較采用χ2檢驗。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對照組與研究組外周血T細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較

與對照組比較，研究組治療前外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+明顯較低，而CD8+明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。研究組治療后外周血CD3+有所升高，但與治療前比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。研究組治療后外周血CD4+和CD4+/CD8+明顯提高，CD8+明顯降低，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。研究組治療后外周血CD3+、CD4+與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），而CD4+/CD8+明顯較低，CD8+明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 研究組不同療效患者治療前外周血T細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較

研究組治療的有效率為71.05%（54/76），根據(jù)療效將其分為有效組（54例）和無效組（22例）。與有效組比較，無效組CD3+、CD4+及CD4+/CD8+明顯較低，而CD8+明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

2.3 外周血T細(xì)胞亞群失衡與研究組療效的關(guān)系

根據(jù)研究組治療前的CD4+/CD8+比值，將患者分為正常組（27例）和失衡組（49例）。其中正常組的治療有效率明顯高于失衡組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表3。

3 討論

目前認(rèn)為，突發(fā)性耳聾發(fā)病與特異性病毒感染、內(nèi)耳微循環(huán)病變、精神心理因素、免疫因素等有關(guān)[11]。臨床中對突發(fā)性耳聾的治療方法是基于目前所認(rèn)為的導(dǎo)致內(nèi)耳功能障礙的病理生理機制制訂，例如采用糖皮質(zhì)激素和溶栓、抗凝藥物緩解血管水腫，改善內(nèi)耳微循環(huán)[12];采用類固醇逆轉(zhuǎn)內(nèi)耳缺氧等[13]。傳統(tǒng)認(rèn)識中，內(nèi)耳與細(xì)胞、體液免疫被血-迷路屏障隔開，因而可以免受全身免疫反應(yīng)影響[14]。然而近年來研究表明，內(nèi)淋巴囊及囊周組織中存在淋巴細(xì)胞，內(nèi)耳也具有免疫應(yīng)答能力，而內(nèi)淋巴囊則被認(rèn)為是內(nèi)耳的免疫應(yīng)答中心[15]。內(nèi)耳在遭受感染、外傷等情況下，血-迷路屏障受到破壞，體液循環(huán)中的抗體可經(jīng)內(nèi)淋巴囊豐富的毛細(xì)血管進入內(nèi)耳，從而啟動免疫系統(tǒng)[16]。過往研究發(fā)現(xiàn)，多發(fā)性結(jié)節(jié)動脈炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病患者往往伴有感音神經(jīng)性聾[17]。因此，免疫因素可能對突發(fā)性耳聾的發(fā)生、發(fā)展有重要影響。

細(xì)胞免疫是人體免疫系統(tǒng)中重要的一部分，其主要通過T淋巴細(xì)胞各亞群比例對人體免疫內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定進行調(diào)節(jié)和維持[18]。近年來已發(fā)現(xiàn)越來越多疾病的發(fā)生、發(fā)展中伴隨T淋巴細(xì)胞亞群的變化。CD3+是成熟T淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志;CD4+ T淋巴細(xì)胞是輔助T細(xì)胞，具有輔助其他免疫細(xì)胞增殖、分化的作用;CD8+ T淋巴細(xì)胞是殺傷T細(xì)胞，可抑制和殺傷T細(xì)胞和靶細(xì)胞，具有細(xì)胞毒作用[19]。正常情況下，機體內(nèi)CD4+ T淋巴細(xì)胞和CD8+ T淋巴細(xì)胞處于動態(tài)平衡，兩者保持一定比例，若兩者平衡受到破壞則可引發(fā)細(xì)胞免疫功能紊亂，進一步導(dǎo)致疾病發(fā)生[20]。本研究中，與對照組比較，研究組治療前外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+明顯較低，而CD8+明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。提示突發(fā)性耳聾患者免疫功能有一定程度的下降，機體存在T細(xì)胞亞群失衡。同時，研究組患者治療后的外周血CD4+和CD4+/CD8+明顯提高，CD8+明顯降低，與治療前比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），提示突發(fā)性耳聾患者病情好轉(zhuǎn)可能與免疫功能好轉(zhuǎn)有關(guān)。進一步根據(jù)研究組患者的療效及外周血CD4+/CD8+比值進行分組觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與有效組比較，無效組CD3+、CD4+及CD4+/CD8+明顯較低，而CD8+明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）;正常組的治療有效率為88.89%，明顯高于失衡組的61.22%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。提示免疫功能紊亂可影響突發(fā)性耳聾患者預(yù)后，外周血T細(xì)胞亞群失衡的患者聽力恢復(fù)較差。

綜上所述，突發(fā)性耳聾的發(fā)病與外周血T細(xì)胞亞群失衡存在一定關(guān)系，免疫功能障礙可能影響突發(fā)性耳聾患者的聽力恢復(fù)。本研究仍存在一些不足之處，如未能探明是T細(xì)胞亞群失衡導(dǎo)致了突發(fā)性耳聾的發(fā)病還是突發(fā)性耳聾患者的內(nèi)耳損傷導(dǎo)致了T細(xì)胞亞群失衡;同時，本研究僅討論了細(xì)胞免疫與突發(fā)性耳聾的關(guān)系，而未探討體液免疫對突發(fā)性耳聾的影響。關(guān)于免疫因素與突發(fā)性耳聾的關(guān)系，仍有待更深入的研究。

[參考文獻]

[1] ?王秋榮，李國義.電針及參麥注射液結(jié)合西醫(yī)常規(guī)療法治療突發(fā)性耳聾臨床研究[J].國際中醫(yī)中藥雜志，2017， 39（4）：321-325.

[2] ?Min SK，Shin JH，Chang MY，et al. Impact of control of blood glucose level during treatment of sudden deafness in diabetics：relationship with prognosis [J]. Eur Arch Otorhinolaryngol，2017，274（3）：1339-1343.

[3] ?Chen CH，Young YH. N-acetylcysteine as a single therapy for sudden deafness [J]. Acta Otolaryngol，2017，137（1）：58-62.

[4] ?楊斌，王占強，朱建忠，等.突發(fā)性耳聾患者治療前后血脂及血液流變學(xué)水平變化及臨床意義[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2016，16（13）：2520-2522，2600.

[5] ?陸飛彩，劉穩(wěn)，蔡暢，等.突發(fā)性耳聾患者血栓彈力圖的特征[J].臨床與病理雜志，2017，37（11）：2428-2433.

[6] ?Chen HC，Chung CH，Wang CH，et al. Increased risk of sudden sensorineural hearing loss in patients with hepatitis virus infection [J]. PLoS One，2017，12（4）：e0175266.

[7] ?王濤，劉少峰，王文，等.自身免疫性內(nèi)耳病的診治進展[J].國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2017，41（6）：337-340.

[8] ?M？覬ller MN，Kirkeby S，Cayé-Thomasen P. Innate immune defense in the inner ear-mucines are expressed by the human endolymphatic sac [J]. J Anat，2017，230（2）：297-302.

[9] ?中華醫(yī)學(xué)會耳鼻咽喉科學(xué)會，中華耳鼻咽喉科雜志編輯委員會.突發(fā)性耳聾診斷依據(jù)和療效分級[J].中華耳鼻咽喉科雜志，1997，32（2）：9.

[10] ?王麗平，李中明，徐沙麗.高壓氧聯(lián)合法舒地爾注射液治療突發(fā)性耳聾的療效觀察[J].神經(jīng)損傷與功能重建，2016，11（5）：451-453.

[11] ?周長明，鄭茜玲，楊川，等.176例突發(fā)性耳聾患者的臨床特征分析[J].中國聽力語言康復(fù)科學(xué)雜志，2017，15（2）：111-114.

[12] ?申跡，項錦銀.早期鼓室注射聯(lián)合全身應(yīng)用糖皮質(zhì)激素對突發(fā)性耳聾的療效探討[J].重慶醫(yī)學(xué)，2017，46（6）：789-791，795.

[13] ?Zanetti D，Di Berardino F，Nassif N，et al. Intratympanic steroid delivery by an indwelling catheter in refractory severe sudden sensorineural hearing loss [J]. Auris Nasus Larynx，2018，45（2）：227-233.

[14] ?于浩然，楊軍.內(nèi)淋巴囊手術(shù)治療梅尼埃病的歷史演變與新進展[J].臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2016，30（17）：1410-1414.

[15] ?Mori N，Miyashita T，Inamoto R，et al. Ion transport its regulation in the endolymphatic sac：suggestions for clinical aspects of Meniere's disease [J]. Eur Arch Otorhinolaryngol，2017，274（4）：1813-1820.

[16] ?張桐，韓維舉.耳蝸血管紋血-迷路屏障病理生理學(xué)研究進展[J].中華耳科學(xué)雜志，2017，15（2）：257-262.

[17] ?林鋒，馬亦飛，張惠琴.參附注射液聯(lián)合巴曲酶治療突發(fā)性耳聾療效觀察[J].貴州醫(yī)藥，2016，40（2）：203-204.

[18] ?劉軍連，王曉菲，徐冰心，等.自身免疫性慢性蕁麻疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測和比例分析[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2017，33（1）：96-99.

[19] ?符青松，黃循斌.外周血T淋巴細(xì)胞亞群在EV71型手足口病患者病情判斷中的價值[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2016， 13（4）：113-116.

[20] ?Ratnasari N，Bayupurnama P，Maduseno S，et al. Are Mucosa CD4+/CD8+ T-Cells Expressions Correlated with the Endoscopic Appearance of Chronic Gastritis Related with Helicobacter pylori Infection？[J]. Acta Med Iran，2016， 54（6）：359-365.