DC-CIK與化療、射頻消融聯(lián)用治療結(jié)直腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移療效

趙海燕　云升　李超　蘇烏云　張雪琳

[摘要]目的：觀察樹(shù)突狀細(xì)胞一細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞（DC-CIK）聯(lián)合化療、射頻消融治療結(jié)直腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移療效。方法：回顧性分析我院2012年8月至2015年8月收治的結(jié)直腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移患者臨床資料，全身化療聯(lián)合射頻消融治療者歸入對(duì)照組，化療、射頻之外再聯(lián)合DC-CIK治療者歸入觀察組，比較兩組患者肝轉(zhuǎn)移灶切除率、治療效果以及治療前后T細(xì)胞亞群變化情況、生存率及生活質(zhì)量。結(jié)果：治療后觀察組肝轉(zhuǎn)移灶切除率24.66%高于對(duì)照組的10.67%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組客觀控制率（ORR）64.38%高于對(duì)照組的29.33%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療前T細(xì)胞亞群各指標(biāo)組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后觀察組CD4*與CD4*/CD8*均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后CD8*組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療前兩組腫瘤標(biāo)志物水平組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后觀察組CEA及CA125水平較對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組1年生存率、2年生存率及3年生存率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組情感功能、生理功能、社會(huì)生活與日常生活評(píng)分均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：常規(guī)治療基礎(chǔ)上聯(lián)合DC-CIK治療可提高結(jié)直腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移患者免疫功能及肝轉(zhuǎn)移灶切除率，改善生存率及生活質(zhì)量。

[關(guān)鍵詞]結(jié)直腸癌;肝轉(zhuǎn)移;樹(shù)突狀細(xì)胞;細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞;化療

中圖分類號(hào)：R735.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：2095-5200（2019）02-057-05

DOI：10.11876/mimt201902015

結(jié)直腸癌是常見(jiàn)的胃腸道惡性腫瘤，其病死率與發(fā)病率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤居于第四位川。該病早期癥狀不明顯，發(fā)病時(shí)多進(jìn)展至中晚期。結(jié)直腸癌根治術(shù)目前是治療結(jié)直腸癌的首選方式，術(shù)后5年生存率通常在40%以上，早期患者可達(dá)到90%～95%日。但根治術(shù)后肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生率高達(dá)20%～50%，是影響預(yù)后的重要原因間。結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者預(yù)后極差，采用伊利替康等新一代化學(xué)藥物治療的中位生存期為21個(gè)月，而未經(jīng)治療者中位生存期僅為6.9個(gè)月4。放化療及外科手術(shù)治療無(wú)法徹底解決癌細(xì)胞擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移的問(wèn)題，放化療的毒副作用甚至可能加速病情進(jìn)展。DC-CIK是一種腫瘤生物治療手段，利用同源樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）與殺傷細(xì)胞（CIK）殺傷腫瘤細(xì)胞，改善免疫功能，以達(dá)到改善預(yù)后的目的6。為探討DC-CIK的應(yīng)用效果，本次研究分析了73例采用DC-CIK治療的結(jié)直腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移患者臨床資料，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

將我院2012年8月至2015年8月治療的結(jié)直腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移患者納人研究。入組標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～79歲;結(jié)直腸癌根治術(shù)后;符合《結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移診斷和綜合治療指南（2016版）》[7]中診斷標(biāo)準(zhǔn);治療前簽署知情同意書(shū);人組前3個(gè)月內(nèi)未進(jìn)行抗腫瘤治療;Karnofsky評(píng)分≥70分;接受2個(gè)以上治療療程。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他部位轉(zhuǎn)移;合并腹水;合并重要臟器器質(zhì)性病變。按治療方案分組，全身化療聯(lián)合射頻消融治療者歸人對(duì)照組，化療、射頻之外再聯(lián)合DC-CIK治療者歸人觀察組。兩組患者一般資料見(jiàn)表1，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2治療方案

所有患者首先進(jìn)行肝轉(zhuǎn)移灶射頻消融，經(jīng)B超定位后，采用美國(guó)RITA多極射頻針消融。初始化療方案為FOLFOX6：給予奧沙利鉑+亞葉酸鈣+5-氟尿嘧啶聯(lián)合化療，按體表面積給藥，第1d奧沙利鉑85mg/m2靜脈滴注2～3h，5-氟尿嘧啶400mg/m2靜脈滴注2h，亞葉酸鈣400mg/m2靜脈滴注2h，后續(xù)奧沙利鉑與亞葉酸鈣用量不變，5-氟尿嘧啶每天按1200mg/m2給藥，采用微量泵持續(xù)泵入，均重復(fù)用藥2周。2周為1個(gè)療程。每個(gè)療程結(jié)束2周后判斷是否進(jìn)行手術(shù)，是否調(diào)整化療方案。效果欠佳者可更換為FOLFIRI（初始方案奧沙利鉑替換為伊利替康）與FOLFOXIRI（初始方案基礎(chǔ)上增加伊利替康）治療。觀察組在此基礎(chǔ)上采用DC-CIK治療，化療當(dāng)天抽取50mL靜脈血，離心提取單個(gè)核細(xì)胞并置于GT-T551培養(yǎng)基中培養(yǎng)，然后將貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞誘導(dǎo)分化為DC細(xì)胞與CIK細(xì)胞，將DC細(xì)胞致敏后與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)形成成熟DC-CIK細(xì)胞，將制備好的DC-CIK細(xì)胞加人100mL2%白蛋白生理鹽水回輸。1個(gè)療程結(jié)束后第7d時(shí)進(jìn)行1次DC-CIK治療，連續(xù)3d將總數(shù)超過(guò)1x100個(gè)的DC-CIK細(xì)胞經(jīng)靜脈回輸體內(nèi)，每天輸注細(xì)胞數(shù)不少于3x10°個(gè)。通常治療2～3個(gè)療程。

1.3觀察指標(biāo)

治療效果：按照《實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)1.1版》8]進(jìn)行評(píng)價(jià)，分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、進(jìn)展（PD）與穩(wěn)定（SD）。病灶消失為CR，病灶直徑，總和縮小≥30%為PR，病灶直徑總和增幅≥20%為PD，其余情況為SD?？陀^控制率（ORR）=（CR+PR）/總例數(shù)x100.00%。

T細(xì)胞亞群：檢測(cè)治療前及末次治療結(jié)束2周后外周血CD4*與CD8*表達(dá)水平，以及CD4/CD8*比值，均采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。

腫瘤標(biāo)志物：檢測(cè)治療前及末次治療結(jié)束2周后檢測(cè)患者血清CA125及CEA表達(dá)水平，采用Elecsys1010全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)。

生存情況：治療結(jié)束后每3個(gè)月隨訪1次，以治療開(kāi)始當(dāng)日為起點(diǎn)，統(tǒng)計(jì)兩組患者生存率。生活質(zhì)量采用KPS評(píng)分量表評(píng)定，在末次治療結(jié)束2周后進(jìn)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS18.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，并采用x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（x士s）表示，并采用t檢驗(yàn)，采用Log-Rank檢驗(yàn)比較兩組患者生存情況，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患者治療效果比較

治療后觀察組18例（24.66%）患者切除肝轉(zhuǎn)移灶，對(duì)照組8例（10.67%）患者切除，切除率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=5.000，P<0.05）。觀察組ORR率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.2兩組患者T細(xì)胞亞群比較

治療前T細(xì)胞亞群各指標(biāo)組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后觀察組CD4*與CD4*/CD8*均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后CD8*組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表3。

2.3兩組腫瘤標(biāo)志物水平比較

治療前腫瘤標(biāo)志物水平組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后觀察組CEA及CA125水平較對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表4。

2.4兩組患者生存率比較

觀察組1年生存率、2年生存率及3年生存率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表4。

2.5兩組患者生存質(zhì)量比較

觀察組情感功能、生理功能、社會(huì)生活與日常生活評(píng)分均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表5。

3討論

DC-CIK治療是一種較為成熟的生物療法，通過(guò)回輸自體免疫細(xì)胞提高機(jī)體免疫功能，以促進(jìn)癌細(xì)胞的清除。DC細(xì)胞是啟動(dòng)細(xì)胞免疫應(yīng)答的關(guān)鍵因素，通過(guò)MHCI類及II類分子捕獲外源性抗原并提呈給細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞或輔助性T淋巴細(xì)胞9。CIK細(xì)胞包括細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞、自然殺傷T淋巴細(xì)胞及輔助性T淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞類型，其中起到主要抗腫瘤效應(yīng)的細(xì)胞是CD3*CD56*T淋巴細(xì)胞[10]。CD3*CD56*T淋巴細(xì)胞兼具T細(xì)胞的細(xì)胞毒性與自然殺傷細(xì)胞的非MHC限制性，而癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移、增殖的主要原因正是缺乏非MHC性細(xì)胞介導(dǎo)主動(dòng)免疫川。因此，DC細(xì)胞與CIK細(xì)胞混合培養(yǎng)能夠有效提升抗腫瘤活性[12]。同時(shí)，DC-CIK細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)可存續(xù)14d以上，且具有擴(kuò)增能力強(qiáng)、獲取方便等特點(diǎn)，適合臨床抗腫瘤治療[13]。改善免疫功能是DC-CIK治療抗腫瘤的關(guān)鍵，且化療對(duì)細(xì)胞免疫有抑制作用，可導(dǎo)致CD4*與CD4*/CD8*下降14。本次研究發(fā)現(xiàn)治療后觀察組CD4*與CD4*/CD8*均高于對(duì)照組，表明DC-CIK治療可有效恢復(fù)機(jī)體免疫活性。這有利于提高DC功能，指導(dǎo)CIK細(xì)胞殺滅癌細(xì)胞。

近年來(lái)DC-CIK治療在乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、胃癌等多種實(shí)體腫瘤以及白血病中均有應(yīng)用，在結(jié)直腸癌的姑息治療及術(shù)后的輔助治療中也有較好效果[5-1。本次研究發(fā)現(xiàn)，治療后觀察組肝轉(zhuǎn)移灶切除率高于對(duì)照組及ORR率高于對(duì)照組，表明DC-CIK治療可有效縮小結(jié)直腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移患者病灶，提高肝轉(zhuǎn)移灶切除率。目前認(rèn)為DC-CIK治療在腫瘤負(fù)荷較低時(shí)療效較好，因此本次研究在DC-CIK治療前采用化療及射頻消融等常規(guī)治療治療降低腫瘤負(fù)荷17。同時(shí)，常規(guī)治療與DC-CIK治療還可發(fā)揮協(xié)同作用[18]：DC-CIK療法通過(guò)提高免疫功能殺滅常規(guī)治療后殘留的腫瘤細(xì)胞，而常規(guī)治療中的化療藥物對(duì)部分免疫抑制細(xì)胞數(shù)量有選擇性清除作用，共同作用下可進(jìn)一步提升免疫功能、減少腫瘤細(xì)胞。但需要注意的是，化療藥物對(duì)DC-CIK細(xì)胞也有殺傷作用，因此化療與DC-CIK治療應(yīng)保持適當(dāng)時(shí)間間隔[19。本次研究對(duì)兩組患者生存情況進(jìn)行觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)觀察組生活質(zhì)量與生存率均優(yōu)于對(duì)照組，表明DC-CIK治療可有效改善結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者生存情況，這主要與免疫功能改善后腫瘤進(jìn)展得到控制有關(guān)。

綜上所述，常規(guī)治療基礎(chǔ)上聯(lián)合DC-CIK治療可提高結(jié)直腸癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移患者免疫功能及肝轉(zhuǎn)移灶切除率，改善生存率與生活質(zhì)量，療效優(yōu)于常規(guī)治療。

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