三顆針不同炮制、提取方法對糖尿病小鼠血糖、血脂的影響研究

李 香，汪 巍，鄧 瑩，魏學(xué)軍，孫曉惠，許義紅

黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，都勻 558003

三顆針BerberidisRadix為小檗科植物小黃連刺BerberiswihonaeHemsl.，擬豪豬刺BarberissoulieanaSchneid.，細(xì)葉小檗BerberispoiretiiSchneid.或匙葉小檗BerberisvernaeSchneid.等同屬數(shù)種植物的干燥根，主含鹽酸小檗堿、小檗胺、掌葉防己堿和藥根堿等多種生物堿[1]。具有較好的清熱燥濕，瀉火解毒之功效。由于資源豐富，療效顯著，采集方便，民間常用來代替黃柏、黃連藥用,在貴州苗族聚集區(qū)被廣泛用于解毒、殺菌、鎮(zhèn)痛、降血糖等[1]，民間亦有老中醫(yī)將其酒制、醋制[2]后使用。三顆針中生物堿提取方法有煎煮、回流、超聲、回流超聲等方法，三顆針主含鹽酸小檗堿成分，主要用于降血壓、降血糖、降血脂等[1]。不同炮制、提取方法對其降血糖作用的影響就筆者查閱文獻(xiàn)未見相關(guān)報道，本實(shí)驗(yàn)通過對三顆針不同炮制、提取方法降血壓、降血脂作用進(jìn)行比較研究，為三顆針的進(jìn)一步研究與開發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

健康KM小鼠，SPF級，雄性小鼠，體重18～22 g，由長沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供，許可證號：SCXK(湘)2014-0011。小鼠飼養(yǎng)于空調(diào)房內(nèi)，喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，實(shí)驗(yàn)前3天為適應(yīng)期，期間自由攝食與飲水。

1.2 藥品與試劑

三顆針購自北京同仁堂藥房，產(chǎn)地河南(批號：170512，生產(chǎn)日期：20170518)，經(jīng)測定為合格藥材。鹽酸二甲雙胍片，石家莊市華新藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號：20140023。鹽酸腎上腺素注射液，吉林省華牧動物保健品有限公司，批號：2014070011221。鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)，美國Sigma公司，批號：WXBC2544V。四氧嘧啶(Alloxan)，美國Sigma公司，批號：BCBT8817。葡萄糖，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號：20121203。檸檬酸、檸檬酸鈉，重慶江川化工集團(tuán)有限公司，批號：20151230?？偰懝檀?TC)試劑盒、甘油三酯(TG)試劑盒，批號：20181120。低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDLC)試劑盒，批號：20181114。所有試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。甲醇，乙醇，鹽酸均為分析純，娃哈哈飲用水。

1.3 主要儀器

MR-96A酶標(biāo)儀，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；SG-4050C型數(shù)顯恒溫水浴鍋，上海碩光公司；循環(huán)水真空泵，上海予英儀器有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；血糖儀，三諾生物傳感股份有限公司；血糖試紙，三諾生物傳感股份有限公司；DHG-9240A真空干燥箱，上海金山公司；電子天平，瑞士METTLER；OR型低速離心機(jī)，德國HERAEUS。

2 方法

2.1 各炮制品的制備

生品：取凈制三顆針?biāo)幉?，切片，干燥，備用?/p>

酒制品：取凈制藥材800 g，按《中國藥典》2015版附錄炮制通則“酒制”項(xiàng)要求。加黃酒20%(160 g)拌勻，悶潤6 h，待酒浸透后取出，置烘箱中，160 ℃烘干，取出，放涼備用。同法制備3份。

醋制品：取凈制藥材800 g，按《中國藥典》2015版附錄炮制通則“醋制”項(xiàng)要求。加米醋20%(160 g)拌勻，悶潤6 h，待米醋浸透后取出，余同酒制品制備。

2.2 各炮制品不同提取物的制備[3-6]

2.2.1 煎煮法

取生品、酒制品、醋制品粉碎過150目篩，各制品各3份，約120 g，分別置燒杯中，加入10倍量的蒸餾水煎煮2 h，抽濾，濾渣加入8倍量的蒸餾水煎煮1 h，抽濾，合并兩次濾液濃縮減壓干燥成浸膏，分別得生品、酒制品、醋制品水煎液組。生品水煎液組平均得膏率(4.92%)，酒制品水煎液組平均得膏率(5.31%)，醋制品水煎液組平均得膏率(6.05%)。

2.2.2 回流法

取生品、酒制品、醋制品粉碎過150目篩，各制品各3份，約120 g，分別置圓底燒瓶中，加入10倍量鹽酸甲醇(1∶100)水浴回流2 h，抽濾，濾渣加入8倍量的鹽酸甲醇(1∶100)水浴回流1 h，余同“2.2.1”項(xiàng)，生品回流組平均得膏率(1.11%)，酒制品回流組平均得膏率(1.87%)，醋制品回流組平均得膏率(2.46%)。

2.2.3 超聲法

取生品、酒制品、醋制品粉碎過150目篩，各制品各3份，約120 g，分別置具塞錐形瓶中，加入10倍量鹽酸甲醇(1∶100)，稱重后浸泡12 h，超聲提取1 h，稱重，用鹽酸甲醇(1∶100)補(bǔ)足重量，余同“2.2.1”項(xiàng)，生品超聲組平均得膏率(1.92%)，酒制品超聲組平均得膏率(2.19%)，醋制品超聲組平均得膏率(2.65%)。

2.2.4 回流超聲法

取生品、酒制品、醋制品粉碎過150目篩，各制品各3份，約120 g，分別置三角瓶中，加入10倍量鹽酸甲醇(1∶100)60 ℃水浴回流1 h，超聲1.5 h，余同“2.2.1”項(xiàng)，生品回流超聲組平均得膏率(6.08%)，酒制品回流超聲組平均得膏率(6.26%)，醋制品回流超聲組平均得膏率(6.35%)。

2.3 對正常小鼠血糖的影響

將KM小鼠，隨機(jī)分成26組，每組6只，分別為正常對照組給予等容量的生理鹽水(20 mL/kg)；二甲雙胍組；各制品水煎液組；各制品回流組；各制品超聲組；各制品回流超聲組的高中劑量組。根據(jù)該藥生藥量及預(yù)實(shí)驗(yàn)按照表1中劑量灌胃給藥，每天灌胃1次，連續(xù)灌胃28天，于末次給藥1 h后(禁食不禁水8 h)，小鼠尾靜脈采血，采用血糖儀測定小鼠空腹血糖值。

2.4 對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響[7,8]

小鼠禁食不禁水24 h后，尾靜脈注射新配制的四氧嘧啶(70 mL/kg)，同時給予高糖高脂飼料，72 h后(禁食不禁水8 h)，小鼠尾靜脈采血，血糖儀測定小鼠血糖值，選取血糖值大于9.0 mmol/L，小于30 mmol/L的小鼠作為糖尿病模型。將造模成功的糖尿病小鼠隨機(jī)分成26組，每組6只，另隨機(jī)取6只正常小鼠作正常對照組，鹽酸二甲雙胍組及各炮制品不同提取物組的高中劑量組按照設(shè)計(jì)劑量灌胃給藥。模型組和正常對照組給予等容量的生理鹽水(20 mL/kg)，每天灌胃1次，連續(xù)灌胃28天，于末次給藥1 h后(禁食不禁水8 h)，小鼠尾靜脈采血，采用血糖儀測定小鼠空腹血糖值。

2.5 對鏈脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影響[9,10]

取小鼠禁食不禁水12 h后，腹腔注射新配制的鏈脲佐菌素溶液(150 mg/kg)，同時給予高血糖飼料，72 h后(禁食不禁水8 h)，小鼠尾靜脈采血，測定小鼠血糖值，選取血糖值≥9.0 mmol/L的小鼠作為糖尿病模型，納入實(shí)驗(yàn)。分組及給藥測定方法同“2.4”項(xiàng)。

2.6 對高濃度葡萄糖致小鼠急性高血糖的影響[9,10]

將KM小鼠，隨機(jī)分成27組，給藥及測定方法同“2.3”項(xiàng)。除正常對照組給予等量生理鹽水外，其余各組小鼠均需灌胃2 g/kg葡萄糖溶液，復(fù)制小鼠高血糖模型，分別在灌胃葡萄糖前0 h，灌胃葡萄糖后0.5 、1 、2 h，小鼠尾靜脈采血，采用血糖儀測定血糖值。

2.7 對鹽酸腎上腺素致小鼠高血糖的影響[10-12]

小鼠的分組與給藥同“2.6”項(xiàng)操作，于末次給藥后1 h(禁食不禁水8 h)，除正常對照組給予等量生理鹽水外，其余各組小鼠均需腹腔注射0.5 mg/kg鹽酸腎上腺素注射液，復(fù)制小鼠急性高血糖模型，分別在腹腔注射鹽酸腎上腺素前0 h與注射后0.5 h。小鼠尾靜脈采血，采用血糖儀測定血糖值。

2.8 對血脂的影響[13-15]

將“2.4”項(xiàng)下四氧嘧啶致糖尿病小鼠尾靜脈采血測定血糖值后，眼眶靜脈叢取血至潔凈EP管，血樣轉(zhuǎn)速以3 000 rpm，離心20 min，用移液槍取血清至潔凈EP管，得血清樣本，嚴(yán)格按照試劑盒要求對血清的甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白進(jìn)行測定。

2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 對正常小鼠血糖的影響

結(jié)果見表1，同正常對照組比較，三顆針不同制品、提取方法的各劑量給藥組對正常小鼠空腹血糖值均無明顯影響(P>0.05)。

3.2 對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響

結(jié)果見表2，與正常對照組比較，各小組血糖值極顯著升高(P<0.01)。給藥28天后，與模型對照組比較，三顆針生品、酒制品、醋制品水煎液組高劑量組，生品回流組高劑量組，酒制品、醋制品回流組，生品、酒制品、醋制品超聲組高劑量組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組均能顯著降低四氧嘧啶引起的血糖升高(P<0.05或P<0.01)。

表1 對正常小鼠血糖的影響

注：與正常對照組比較，△P<0.05。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05.

表2 對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響

續(xù)表2(Continued Tab.2)

組別Group劑量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)給藥前Before dose給藥后After dose 1.216.78±3.47△△15.49±3.10△△醋制品水煎液組Decoction group of vinegar products2.416.77±2.68△△14.67±2.33△△*1.217.99±2.51△△15.10±2.35△△生品回流組Reflux group of raw products2.418.22±3.59△△14.70±2.46△△*1.217.83±3.12△△15.70±1.86△△酒制品回流組Reflux group of wine products2.418.19±2.18△△14.52±1.48△△*1.217.85±2.59△△14.45±2.94△△*醋制品回流組Reflux group of vinegar products2.417.74±3.21△△14.69±3.35△△*1.218.08±2.58△△14.72±2.02△△*生品超聲組Ultrasound group of raw products2.417.17±2.53△△14.69±2.58△△*1.217.04±3.51△△14.98±3.30△△酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.417.69±2.62△△14.57±2.85△△*1.217.86±2.57△△15.10±2.70△△醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.418.07±3.51△△14.59±3.00△△*1.218.26±3.49△△14.87±2.28△△生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.417.30±2.67△△14.02±1.68△△**1.217.06±2.53△△14.15±2.66△△*酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of wine products2.417.31±3.45△△13.78±2.44△△**1.218.13±3.73△△13.75±2.35△△**醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vinegar products2.417.30±2.02△△13.33±1.55△△**1.217.37±2.29△△13.64±2.11△△**

注：與正常對照組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.3 對鏈脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影響

結(jié)果如表3所示，與正常對照組比較，各組給予鏈脲佐菌素造模后，各組小鼠血糖均極顯著升高(P<0.01)。給藥28天后，與模型對照組比較，三顆針醋制品水煎液組高劑量組，酒制品回流組高劑量組，醋制品回流組，生品、酒制品、醋制品的超聲組與回流超聲組的小鼠血糖顯著降低(P<0.05或P<0.01)。

表3 對鏈脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影響

續(xù)表3(Continued Tab.3)

組別Group劑量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)給藥前Before dose給藥后After dose 醋制品水煎液組Decoction group of vinegar products2.414.09±2.83△△13.10±1.73△△1.213.78±3.73△△13.08±2.89△△生品回流組Reflux group of raw products2.414.51±2.74△△12.77±1.86△△*1.213.84±2.70△△13.06±2.44△△酒制品回流組Reflux group of wine products2.412.88±3.05△△12.15±2.23△△**1.213.09±2.75△△12.43±1.99△△*生品超聲組Ultrasound group of raw products2.412.93±2.96△△12.56±2.34△△*1.212.63±2.86△△12.26±2.60△△*酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.412.47±2.47△△12.07±2.15△△**1.212.85±2.15△△12.20±1.76△△**醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.413.13±2.11△△12.05±1.99△△**1.212.72±2.79△△11.89±2.66△△**生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.413.31±2.85△△11.87±2.02△△**1.212.48±2.90△△11.57±2.59△△**酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of wine products2.412.35±2.67△△10.71±2.14△△**1.213.40±2.41△△11.05±1.55△△**醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vinegar products2.413.12±3.01△△9.98±1.60△△**1.213.61±3.16△△10.67±2.48△△**

注：與正常對照組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.4 對葡萄糖致小鼠高血糖的影響

結(jié)果如表4所示，連續(xù)灌胃28天后，與正常對照組比較，模型組小鼠灌胃高濃度葡萄糖后血糖值逐漸升高，0.5 h時模型組血糖達(dá)最高值，其余各組小鼠血糖值極顯著升高(P<0.01)。與模型對照組比較，灌胃葡萄糖后0.5 h，三顆針醋制品回流組高劑量組，醋制品超聲組中劑量組，生品回流超聲組高劑量組，酒制品、醋制品回流超聲組對高濃度致小鼠高血糖顯著降低(P<0.05或P<0.01)。1 h后，三顆針生品、酒制品、醋制品水煎液組高劑量組，酒制品、醋制品回流組，酒制品超聲組中劑量，醋制品超聲組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組有顯著降血糖作用(P<0.05或P<0.01)。2 h后，酒制品、醋制品回流超聲組高劑量組有顯著降血糖作用(P<0.05)。

表4 對葡萄糖致小鼠高血糖的影響

續(xù)表4(Continued Tab.4)

組別Group劑量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)0 h 0.5 h 1 h 2 h 1.23.71±0.9413.79±2.32△△13.48±2.22△△12.84±2.45△△生品回流組Reflux group of raw products2.44.14±0.9813.81±1.95△△13.29±1.94△△12.36±2.27△△1.23.51±0.8413.99±2.55△△13.57±2.59△△12.80±2.06△△酒制品回流組Reflux group of wine products2.43.34±0.9813.37±1.61△△12.95±1.65△△*12.07±1.56△△1.23.89±1.1713.51±1.30△△12.57±2.28△△*12.43±1.98△△醋制品回流組Reflux group of vinegar products2.43.49±0.7513.14±2.39△△*12.85±1.53△△*11.99±1.63△△1.24.10±0.9813.31±2.23△△13.08±2.37△△*12.32±1.98△△生品超聲組Ultrasound group of raw products2.43.62±1.1213.89±2.39△△13.37±2.03△△13.59±1.77△△1.24.09±1.1113.91±2.38△△13.65±2.04△△13.03±1.67△△酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.44.05±0.7913.44±2.86△△13.10±2.47△△12.49±2.04△△1.23.62±1.1213.53±2.10△△12.92±2.40△△*12.14±1.83△△醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.43.97±0.8413.25±2.74△△12.43±2.86△△**11.76±2.57△△1.24.08±0.9413.20±2.29△△*12.68±2.52△△*11.58±2.37△△生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.44.27±0.6913.06±3.02△△*12.81±3.04△△*11.83±2.25△△1.23.84±0.7513.43±2.26△△12.57±2.44△△*12.17±2.38△△酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.43.51±0.8512.75±3.03△△*12.73±1.82△△*10.97±1.57△△*1.23.71±0.9013.17±2.98△△*12.31±2.14△△**11.49±2.54△△醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vinegar products2.44.02±0.9812.20±2.74△△**11.96±2.27△△**10.76±1.65△△*1.23.91±0.8312.44±3.12△△**12.46±1.68△△**11.34±1.84△△

注：與正常對照組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.5 對鹽酸腎上腺素致小鼠高血糖的影響

結(jié)果如表5所示，連續(xù)灌胃28天后，與正常對照組比較，腹腔注射鹽酸腎上腺素0.5 h后各組小鼠血糖值極顯著升高(P<0.01)。與模型對照組比較，酒制品、醋制品回流組高劑量組，醋制品超聲高劑量組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組高劑量組小鼠血糖顯著降低(P<0.05或P<0.01)。

表5 對鹽酸腎上腺素致小鼠高血糖的影響

續(xù)表5(Continued Tab.5)

組別Group劑量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)0 h0.5 h 酒制品回流組Reflux group of wine products2.44.52±1.0412.38±1.82△△*1.24.02±1.4112.93±2.47△△醋制品回流組Reflux group of vinegar products2.43.91±1.1311.64±2.07△△**1.23.84±0.9612.69±2.61△△生品超聲組Ultrasound group of raw products2.44.59±0.8413.43±2.39△△1.23.99±0.9414.02±2.07△△酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.45.01±1.1312.86±1.83△△1.23.91±1.1913.65±2.05△△醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.43.94±1.1912.16±2.94△△*1.23.89±0.9813.10±3.14△△生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.44.32±0.9712.01±2.21△△*1.23.90±0.7312.94±2.22△△酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of wine products2.43.98±0.9711.27±1.85△△**1.24.00±0.9212.83±2.83△△醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vine-gar products2.44.02±0.9610.64±1.72△△**1.25.05±1.0612.47±2.05△△

注：與正常對照組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.6 對血脂的影響

由表6可見，由四氧嘧啶建立的高血糖，模型對照組小鼠血清TC、TG、LDLC含量顯著高于正常對照組(P<0.01)。各制品各提取方法的TC值均顯著低于模型對照組(P<0.05或P<0.01)。酒制品、醋制品水煎液組、酒制品與醋制品回流組、生品、酒制品超聲組高劑量組，醋制品超聲組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組的TG值均顯著低于模型對照組(P<0.05或P<0.01)。醋制品水煎液組、生品、酒制品回流組高劑量組、醋制品回流組、醋制品超聲組、生品回流超聲組高劑量組，酒制品、醋制品回流超聲組LDLC值均顯著低于模型對照組(P<0.05或P<0.01)。模型組小鼠血清HDLC值顯著低于正常對照組(P<0.01)。酒制品、醋制品回流組，生品、酒制品超聲組高劑量組、醋制品超聲組、生品、酒制品、醋制品回流超聲組HDLC顯著高于模型對照組(P<0.05或P<0.01)。

組別Group劑量Dose(g/kg)TC (mmol/L) TG (mmol/L) HDLC (mmol/L) LDLC (mmol/L) 正常對照組Normal control group-4.17±0.78**1.46±0.38**2.81±0.83**1.90±0.72**模型對照組Model group-6.58±1.033.22±0.661.71±0.543.49±1.05二甲雙胍組Metformin group0.44.34±0.57**2.04±0.50**2.70±0.57**2.04±0.77**生品水煎液組Decoction group of raw products2.45.35±0.66**2.91±0.442.08±0.562.85±1.131.26.08±0.902.84±0.741.84±0.712.96±1.08酒制品水煎液組Decoction group of alcoholic products2.45.12±0.52**2.72±0.34*2.18±0.432.76±1.071.25.96±0.692.93±0.452.03±0.462.69±1.21醋制品水煎液組Decoction group of vinegar products2.45.09±0.88**2.75±0.57*2.13±0.422.43±1.17*1.25.96±0.892.81±0.482.09±0.642.60±0.91

續(xù)表6(Continued Tab.6)

組別Group劑量Dose(g/kg)TC (mmol/L) TG (mmol/L) HDLC (mmol/L) LDLC (mmol/L) 生品回流組Reflux group of raw products2.45.13±1.28**2.79±0.542.21±0.622.49±1.11*1.25.40±0.66**2.84±0.412.11±0.542.70±1.33酒制品回流組Reflux group of wine products2.44.97±0.75**2.64±0.41*2.41±0.48*2.49±1.21*1.25.26±0.64**2.76±0.332.27±0.50*2.67±1.02醋制品回流組Reflux group of vinegar products2.45.03±0.80**2.53±0.71**2.44±0.67**2.38±1.12*1.25.12±0.60**2.60±0.37**2.30±0.42*2.54±1.00*生品超聲組Ultrasound group of raw products2.45.21±0.59**2.72±0.64*2.29±0.58*2.55±1.011.25.32±0.46**2.81±0.712.12±0.562.67±1.07酒制品超聲組Ultrasound group of wine products2.45.04±0.72**2.60±0.59**2.33±0.64*2.60±1.201.25.25±0.57**2.78±0.452.21±0.812.67±1.21醋制品超聲組Ultrasound group of vinegar products2.45.09±1.04**2.54±0.48**2.36±0.65*2.46±1.17*1.25.13±0.87**2.70±0.46*2.26±0.77*2.61±1.03生品回流超聲組Reflux-ultrasound group of raw products2.44.97±0.85**2.59±0.52**2.41±0.69*2.37±1.17*1.25.25±0.81**2.71±0.52*2.31±0.46*2.60±0.95酒制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of wine products2.44.67±0.98**2.45±0.37**2.51±0.66*2.31±1.04*1.25.03±0.54**2.55±0.51**2.40±0.62*2.45±0.93*醋制品回流超聲組Reflux-ultrasound group of vinegar products2.44.44±0.80**2.26±0.54**2.62±0.74**2.20±0.99**1.24.86±0.68** 2.41±0.53**2.47±0.57**2.34±1.08*

注：與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

Note:Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

4 結(jié)論

糖尿病已成為危害人類健康的疾病之一，四氧嘧啶、鏈脲佐菌素可影響胰島素分泌，導(dǎo)致高血糖，本實(shí)驗(yàn)選取兩者建立糖尿病動物模型造模用藥。腎上腺素通過受體激動作用，使血糖升高造成急性高血糖。為深入研究三顆針降血糖、血脂活性，本實(shí)驗(yàn)采取三顆針常用炮制方法與生物堿常用提取方法，比較不同炮制、提取方法對血糖血脂的影響。本實(shí)驗(yàn)研究表明三顆針不同炮制、提取方法具備一定降血糖和調(diào)節(jié)血脂代謝作用，且不同炮制提取方法存在一定差異。

對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響，各制品的回流超聲組與生品水煎液組中劑量組比較存在顯著差異(P<0.05)。

對鏈脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影響，醋制品超聲組中劑量組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組與生品水煎液組存在顯著差異(P<0.05)；酒制品、醋制品回流超聲組與酒制品水煎液組高劑量組存在顯著差異(P<0.05)；酒制品回流超聲組高劑量組，醋制品回流超聲組與醋制品水煎液高劑量組存在明顯差異(P<0.05)；醋制品超聲組中劑量組，生品、酒制品、醋制品回流超聲組與醋制品水煎液組中劑量組存在明顯差異(P<0.05)；醋制品回流超聲組高劑量組與醋制品回流組、生品超聲組、酒制品超聲組、醋制品超聲組高劑量組存在明顯差異(P<0.05)。

給予高濃度葡萄糖2 h后酒制品、醋制品回流超聲組高劑量組與生品、酒制品水煎液組；酒制品、醋制品回流超聲組高劑量組與生品超聲組存在顯著差異(P<0.05)。

腹腔注射鹽酸腎上腺素0.5 h后，醋制回流超聲組高劑量組與生品、酒制品各提取方法高劑量組存在顯著差異(P<0.05)。

醋制品回流超聲組高劑量組與生品水煎液組、超聲組血清中TC值存在顯著差異；醋制品回流超聲組高劑量組與生品、酒制品水煎液組、生品回流、超聲組TG值存在顯著差異(P<0.05)；醋制品回流超聲組高劑量組與生品水煎液組HDLC存在顯著差異(P<0.05)。

本課題開展不同提取方法與炮制方法對三顆針降血糖、降血脂的影響研究，同一種提取方法，炮制后比炮制前降血糖、血脂效果好，表明炮制后達(dá)到增效目的，符合中藥炮制目的。同一種制品采用回流超聲提取法的降血糖效果優(yōu)于其他提取方法，推測可能回流與超聲結(jié)合提取，更利于活性成分溶出。不同炮制與提取方法對活性成分如小檗堿含量的影響是下一步研究方向。本文為三顆針資源合理利用，為三顆針炮制加工研究提供一定依據(jù)。