茶尺蠖和灰茶尺蠖幼蟲(chóng)及成蟲(chóng)的鑒別方法

唐美君 王志博 郭華偉 殷坤山 肖強(qiáng)

摘要 茶尺蠖Ectropis obliqua和灰茶尺蠖Ectropis grisescens是茶園主要害蟲(chóng)，兩者為近緣種，外形十分相似，難以區(qū)分。為了便于茶葉技術(shù)人員識(shí)別這兩種尺蠖，本研究通過(guò)飼養(yǎng)觀察，比較了這兩種尺蠖幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)的形態(tài)差異，提出了一種鑒別方法，即通過(guò)幼蟲(chóng)第2腹節(jié)背面八字形黑色斑紋的形態(tài)及該節(jié)上2對(duì)小黑點(diǎn)的位置進(jìn)行幼蟲(chóng)鑒別，通過(guò)前后翅上外橫線的形態(tài)進(jìn)行成蟲(chóng)鑒別。采用分子鑒定對(duì)該方法進(jìn)行了驗(yàn)證，結(jié)果表明該方法判別準(zhǔn)確，且易于掌握，能準(zhǔn)確區(qū)分茶尺蠖和灰茶尺蠖。本研究結(jié)果對(duì)這兩種尺蠖的正確識(shí)別和田間防治十分有益。

關(guān)鍵詞 茶尺蠖; 灰茶尺蠖; 鑒別方法

中圖分類號(hào)： S 435.711

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A

DOI： 10.16688/j.zwbh.2018364

茶尺蠖Ectropis obliqua和灰茶尺蠖E.grisescens是茶樹(shù)害蟲(chóng)尺蠖類的兩個(gè)近緣種，常年發(fā)生嚴(yán)重，對(duì)茶葉產(chǎn)量影響很大。茶尺蠖主要分布于浙、蘇、皖茶區(qū)，灰茶尺蠖分布于全國(guó)各產(chǎn)茶省，有的省份兩種尺蠖同時(shí)存在[1]。兩種尺蠖在外部形態(tài)上極其相似，難以區(qū)分，過(guò)去很長(zhǎng)時(shí)間被混為一談，統(tǒng)稱為茶尺蠖。自2014年明確它們是兩個(gè)種之后[23]，研究者們針對(duì)這兩個(gè)種開(kāi)展了一系列的研究。結(jié)果表明，這兩種尺蠖不僅在生物學(xué)特性上存在差異[45]，在性信息素組成、成分[67]和對(duì)EoNPV的敏感性[8]上也存在較大差異。茶園中如采用病毒防治，兩種尺蠖的最佳防治蟲(chóng)齡和施用的病毒液濃度有所不同，對(duì)茶尺蠖為1～2齡幼蟲(chóng)期和4×104PIB/mL病毒液， 而對(duì)灰茶尺蠖則是卵～1齡幼蟲(chóng)期和4×105 PIB/mL病毒液[8]，如果防治時(shí)灰茶尺蠖的蟲(chóng)齡偏大、病毒液濃度偏低，效果會(huì)很差甚至無(wú)效。如采用性信息素防治，首先要明確蟲(chóng)種，否則可能誘不到蟲(chóng)。因此，對(duì)于這兩種尺蠖的田間防治，尤其是生物防治來(lái)說(shuō)，區(qū)分這兩個(gè)種格外重要。

過(guò)去，區(qū)分這兩種尺蠖的方法主要有形態(tài)觀察、生殖器解剖和分子檢測(cè)等[23]。形態(tài)上主要是依靠成蟲(chóng)形態(tài)觀察[2]，兩種尺蠖的幼蟲(chóng)難以區(qū)分，生殖器解剖和分子檢測(cè)需要一定的設(shè)備、技術(shù)和時(shí)間，一般技術(shù)人員難以辦到，這對(duì)識(shí)別尺蠖種類和指導(dǎo)生產(chǎn)防治十分不利。因此，如何簡(jiǎn)便快捷地鑒別這兩個(gè)種是目前尚未研究透徹且生產(chǎn)上亟需解決的一個(gè)實(shí)際問(wèn)題。本文通過(guò)對(duì)幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)的仔細(xì)觀察研究，找到了兩種尺蠖幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)外部形態(tài)的區(qū)分特征，同時(shí)也摸索出簡(jiǎn)易的觀察方法，易于掌握，并通過(guò)分子檢測(cè)對(duì)區(qū)分結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證，符合率達(dá)100%。本研究結(jié)果為茶樹(shù)植保工作者和基層技術(shù)人員識(shí)別兩種尺蠖和田間防治提供了依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)

茶尺蠖種群采于浙江余杭（119. 90°E，30.39°N），灰茶尺蠖種群采于江蘇儀征（119. 06°E，32.33°N）。在養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)用新鮮茶葉連續(xù)飼養(yǎng)，建立實(shí)驗(yàn)種群。飼養(yǎng)條件為溫度為（24±1）℃; 光周期為L(zhǎng)∥D=12 h∥12 h; 相對(duì)濕度為75%～80%。

1.2 形態(tài)觀察方法

成蟲(chóng)及4、5齡幼蟲(chóng)直接用肉眼觀察，1～3齡幼蟲(chóng)采用解剖鏡（體視顯微鏡）觀察，在沒(méi)有解剖鏡的情況下，可用軍用光電放大鏡（帶光源）觀察，也可用手機(jī)拍照、放大后觀察（如果尺蠖幼蟲(chóng)拱起，可用乙醇或熱水快速處理后再拍照觀察）。

1.3 分子鑒定及驗(yàn)證方法

分子鑒定參照姜楠等[2]的方法。檢測(cè)樣本與標(biāo)準(zhǔn)樣本遺傳距離在0～2.5%認(rèn)定物種為茶尺蠖;遺傳距離3.2%～4.0%認(rèn)定物種為灰茶尺蠖[2]。

隨機(jī)抽取1.1中兩種尺蠖的幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)各10頭，隨機(jī)編號(hào)后由一人用形態(tài)鑒別方法判定，后由另一人作分子檢測(cè)，最后判別形態(tài)鑒別方法和分子檢測(cè)結(jié)果是否相符。

2 結(jié)果與分析

2.1 茶尺蠖和灰茶尺蠖幼蟲(chóng)形態(tài)識(shí)別特征

兩種尺蠖幼蟲(chóng)的齡期為4～5齡[9]。各齡的形態(tài)特征為：1齡幼蟲(chóng)身體呈灰黑色，各體節(jié)均有白色斑點(diǎn);2齡幼蟲(chóng)開(kāi)始白色斑點(diǎn)逐漸消失，體色逐漸變淺;3齡起腹部背面各節(jié)前、后各有一對(duì)小黑點(diǎn)，第1腹節(jié)背面有一對(duì)較大的黑色圓斑，第2腹節(jié)背面出現(xiàn)八字形黑斑，第4腹節(jié)背面色略深，第6腹節(jié)背面有一對(duì)黑斑，第8腹節(jié)背面有一對(duì)三角形黑斑;4齡幼蟲(chóng)開(kāi)始，腹部第2～4節(jié)背面有菱形斑塊，以第2腹節(jié)背面的菱形斑塊最為明顯。

仔細(xì)觀察后發(fā)現(xiàn)，兩種尺蠖在1～2齡期沒(méi)有明顯的形態(tài)差異，不同之處出現(xiàn)在3齡以后，具體表現(xiàn)在第2腹節(jié)八字形黑斑的形態(tài)及其與該節(jié)2對(duì)小黑點(diǎn)的相對(duì)位置上。如3齡幼蟲(chóng)，茶尺蠖第2腹節(jié)背面的八字形黑斑較細(xì)長(zhǎng)，前面的一對(duì)黑點(diǎn)被八字形黑斑遮蓋或部分遮蓋，后面的一對(duì)黑點(diǎn)可看見(jiàn)（圖1a），而灰茶尺蠖第2腹節(jié)背面的八字形黑斑較粗短，該節(jié)前、后兩對(duì)黑點(diǎn)均可看見(jiàn)（圖1b）。又如4齡幼蟲(chóng)（幼蟲(chóng)期有5齡），茶尺蠖第2腹節(jié)背面八字形黑斑較細(xì)長(zhǎng)，上端幾乎延伸至背中部，該節(jié)前面的一對(duì)黑點(diǎn)被遮蓋或部分被遮蓋，后面一對(duì)黑點(diǎn)明顯（圖1c），而灰茶尺蠖第2腹節(jié)背面的八字形黑斑較粗短，前面一對(duì)黑點(diǎn)與八字形黑斑分開(kāi)，明顯可見(jiàn)，后面一對(duì)黑點(diǎn)也可見(jiàn)（圖1d）。再如幼蟲(chóng)期共4齡的4齡幼蟲(chóng)或幼蟲(chóng)期有5齡的5齡幼蟲(chóng)，茶尺蠖第2腹節(jié)背面八字形黑斑較細(xì)長(zhǎng)，上端幾乎延伸至背中部，該節(jié)的前面一對(duì)小黑點(diǎn)隱約可見(jiàn)，與八字形黑斑前端相連，后面一對(duì)小黑點(diǎn)明顯，總體看不到像灰茶尺蠖那樣的狗頭狀圖案（圖1e），而灰茶尺蠖第2腹節(jié)背面的八字形黑斑較茶尺蠖的粗短，幾乎在兩側(cè)，該節(jié)前面一對(duì)黑點(diǎn)與八字形黑斑明顯分開(kāi)?？梢钥吹矫黠@的狗頭狀圖案（八字形黑斑似耳朵，前面一對(duì)黑點(diǎn)明顯，似狗眼，中部長(zhǎng)三角形的暗斑似狗鼻） （圖1f）。

2.2 茶尺蠖和灰茶尺蠖成蟲(chóng)形態(tài)識(shí)別特征

鱗翅目成蟲(chóng)的翅面一般均有基線、內(nèi)橫線、中線、外橫線和亞外緣線5條橫線。兩種尺蠖成蟲(chóng)形態(tài)的不同之處主要表現(xiàn)在外橫線上（近外緣的第2條橫線，為深色橫紋）：茶尺蠖前翅的外橫線中部向后突出，突出處至前緣的一段紋較平直（圖2a），后翅的外橫線呈起伏較大的波狀紋（圖2b）;灰茶尺蠖前翅的外橫線總體呈圓弧形，無(wú)平直部分（圖2c）; 后翅的外橫線較平直，起伏?。▓D2d）。

2.3 茶尺蠖和灰茶尺蠖形態(tài)鑒別方法及其驗(yàn)證

根據(jù)上述觀察結(jié)果，茶尺蠖和灰茶尺蠖幼蟲(chóng)可通過(guò)第2腹節(jié)背面的八字紋形態(tài)及其與2對(duì)黑點(diǎn)的位置進(jìn)行幼蟲(chóng)鑒別：茶尺蠖第2腹節(jié)背面的八字形黑色斑紋較細(xì)長(zhǎng)，前面的一對(duì)黑點(diǎn)被八字形黑色斑紋遮蓋或部分遮蓋，后面的一對(duì)黑點(diǎn)清晰可見(jiàn);灰茶尺蠖第2腹節(jié)背面的八字形黑斑較粗短，該節(jié)前、后兩對(duì)黑點(diǎn)均清晰可見(jiàn)（圖3）。成蟲(chóng)可通過(guò)前后翅上外橫線的形態(tài)進(jìn)行成蟲(chóng)鑒別：茶尺蠖前翅外橫線中部向后突出，突出處至前緣的一段紋較平直，后翅的外橫線呈起伏較大的波狀紋;灰茶尺蠖前翅外橫線總體呈圓弧形，無(wú)平直部分;后翅的外橫線較平直，起伏?。▓D4）。

采用盲樣驗(yàn)證的方法，對(duì)上述鑒別方法的判斷結(jié)果進(jìn)行了分子檢測(cè)驗(yàn)證，結(jié)果顯示，兩種方法的判定結(jié)果符合率達(dá)100%（表1），說(shuō)明本研究提出的鑒別方法準(zhǔn)確率高，可用于實(shí)際生產(chǎn)指導(dǎo)害蟲(chóng)防治。該方法易學(xué)易會(huì)，尤其是幼蟲(chóng)鑒別方法基層技術(shù)人員也能很快掌握（圖5）。對(duì)于視力好的人可直接用肉眼分辨，也可借助手持放大鏡觀察，有條件的可在解剖鏡下更清晰地觀察。

3 結(jié)論與討論

茶尺蠖和灰茶尺蠖是茶園最主要的食葉類害蟲(chóng)，大部分產(chǎn)茶區(qū)均有不同程度的發(fā)生。目前，生產(chǎn)單位甚至科技人員迫切需要識(shí)別兩種尺蠖的方法，本文提出的鑒別方法簡(jiǎn)便易操作，實(shí)用性強(qiáng)，在幼蟲(chóng)期就可對(duì)兩種尺蠖進(jìn)行識(shí)別，有助于田間對(duì)茶尺蠖和灰茶尺蠖的精準(zhǔn)防治。

一直以來(lái)，分類學(xué)者認(rèn)為全蟲(chóng)態(tài)研究是鑒別蟲(chóng)種最可靠的方法[10]，本文在前人對(duì)茶尺蠖和灰茶尺蠖全蟲(chóng)態(tài)比較研究[2]的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步仔細(xì)比較了兩者外部形態(tài)上的差異，提出一種通過(guò)觀察幼蟲(chóng)第2腹節(jié)八字紋特征及該腹節(jié)前面一對(duì)黑點(diǎn)的有無(wú)，在幼蟲(chóng)期用肉眼即可區(qū)分這兩種尺蠖的方法，極大地方便了田間調(diào)查，也為基層單位確定這兩種尺蠖的種類提供了方法。前人對(duì)兩種尺蠖成蟲(chóng)的各種指標(biāo)進(jìn)行了比較和統(tǒng)計(jì)分析，也提出了兩個(gè)種之間的差別[2]，但這些差別通常為分類學(xué)者所熟知，對(duì)一般科研人員和基層技術(shù)人員來(lái)說(shuō)難以應(yīng)用，同時(shí)，對(duì)幼蟲(chóng)的區(qū)分局限于老熟幼蟲(chóng)，且區(qū)分特征較含糊，而本文提出的方法對(duì)3齡幼蟲(chóng)即可進(jìn)行區(qū)分，十分有益于基層單位技術(shù)人員在綠色防控中使用。

本文提出的鑒別方法對(duì)1～2齡幼蟲(chóng)尚無(wú)法從外部形態(tài)上進(jìn)行區(qū)分，但田間茶尺蠖或灰茶尺蠖發(fā)生時(shí)一般不整齊，各個(gè)蟲(chóng)齡均會(huì)有分布，可選擇3齡或3齡以上幼蟲(chóng)進(jìn)行判別。兩種尺蠖在一定季節(jié)還會(huì)出現(xiàn)少量體色全黑的成蟲(chóng)，這些成蟲(chóng)翅面全部為黑色，不易分辨蟲(chóng)種，在此情況下，可選擇灰色翅的成蟲(chóng)進(jìn)行鑒別。

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（責(zé)任編輯：楊明麗）