HBV攜帶孕婦經(jīng)替比夫定治療后Th1和Th2細(xì)胞因子變化情況

孟曉慶

洛陽(yáng)北方企業(yè)集團(tuán)有限公司職工醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南省洛陽(yáng)市 471000

乙型肝炎病毒(HBV)感染女性約占HBV感染者的45%[1]，7%的孕期女性為慢性乙型肝炎患者，其中半數(shù)以上為HBeAg陽(yáng)性[2]。目前，該領(lǐng)域研究多集中于HBV攜帶孕婦母嬰阻斷方面，而對(duì)產(chǎn)后肝功能水平和HBV血清學(xué)變化的研究較少[3]。Th1和Th2細(xì)胞因子分別介導(dǎo)細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)，Th1和Th2細(xì)胞因子相互抑制，維持體內(nèi)正常免疫平衡狀態(tài)。免疫耐受期HBV感染的孕婦體內(nèi)以Th2型應(yīng)答模式為主，Th1/Th2失衡是無(wú)法正常清除病毒和相關(guān)感染細(xì)胞的主要原因之一[4]。本研究在孕中晚期給予HBV攜帶孕婦替比夫定干預(yù)治療，觀察治療前后ALT、HBV血清學(xué)指標(biāo)以及Th1、Th2細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化情況，為HBV攜帶孕婦的干預(yù)治療提供參考。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2016年5月—2017年12月在本院就診并分娩的HBV攜帶孕婦58例。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)HBV-DNA陽(yáng)性≥1年，孕前≥3次、孕期≥2次檢查血清ALT、AST在正常范圍；(2)無(wú)抗病毒治療史；(3)分娩后在本院肝內(nèi)科隨診。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在HBV之外其他肝炎病毒感染者；(2)存在HIV、梅毒、皰疹病毒感染者；(3)長(zhǎng)期服用免疫抑制劑，合并肝癌或其他惡性腫瘤者。患者年齡21～37歲，平均年齡(29.3±2.5)歲。本研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法 患者于孕中晚期(26～30周)開(kāi)始接受替比夫定(諾華制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20070028)治療，600mg/d，服藥至產(chǎn)后4～8周，轉(zhuǎn)入肝內(nèi)科進(jìn)行下一步治療。分別于治療前、分娩前、產(chǎn)后4～8周，抽取患者空腹肘靜脈血5ml，使用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT水平；Elisa法定量檢測(cè)HBsAg、HBeAg水平，試劑盒購(gòu)于上?？道噬锟萍加邢薰?；實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)HBV-DNA水平。多亞基細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒檢測(cè)血清Th1細(xì)胞因子(γ干擾素、IL-2、TNF-α)水平和Th2細(xì)胞因子(IL-4、6、10)水平，試劑盒購(gòu)于上海寶英生物科技有限公司。上述操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 不同時(shí)間段孕產(chǎn)婦血清ALT水平 替比夫定治療前ALT水平為(22.9±7.4)U/L，分娩前為(19.8±6.2)U/L，產(chǎn)后復(fù)診時(shí)為(35.1±6.6)U/L。產(chǎn)后ALT正常水平34例(58.62%)；≥1×ULN 24例(41.38%)，其中(1～2)×ULN 15例、≥2×ULN 8例、>10×ULN 1例。

2.2 HBsAg、HBeAg、HBV-DNA水平比較 見(jiàn)表1。替比夫定治療前、分娩前、產(chǎn)后患者HBeAg水平之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；分娩前和產(chǎn)后HBsAg水平均明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；分娩前和產(chǎn)后HBV-DNA水平均明顯低于治療前，產(chǎn)后HBV-DNA水平明顯高于分娩前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 不同時(shí)間段HBsAg、HBeAg、HBV-DNA水平比較

注：與治療前相比，aP<0.05；與分娩前相比，bP<0.05。

2.3 Th1和Th2細(xì)胞因子水平比較 見(jiàn)表2。分娩前和產(chǎn)后γ干擾素水平均明顯低于治療前，產(chǎn)后γ干擾素水平明顯低于分娩前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；治療前和分娩前IL-2、TNF-α水平間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，產(chǎn)后IL-2、TNF-α水平明顯高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療前和分娩前IL-4、IL-6、IL-10水平間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，產(chǎn)后IL-4、IL-6、IL-10水平明顯高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 不同時(shí)間段Th1和Th2細(xì)胞因子水平比較

注：與治療前相比，aP<0.05；與分娩前相比，bP<0.05。

3 討論

HBV感染患者妊娠始終是一個(gè)廣泛關(guān)注的問(wèn)題，孕期HBV的活性和免疫狀態(tài)均會(huì)出現(xiàn)變化。相關(guān)研究顯示，HBeAg在免疫耐受期呈陽(yáng)性且HBV-DNA≥106拷貝/ml的孕期女性分娩后ALT水平升高率為30%～40%，且多發(fā)于產(chǎn)后1～2個(gè)月；HBeAg陽(yáng)性女性產(chǎn)后ALT水平升高率為65%～70%，而HBeAg陰性女性產(chǎn)后ALT水平升高率約為30%[5]；孕中晚期給予拉米夫定治療的HBV感染女性產(chǎn)后ALT水平升高率為65%[6]。本研究顯示，HBV感染女性產(chǎn)后ALT維持在正常水平的比例為58.62%，高出正常水平的比例為41.38%，略低于上述研究，說(shuō)明孕中晚期使用替比夫定干預(yù)治療有助于降低HBV感染女性產(chǎn)后ALT水平異常的發(fā)生率。

本次研究中分娩前孕婦HBV-DNA水平明顯低于替比夫定治療前，說(shuō)明替比夫定有助于降低HBV-DNA拷貝數(shù)；產(chǎn)后HBV-DNA水平較分娩前明顯升高，但與替比夫定治療前相比明顯降低，而HBsAg水平與分娩前相比略有上升，可能與產(chǎn)后體內(nèi)免疫水平變化有關(guān)。Th1細(xì)胞及相關(guān)因子可活化巨噬細(xì)胞，介導(dǎo)高強(qiáng)度的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，發(fā)揮細(xì)胞殺傷作用，與細(xì)胞免疫和炎癥組織損傷有關(guān)。Th2細(xì)胞及相關(guān)因子可誘導(dǎo)肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞分化和抗體形成，抑制體內(nèi)炎癥反應(yīng)進(jìn)程，避免對(duì)機(jī)體的過(guò)度損傷[7]。相關(guān)研究顯示，免疫應(yīng)答中Th2細(xì)胞因子限制了Th1細(xì)胞因子介導(dǎo)的病理性損傷，在維持體內(nèi)免疫系統(tǒng)的平衡中發(fā)揮重要作用[8]。健康女性孕期體內(nèi)細(xì)胞免疫功能下降，免疫耐受性提升，對(duì)維持正常妊娠狀態(tài)具有促進(jìn)作用。本研究顯示，替比夫定干預(yù)治療前和分娩前Th1細(xì)胞因子中IL-2、TNF-α均呈低表達(dá)，產(chǎn)后表達(dá)水平明顯提升，處于高表達(dá)狀態(tài)；替比夫定干預(yù)治療前γ干擾素水平最高，之后逐漸下降，產(chǎn)后水平最低；干預(yù)治療前和分娩前Th2細(xì)胞因子中IL-4、IL-6、IL-10均呈低表達(dá)狀態(tài)，產(chǎn)后表達(dá)水平明顯升高；Th1細(xì)胞因子中IL-2、TNF-α和IL-4、IL-6、IL-10的變化趨勢(shì)一致，總體呈動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。相關(guān)研究顯示，HBeAg陽(yáng)性的乙肝患者接受替比夫定治療過(guò)程中，用藥12周起完全應(yīng)答組患者Th1細(xì)胞因子水平明顯提升，Th2細(xì)胞因子水平明顯降低，提示替比夫定治療后可通過(guò)調(diào)節(jié)Th1/ Th2細(xì)胞因子的平衡狀態(tài)，提升Th1細(xì)胞因子的免疫反應(yīng)，抑制HBV-DNA的復(fù)制。本研究中孕中晚期給予替比夫定干預(yù)治療，產(chǎn)后Th1和Th2細(xì)胞因子呈同步上升趨勢(shì)，與上述研究結(jié)論存在差異，可能與孕期免疫耐受有關(guān)，具體機(jī)制需進(jìn)一步深入研究。