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    桑葉粉混合發(fā)酵飼料對(duì)草魚(yú)健康性及魚(yú)肉風(fēng)味品質(zhì)影響

    2019-08-29 09:22:40黃傳書(shū)黃先智唐小平
    蠶學(xué)通訊 2019年2期
    關(guān)鍵詞:發(fā)酵飼料草魚(yú)桑葉

    黃傳書(shū) 趙 珮 黃先智 唐小平 劉 艷 雷 霆 羅 莉

    (1. 重慶市蠶業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院,重慶 400700;2.西南大學(xué)蠶學(xué)與系統(tǒng)生物學(xué)研究所,重慶400716;3.西南大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,重慶 400716)

    桑葉蛋白質(zhì)含量高,并具降糖、降脂、消炎抗菌等作用,能提高畜禽水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力,在健康養(yǎng)殖方面具有巨大的發(fā)展?jié)摿ΑQ芯堪l(fā)現(xiàn):桑葉除含有豐富的礦物質(zhì)及維生素外,還含有許多特殊功效的天然活性物質(zhì)成分。100g干物質(zhì)含甾醇46mg(比綠茶高3~4倍),還含有異槲皮苷200~500mg、槲皮苷30mg、槲皮苦素100mg等能抑制脂質(zhì)氧化作用的黃酮類物質(zhì)。在飼料中添加10%的桑葉不會(huì)影響羅非魚(yú)的生長(zhǎng)性能,同時(shí)可有效調(diào)節(jié)羅非魚(yú)的脂質(zhì)代謝,改善其肌肉品質(zhì)[1],發(fā)酵桑葉能劑量依賴性地降低高脂血癥羅非魚(yú)的血脂、血糖水平,提高機(jī)體的抗氧化能力[2],飼料中添加MLM和FMLM對(duì)胡須雞有降低血脂含量、增強(qiáng)免疫力、提高抗氧化能力等作用[3],發(fā)酵桑葉粉替代50%的魚(yú)粉時(shí),巴塔野鯪的增重率、特定生長(zhǎng)率明顯高于對(duì)照組[4],在草魚(yú)飼料中添加5%桑葉粉對(duì)其生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響,當(dāng)桑葉粉含量達(dá)到10%時(shí),其生長(zhǎng)性能受到抑制[5]。

    草魚(yú)是中國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚(yú)類,產(chǎn)量位居全國(guó)淡水養(yǎng)殖之首,在集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中,普遍采用提高飼料脂肪水平以節(jié)約蛋白質(zhì)的策略,以達(dá)到促進(jìn)魚(yú)類生長(zhǎng),減少氮磷排放,保護(hù)養(yǎng)殖水體環(huán)境的目的。由于草魚(yú)攝食量大、對(duì)能量的需求低以及對(duì)高脂飼料利用能力低,飼料中脂肪水平過(guò)高時(shí)容易導(dǎo)致魚(yú)體脂肪沉積過(guò)多、機(jī)體抗氧化能力下降,脂質(zhì)過(guò)氧化程度加重,甚至導(dǎo)致高脂血癥和營(yíng)養(yǎng)性脂肪肝的發(fā)生,危害魚(yú)類的生長(zhǎng)。本研究以草魚(yú)幼魚(yú)為試驗(yàn)對(duì)象,研究桑葉發(fā)酵飼料對(duì)投喂高脂飼料的草魚(yú)生長(zhǎng)、肌肉營(yíng)養(yǎng)組成、血液指標(biāo)、肝臟脂肪含量、抗氧化能力的影響,旨在為探索解決高脂飼料導(dǎo)致草魚(yú)脂肪沉積增多、抗氧化能力降低及脂質(zhì)代謝紊亂等問(wèn)題,為草魚(yú)的健康養(yǎng)殖提供數(shù)據(jù)參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 試驗(yàn)飼料

    桑葉粉(桐鄉(xiāng)青高溫殺青烘干)、進(jìn)口魚(yú)粉、菜籽粕、棉籽粕、豆渣(豆粕)、面粉、維生素和礦物質(zhì)混合料、發(fā)酵劑。

    1.1.2 試驗(yàn)魚(yú)苗

    從漁場(chǎng)購(gòu)0.55kg左右大小草魚(yú)苗,配0.52kg左右白鰱,整理前魚(yú)池內(nèi)鯽魚(yú)、鯉魚(yú)留大小比較均勻若干尾(共9.10kg)。

    1.2 養(yǎng)殖魚(yú)塘

    實(shí)驗(yàn)魚(yú)塘為重慶市蠶業(yè)科學(xué)研究院果桑品種比較試驗(yàn)園100m2水面魚(yú)池。于2017年9月12日清塘,用鮮石灰全池均勻撒布消毒,用鐵絲網(wǎng)將魚(yú)池均分為2等分,保證兩邊魚(yú)苗(草魚(yú)、鯽魚(yú)、白鰱等)不能混,只有水可以兩邊流動(dòng),兩邊魚(yú)池分別放置長(zhǎng)、寬1.2m×0.8m的活動(dòng)飼料臺(tái),便于每日飼料食下情況觀察記錄,魚(yú)池準(zhǔn)備完畢關(guān)水15d左右投放魚(yú)苗。

    1.3 魚(yú)苗投放

    2017年9月26日,從市場(chǎng)購(gòu)買0.55kg左右大小的草魚(yú)苗50尾、0.52kg左右大小的白鰱12尾及原池中鯽魚(yú)(鯉魚(yú))共9.10kg,分別放在鐵絲網(wǎng)分隔的兩邊魚(yú)池,2d后開(kāi)始按比較試驗(yàn)設(shè)計(jì)投放飼料。

    1.4 精飼料配制

    (1)處理組(CL):桑葉粉混合發(fā)酵飼料,按干物重量比,魚(yú)粉4.9%~5.3%、豆渣19.0%~22.0%、豆粕38.0%~42.0%、棉籽粕26.0%~28.0%、維生素與礦物質(zhì)預(yù)混料0.8%~1.2%、桑葉粉3.0%~5.0%、發(fā)酵劑0.2%。

    (2)對(duì)照組(CK):無(wú)桑葉粉發(fā)酵飼料,按干物重量比,魚(yú)粉4.9%~5.3%、豆渣19.0%~22.0%、豆粕38.0%~42.0%、棉籽粕26.0%~28.0%、維生素與礦物質(zhì)預(yù)混料0.8%~1.2%、面粉3.0%~5.0%、發(fā)酵劑0.2%。

    按食用草魚(yú)飼料國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T36205-2018)粗蛋白≥20.0%、粗脂肪≥2.0%、灰分≤13.0%,達(dá)到所配混合飼料粗蛋白36.0%~37.5%、粗脂肪3.7%~3.9%、灰分7.0%~10.0%、總能量11.5~12.0MJ/kg。

    將上述飼料混合均勻,在25℃~28℃下,發(fā)酵48h干燥備用。

    1.5 飼養(yǎng)

    對(duì)照組(CK)用青草+無(wú)桑葉混合發(fā)酵飼料飼養(yǎng),處理組(CL)用青草+桑葉粉混合發(fā)酵飼料,每天早上8:30和下午5:00各投放兩次飼料,每次投放飼料前,將上次投放飼料剩余量進(jìn)行測(cè)量記錄,便于計(jì)算食下量。

    1.6 記錄與抽樣調(diào)查方法

    1.6.1 記錄

    記錄投放魚(yú)苗重量、每日天氣情況、飼料食下量、魚(yú)兒生長(zhǎng)情況等內(nèi)容。每次投放飼料前,將上次投放飼料全部清除并稱重,計(jì)算食下量,再根據(jù)上次食下量,確定下次飼料投放量。

    1.6.2 抽樣調(diào)查

    將魚(yú)塘所有魚(yú)全部清塘,并分類稱重,將未受傷草魚(yú)按CK和CL兩組分別放在充氧水箱,并在水箱放入適量MS-222 麻醉劑進(jìn)行麻醉減少草魚(yú)活動(dòng),直接送到實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)肝臟組成、肉質(zhì)、風(fēng)味物質(zhì)、血清脂質(zhì)、肝臟抗氧化能力等指標(biāo)。

    1.7 樣品的制備與分析

    將取回樣品,禁食24h后稱重,每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取4 尾魚(yú),用MS-222進(jìn)行麻醉,剝離出內(nèi)臟、肝胰臟,用于肝體指數(shù)(HSI)和肝脂含量的測(cè)定; 每個(gè)重復(fù)另隨機(jī)取3尾魚(yú)于尾靜脈取血,于4000×g4℃條件下離心10min,收集血清,-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    血脂指標(biāo)均采用全自動(dòng)生化分析儀(日立7100)測(cè)定,包括血清總膽固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量。血清超氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量采用試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))進(jìn)行測(cè)定。蛋白質(zhì)含量采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定。

    1.8 數(shù)據(jù)處理與分析

    部分?jǐn)?shù)據(jù)采用SPSS22.0 對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,差異較大數(shù)據(jù)直接用平均數(shù)比較。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 桑葉粉混合發(fā)酵飼料能有效改善草魚(yú)肝臟健康

    由表1可知,CL組草魚(yú)生長(zhǎng)速度、尾均重顯著高于對(duì)照。同時(shí),CL組草魚(yú)肝體比和臟體比較CK組草魚(yú)比較,都有所下降,肝體比下降了71.7%,臟體比下降了30.1%,肥滿度CL組低于CK組,草魚(yú)體型優(yōu)美、鱗片緊實(shí),形體接近于野生草魚(yú)形態(tài),可能與添加桑葉量偏多有一定的關(guān)系,還需要進(jìn)一步優(yōu)化其添加量。

    表1 桑葉發(fā)酵飼料對(duì)草魚(yú)形體指標(biāo)與尾增重影響比較

    由表2可知,CK組草魚(yú)肝臟顏色偏淡,脂肪附著面積、脂肪厚度顯著高于CL組,CL組魚(yú)肝臟水分、肝臟脂肪、腸脂肪含量分別為73.80%、21.30%、8.86%,魚(yú)肝臟水分較CK組增加了6.26%;肝臟脂肪、腸脂肪分別較CK組下降了36.73%、54.38%,大幅改善了草魚(yú)脂肪肝的狀態(tài),提高了草魚(yú)肝臟健康。

    表2 桑葉發(fā)酵飼料對(duì)草魚(yú)肝臟脂肪的影響

    2.2 桑葉粉混合發(fā)酵飼料能提高草魚(yú)肝臟抗氧化能力

    機(jī)體中自由基清除酶主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)等。SOD可清除機(jī)體內(nèi)的超氧自由基,CAT和GSH-Px可清除機(jī)體內(nèi)的過(guò)氧化氫。丙二醛(MDA)是多不飽和脂肪酸過(guò)氧化的主要分解產(chǎn)物,是反映草魚(yú)氧化應(yīng)激的重要指標(biāo)。

    由表3可知,CL組草魚(yú)與CK組草魚(yú)比較,肝臟總抗氧化能力(T-AOC)和T-SOD均有明顯增加, MDA明顯降低。飼料中添加發(fā)酵桑葉粉能極顯著提高草魚(yú)抗氧化能力,對(duì)草魚(yú)抗應(yīng)激、耐缺氧能力有較大的作用,從而促進(jìn)草魚(yú)生長(zhǎng)。

    2.3 桑葉粉混合發(fā)酵飼料能有效調(diào)節(jié)血清脂肪代謝,促進(jìn)草魚(yú)健康

    由表4可知,適量添加發(fā)酵桑葉粉飼養(yǎng)草魚(yú),能有效調(diào)節(jié)其脂質(zhì)代謝,顯著降低草魚(yú)血清指標(biāo)中的總膽固醇、甘油三酯、葡萄糖含量(P<0.05),能有效改善高能高脂飼料對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)的不利影響,促進(jìn)草魚(yú)健康。

    表3 桑葉飼料對(duì)草魚(yú)抗氧化能力的影響

    表4 桑葉飼料對(duì)草魚(yú)血清指標(biāo)的影響

    2.4 桑葉粉混合發(fā)酵飼料能顯著提高肉質(zhì)及草魚(yú)風(fēng)味物質(zhì)

    由表5和表6可知,CL組與CK組草魚(yú)比較,全魚(yú)水分、全魚(yú)灰分、全魚(yú)蛋白含量差異不顯著,但天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、酪氨酸等風(fēng)味氨基酸含量均有顯著的提高,風(fēng)味物質(zhì)肌苷酸含量提高19.78%、苷氨酸提高21.74%,CL組全魚(yú)脂肪含量顯著低于CK組,但肌肉脂肪含量差異不顯著,說(shuō)明桑葉主要是降低內(nèi)臟脂肪,CL組草魚(yú)肌肉中的不飽和脂肪酸總量高于CK組108.00%,影響肉質(zhì)的油酸提高190.63%、亞油酸提高144.40%、亞麻酸提高14.29%,顯著提高了草魚(yú)的肉質(zhì)和風(fēng)味。

    表5 桑葉飼料對(duì)草魚(yú)全魚(yú)和組織常規(guī)組成的影響

    備注:水分外的其他成分(粗蛋白、粗脂肪和粗灰分)為干樣基礎(chǔ)。

    表6 桑葉飼料對(duì)草魚(yú)肌肉風(fēng)味物質(zhì)含量比較

    表7 桑葉飼料對(duì)草魚(yú)肉質(zhì)脂肪酸含量比較

    3 討論

    研究發(fā)現(xiàn),鮮桑葉中含有一些防御蛋白、植物凝集素和丹寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子,對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物消化吸收造成負(fù)面影響,另外桑葉表面覆蓋蠟質(zhì)層,單胃動(dòng)物難以消化利用[4]。本次試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),在用青草飼養(yǎng)草魚(yú)時(shí),過(guò)多添加鮮桑葉對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)有一定影響,草魚(yú)消化不完全,同時(shí)草魚(yú)排泄物直接造成水面大量綠藻生長(zhǎng),直接污染水質(zhì),對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)有一定影響。飼料中添加75%的發(fā)酵桑葉養(yǎng)殖淡水鯰魚(yú)(Heteropneu-stesfossilis)不影響其生長(zhǎng)和飼料利用,用發(fā)酵桑葉粉替代50%的魚(yú)粉飼養(yǎng)巴塔野鱗增重率、特定生長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組,而且還展現(xiàn)出良好的飼料利用率[4]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),將適量桑葉粉與其他飼料成分混合共同發(fā)酵飼養(yǎng)草魚(yú),草魚(yú)的健康性和生長(zhǎng)率明顯高于對(duì)照,且飼養(yǎng)過(guò)程中草魚(yú)耐缺氧能力明顯提高。因此,在用桑葉養(yǎng)殖草魚(yú)最好不用鮮桑葉直接飼養(yǎng)。

    SOD主要清除氧自由基,減輕或避免自由基和脂質(zhì)過(guò)氧化物對(duì)動(dòng)物機(jī)體造成的損傷。而CAT將SOD清除活性氧時(shí)產(chǎn)生的過(guò)氧化氫(H2O2)轉(zhuǎn)化為水(H2O),保護(hù)機(jī)體免受損傷,預(yù)防性給予發(fā)酵桑葉能夠增加高脂血癥羅非魚(yú)血清SOD和CAT活性以及CAT/SOD,降低血清MDA含量[2]。本試驗(yàn)結(jié)果也進(jìn)一步證實(shí)這種推斷,即飼料中添加發(fā)酵桑葉能顯著降低試驗(yàn)草魚(yú)血清指標(biāo)中的總膽固醇、甘油三酯、葡萄糖含量(P<0.05),極顯著提高了草魚(yú)抗氧化能力,通過(guò)提高機(jī)體抗氧化能力及抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),改善脂質(zhì)代謝功能,對(duì)改善草魚(yú)肝臟健康,提高草魚(yú)抗應(yīng)激、耐缺氧能力有較大的作用,從而達(dá)到提高草魚(yú)健康養(yǎng)殖。

    用桑葉粉混合發(fā)酵飼料與常規(guī)飼料飼養(yǎng)草魚(yú)比較,影響魚(yú)肉風(fēng)味物質(zhì)天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、酪氨酸等含量顯著高于對(duì)照(P<0.05),全魚(yú)脂肪含量顯著低于對(duì)照(P<0.05),但肌肉脂肪不顯著,說(shuō)明桑葉主要是降低內(nèi)臟脂肪,桑葉草魚(yú)肌肉中的不飽和脂肪酸總量高于對(duì)照組108.00%,影響肉質(zhì)的油酸高于對(duì)照190.63%、亞油酸高于對(duì)照144.40%、亞麻酸高于對(duì)照14.29%,說(shuō)明桑葉發(fā)酵飼料飼養(yǎng)草魚(yú)不僅可以提高草魚(yú)養(yǎng)殖健康性,還可以提高草魚(yú)肉質(zhì)和風(fēng)味。

    4 結(jié)論

    適量添加桑葉粉混合發(fā)酵飼料,可以有效改善草魚(yú)肝臟健康,提高草魚(yú)抗氧化能力、抗體應(yīng)激能力,從而促進(jìn)草魚(yú)健康生長(zhǎng)。同時(shí),還可以提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和風(fēng)味物質(zhì)。

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