• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    兩種植物甾醇納米粒的降膽固醇效果研究

    2019-08-28 12:52:56焦文佳夏廉臣王雪暉祝愛俠王春維
    食品工業(yè)科技 2019年16期
    關(guān)鍵詞:甾醇高脂殼聚糖

    焦文佳,程 銘,夏廉臣,王雪暉,陶 冶,祝愛俠,王春維,,3,*

    (1.武漢輕工大學食品科學與工程學院,湖北武漢 430023;2.武漢輕工大學動科科學與營養(yǎng)工程學院,湖北武漢 430023;3.國家糧食局糧油資源綜合開發(fā)工程技術(shù)研究中心,湖北武漢 430023)

    植物甾醇是一種重要天然甾醇資源,也是一種存在于植物中的天然活性物質(zhì)[1]。它廣泛分布于自然界,是植物體內(nèi)構(gòu)成細胞膜的成分之一,也是機體中多種激素、維生素D及甾體化合物合成的前體[2]。植物甾醇不僅可以影響脂質(zhì)體膜上磷脂分子聚集,調(diào)節(jié)膜對小分子物質(zhì)的通透性[3],改變膜的表面性質(zhì)[4],還可以降低膽固醇的腸道吸收[5]。植物甾醇因其與膽固醇有著極為相似的結(jié)構(gòu),可影響膽固醇在人體內(nèi)的代謝,且對人體無副作用,被認為是治療和預(yù)防高血脂癥的最佳天然物質(zhì)[6]。

    天然植物甾醇具有不溶于水,微溶于油,熔點高等特性,目前,其主要以物理改性后的形式加入到食品體系中,如乳液、脂質(zhì)體、微膠囊和納米粒等,以提高植物甾醇的水溶性。Chao等[7]采用乳化蒸發(fā)法制備植物甾醇納米粒,將植物甾醇溶解在正己烷中,注入含蛋白的水相中,通過高速分散、均質(zhì)形成植物甾醇納米粒;彭捷[6]分別采用反溶劑法和白蛋白結(jié)合技術(shù)制備了水溶性植物甾醇納米顆粒和富含植物甾醇的高蛋白7S豆奶;曹文君[8]利用乳化蒸發(fā)技術(shù)構(gòu)建食物蛋白-植物甾醇納米顆粒,提高植物甾醇的溶解性和生物利用率。

    植物甾醇納米粒增加了植物甾醇的水溶性,擴大了植物甾醇的應(yīng)用范圍,但目前,對制備的植物甾醇納米粒的降膽固醇功效研究報道較少。因此,本課題研究了自制的兩種植物甾醇納米粒對高血脂癥小鼠的降膽固醇效果,為植物甾醇納米粒的降膽固醇效果提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    C57BL/6J小鼠 雄性,SPF級,96只,4~5周齡,體重18~22 g,北京華府康生物科技股份有限公司,實驗動物合格證號:SCXK(京)2014-0004;普通飼料、墊料 武漢市疾控中心;高脂飼料配方為:普通飼料88.8%,豬油10%,膽固醇1%,豬膽鹽0.2%;植物甾醇(純度≥95%)、阿托伐他汀鈣(純度≥99.5%) 武漢遠成共創(chuàng)科技有限公司;大豆分離蛋白(純度≥95%) 新西蘭恒天然有限公司;大豆卵磷脂(純度≥70%)、殼聚糖(脫乙酰度≥95%,粘度100~200 mpa.s) 阿拉丁試劑有限公司;蘇木素 美國Sigma-Aldrich公司;伊紅Y(水溶性)、無水乙醇、二甲苯、鹽酸、包埋石蠟、中性樹膠 國藥集團化學試劑有限公司;膽固醇(純度≥90%)、豬膽鹽(膽酸含量≥60%)、豬油 上海源葉生物科技有限公司;總膽固醇(Total Cholesterol,TC)試劑盒、總甘油三酯(Triacylglycerol,TG)試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇(High Density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)試劑盒 南京建成生物工程研究所。

    AL204型分析天平 梅特勒-托利多儀器有限公司;DF-101S型磁力攪拌機 上??茽杻x器設(shè)備有限公司;T18型高速分散機、Lab Dancer渦旋儀 德國IKA公司;ST2100型pH計 上海奧豪斯儀器有限公司;R3型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 瑞士Buchi公司;Zetasizer Nano ZS型激光粒度儀 英國Malvern公司;Turbiscan Lab Expert型穩(wěn)定性分析儀 法國Formulaction公司;AH-2010型高壓均質(zhì)機 安拓思納米技術(shù)(蘇州)有限公司;GC 7890A型氣相色譜儀 美國Agilent科技有限公司;PICO 17型高速離心機 賽默飛世爾科技(中國)有限公司;FD5系列冷凍干燥機 美國SIM公司;Enspire酶標儀 美國鉑金埃爾默公司;RM 2016病理切片機 德國Leica公司;BX53顯微鏡 日本奧林巴斯。

    1.2 實驗方法

    1.2.1 樣品的制備及表征

    1.2.1.1 植物甾醇納米粒(PNP)制備 將大豆分離蛋白(SPI)溶解在去離子水中,室溫攪拌溶解,調(diào)節(jié)溶液pH為7.0,4 ℃水化過夜。將植物甾醇與卵磷脂按一定比例(1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5)溶解在無水乙醇中,室溫攪拌溶解,形成有機相;蛋白分散液于高速分散機下以10000 r/min的轉(zhuǎn)速進行高速分散,用帶有針頭的注射器將有機相緩慢注入其中,并繼續(xù)分散5 min;所得混合溶液通過高壓均質(zhì)形成穩(wěn)定的植物甾醇納米分散液(Phytosterol Nano-dispersions,PND),旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇,加水稀釋至原蛋白濃度即得植物甾醇納米粒(Phytosterol Nanoparticles,PNP)。通過對PNP進行表征,穩(wěn)定性分析及包埋效果進行研究,得到PNP的制備最佳工藝為:均質(zhì)壓力為900 bar,均質(zhì)次數(shù)為6次,植物甾醇與卵磷脂比例為1∶4,大豆分離蛋白濃度為0.75%(w/w),無水乙醇體積為16 mL;所得納米粒的粒徑為(93.35±1.222) nm,電位為(-29.3±0.611) mV,植物甾醇的包埋率為97.26%。且PNP凍干后復(fù)溶性良好,經(jīng)復(fù)溶后植物甾醇在水中的溶解度達到了2.122 mg/mL。

    1.2.1.2 殼聚糖修飾植物甾醇納米粒(CS-PNP)制備 按上述方法制備0.75%的SPI溶液,按照PND的最佳工藝條件及制備方法(無需進行高壓均質(zhì))制備植物甾醇分散液(Phytosterol Dispersions,PD),將殼聚糖按0.2%的比例溶于1%醋酸溶液中,40 ℃攪拌溶解,4 ℃水化過夜,按比例稀釋備用。取一定濃度(0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mg/mL)的殼聚糖溶液,與植物甾醇分散液按1∶1 (v/v)混合,調(diào)節(jié)混合液pH至3.5,10000 r/min高速分散2 min,95 ℃水浴攪拌30 min,冷卻至室溫,得到CS-PNP。所得CS-PNP的最佳制備工藝為:殼聚糖濃度0.4 mg/mL,pH為3.5,加熱溫度為95 ℃,加熱時間為30 min;所得納米粒的粒徑為(182.6±2.05) nm,電位為(35.3±1.58) mV,植物甾醇的包埋率為91.37%。CS-PNP在低溫下穩(wěn)定性良好。

    1.2.1.3 空白納米粒(NP)和空白殼聚糖修飾納米粒(CS-NP)制備 空白納米粒(NP)和空白殼聚糖修飾納米粒(CS-NP)分別按照PNP和CS-PNP的最佳制備工藝條件及制備方法(無需添加植物甾醇)進行制備。

    1.2.2 試驗動物及飼養(yǎng)條件 試驗選用4~5周齡SPF級雄性C57BL/6J小鼠96只,體重18~22 g。實驗室溫度控制在22~25 ℃,相對濕度為55%~70%,自然光照,自由進食和飲水,適時更換飼料和飲用水,并清理鼠籠。

    1.2.3 動物模型建立及干預(yù) 在小鼠適應(yīng)飼養(yǎng)一周后,將小鼠隨機分成8組:正常組、高脂模型組、陽性對照組、植物甾醇(PS)組、植物甾醇納米粒(PNP)組、空白納米粒(NP)組、殼聚糖修飾植物甾醇納米粒(CS-PNP)組、空白殼聚糖修飾納米粒(CS-NP)組,每組12只,每組兩籠。正常組飼喂普通飼料,其他組飼喂高脂飼料,自由進食和飲水,建立高脂模型。飼喂8周后,測定小鼠血清指標TG、TC、HDL-C、LDL-C含量,判定高脂模型是否建立成功。模型建立成功后,再對小鼠進行干預(yù),正常組:飼喂普通飼料;高脂模型組:飼喂高脂飼料;陽性對照組:飼喂高脂飼料+0.0075%阿托伐他汀鈣;PS組:飼喂高脂飼料+0.2%植物甾醇;PNP組:飼喂高脂飼料+1.75%植物甾醇納米粒;NP組:飼喂高脂飼料+1.55%空白納米粒;CS-PNP組:飼喂高脂飼料+1.83%殼聚糖修飾植物甾醇納米粒;CS-NP組:飼喂高脂飼料+1.63%空白殼聚糖修飾納米粒。試驗藥物根據(jù)要求按照一定比例與高脂飼料混合均勻后使用,陽性藥物(阿托伐他汀鈣)按照人體最大攝入量80 mg/d計算,飼料中阿托伐他汀鈣以0.0075%的比例添加在高脂飼料中,試驗藥物均按照PS添加量為0.2%比例換算。

    1.2.4 樣品收集 建模期間,每周記錄小鼠的體重,每日記錄采食量,每隔兩周小鼠眼眶采血,測定其血脂水平。藥物干預(yù)4周,干預(yù)結(jié)束后,小鼠禁食16 h,眼眶取血,頸椎脫臼致死,分離小鼠心、肝、脾、肺、腎,用生理鹽水漂洗,濾紙吸干并稱重。收集建模期和給藥期小鼠糞便,凍干保存,以便進一步分析。

    1.2.5 小鼠臟器指數(shù) 將分離得到的臟器組織(心、肝、脾、肺、腎)用濾紙吸干稱重后,按下列公式計算小鼠的臟器指數(shù):

    臟器指數(shù)(%)=臟器濕重(g)×100/體重(%)[9]

    1.2.6 血清指標測定 眼眶取血所得血漿,室溫下靜置4 h,8000 r/min離心15 min,取上層血清,4 ℃冷藏保存,試劑盒檢測血清中總膽固醇(TC)、總甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量。

    1.2.7 肝脂檢測 利用Folch法[10]抽提肝臟中的脂類物質(zhì):取0.5 g肝臟組織在2 mL生理鹽水中充分勻漿后,加入10 mL氯仿:無水乙醇(2∶1,v/v)溶液,渦旋混勻,超聲10 min,靜置10~15 min,5000 r/min離心10 min,收集下層清液保存。用試劑盒方法檢測肝臟中的TG含量。取1 mL肝臟提取液,加入200 μL 5α-膽甾烷,氮氣吹干,加入10 mL 1 mol/mL氫氧化鉀乙醇溶液,80 ℃皂化1 h,加入5 mL水和10 mL正己烷,萃取分液,水洗三次[11-12]。取有機相氮氣吹干,加入100 μL吡啶與100 μL BSTFA∶MCS(99∶1),70 ℃衍生1 h,氣相分析,檢測肝臟中膽固醇與植物甾醇含量。

    1.2.8 肝臟組織病理學觀察 小鼠解剖后,取一小片新鮮肝臟組織用生理鹽水洗凈,立即置入4%多聚甲醛中保存。檢測時樣品經(jīng)脫水處理(75%乙醇4 h,85%乙醇2 h,90%乙醇1.5 h,95%乙醇1 h,無水乙醇Ⅰ 0.5 h,無水乙醇Ⅱ 0.5 h),透明處理(無水乙醇∶二甲苯為1∶1處理10 min,二甲苯Ⅰ 10 min,二甲苯Ⅱ 7 min)后,在60 ℃浸入石蠟(石蠟Ⅰ 1 h,石蠟Ⅱ 1 h,石蠟Ⅲ 1 h),使生物組織充分脫水,并用石蠟進行包埋;蠟塊冷凍后,用Leica RM2235切片機切取厚度為4 μm薄片,貼附于載玻片上,置于42 ℃溫水中展開,再放入60 ℃烤箱中烘烤3 h;然后脫去石蠟,將石蠟切片依次放入二甲苯Ⅰ(10 min)-二甲苯Ⅱ(10 min)-無水乙醇Ⅰ(5 min)-無水乙醇Ⅱ(5 min)-95%乙醇(3 min)-90%乙醇(3 min)-80%乙醇(2 min)-70%乙醇(2 min),然后蒸餾水浸洗2 min;接著將切片依次放入Harris氏蘇木素染液染色5~7 min,自來水洗浸洗返藍,1%的鹽酸酒精分化2~5 s,自來水洗浸洗返藍,1%水溶性伊紅染液染色2 min,自來水洗浸洗30 s,無水乙醇脫水,二甲苯透明,風干后中性樹膠封片;最后在顯微鏡下觀察[13-14]。

    1.2.9 糞便中甾醇含量測定 將收集的老鼠糞便冷凍干燥,研成粉末;取0.5 g糞便粉末,加入10 mL氯仿:無水乙醇(2∶1,v/v)超聲提取1 h,5000 r/min離心10 min,收集上清液[15]。取1 mL糞便提取液,氮氣吹干,按上述1.2.5中的方法測定膽固醇與植物甾醇含量。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    2 結(jié)果與分析

    2.1 建模期小鼠體重、采食量變化

    建模期(8周)各組小鼠的平均初始體重為(20±2) g,喂養(yǎng)8周后,小鼠的平均體重增加到(26±3) g(如圖1A)??梢钥闯?飼喂普通飼料和高脂飼料的小鼠體重同步增長,建模結(jié)束時,各組小鼠體重并無顯著差異。由于飼料配方差異,飼喂高脂飼料組的小鼠采食量均高于飼喂普通飼料組,且7組高脂飼料組小鼠采食量差別不大(如圖1B)。

    圖1 建模期小鼠平均體重(A)及平均日采食量(B)變化

    2.2 建模后小鼠血清指標測定

    高脂血癥是由于脂肪代謝或轉(zhuǎn)運異常導(dǎo)致血脂類濃度異常,包括血清總膽固醇升高、甘油三脂升高、低密度脂蛋白膽固醇升高或高密度脂蛋白膽固醇降低[16]。建模后正常組和高脂模型組小鼠血清指標如表1所示。從表1中可以看出,高脂模型組經(jīng)過8周高脂飼料喂養(yǎng)后,與正常組相比,高脂模型組TG顯著升高(p<0.05),TC和LDL-C極顯著升高(p<0.01),而HDL-C顯著降低(p<0.05),說明小鼠高血脂模型建立成功。

    表1 建模后小鼠血清指標(mmol/L)

    2.3 給藥期小鼠體重、采食量變化

    各組小鼠平均采食量和體重如圖2所示,陽性對照組、PNP組、CS-NP組和CS-PNP組小鼠平均采食量呈現(xiàn)先下降后升高的趨勢,但無顯著性差異(p>0.05),而其他組小鼠平均體重隨著飼喂時間延長,采食量逐漸增加。可能是由于降脂藥物的添加改變了飼料組成引起老鼠采食的不適,但第2周后均恢復(fù)正常,且總的來說,各組小鼠在給藥的4周內(nèi),采食量呈上升趨勢。在前3周,各組小鼠的平均體重逐漸增加,由26 g左右增加到28 g左右;在第4周時,飼喂阿托伐他汀鈣的陽性對照組小鼠平均體重從28.82 g降至26.23 g,而其他給藥組小鼠平均體重在第4周并無顯著變化,且與正常組小鼠無顯著差別,略低于高脂模型組小鼠,但無顯著差異(p>0.05)。這說明PS、NP、PNP、CS-NP和CS-PNP對小鼠體重沒有影響,而陽性藥物阿托伐他汀鈣會顯著(p<0.05)降低高脂小鼠體重。何文森[13]也發(fā)現(xiàn)植物甾醇、植物甾烷醇及其酯化產(chǎn)物均不會影響高脂模型組小鼠體重,這可能是由于植物甾醇與阿托伐他汀鈣的降膽固醇原理并不相同引起的。

    圖2 給藥期小鼠平均體重(A)及平均日采食量(B)變化

    2.4 小鼠臟器指數(shù)

    給藥4周后,小鼠平均臟器指數(shù)如表2所示。高脂模型組肝系數(shù)顯著高于正常組(p<0.05),說明高脂飼料的攝入會影響小鼠肝的健康[17],而其它給藥組與正常組肝系數(shù)并無顯著差異(p>0.05),且除NP組外,均顯著低于高脂模型組(p<0.05),說明陽性藥物、PS、PNP、CS-NP和CS-PNP均可以顯著降低高血脂小鼠肝系數(shù)(p<0.05),NP也能降低小鼠肝系數(shù),但效果不顯著(p>0.05)。對于心系數(shù),高脂模型組小鼠相對于正常組小鼠有所下降,但其變化并不顯著(p>0.05),說明高血脂并未顯著影響小鼠心系數(shù),這與侯冬梅[18]的研究結(jié)果存在微小差異,但趨勢相同,這可能是由于所選試驗小鼠品種的差異造成。與高脂模型組相比,PS組和CS-PNP組能顯著升高高血脂小鼠心系數(shù)水平(p<0.05),與正常組無顯著差異(p>0.05),其他給藥組與高脂模型組并無顯著差別(p>0.05)。高脂模型組小鼠脾系數(shù)與正常組均在0.26左右,而給藥組小鼠顯著提高了小鼠脾系數(shù)(p<0.05),說明高血脂并不能影響小鼠脾系數(shù),但陽性藥物及其它給藥均會升高小鼠脾系數(shù),這可能是植物甾醇及其他活性物質(zhì)的添加造成了脾臟組織的部分腫大。但對于肺系數(shù)和腎系數(shù),各組小鼠之間并未觀察到顯著差異(p>0.05)。

    表2 小鼠臟器指數(shù)(%)

    2.5 給藥后小鼠血清指標測定

    給藥4周后,小鼠血清指標變化如表3所示。對于TG,高脂模型組小鼠顯著高于正常組(p<0.05),達到了1.61 mmol/L;與高脂模型組相比,給藥后,PS組、PNP組、CS-NP組和CS-PNP組TG含量顯著下降(p<0.05),而陽性對照組和NP組TG下降不顯著(p>0.05),說明陽性藥物阿托伐他汀鈣和NP對于高血脂小鼠血清TG并無顯著效果,其他給藥組對TG療效顯著。對于TC,可以看出,給藥組均顯著降低了高血脂小鼠TC水平(p<0.05),但PS組、NP組和CS-NP組TG水平仍顯著高于正常組(p<0.05),而陽性對照組、PNP組和CS-PNP組與正常組間無明顯差異(p>0.05),說明各組藥物均對TC有一定的療效,但阿托伐他汀鈣、PNP和CS-PNP對于降低血清TC效果更好。小鼠飼喂高脂飼料后,HDL-C顯著降低(p<0.05),而飼喂PNP和CS-PNP后,HDL-C恢復(fù)到了正常組水平,其他給藥組對于提高高血脂小鼠HDL-C水平并無顯著效果(p>0.05)。給藥4周后,普通組小鼠LDL-C為0.26 mmol/L,高脂模型組顯著升高達到了0.44 mmol/L(p<0.05),給藥組均顯著降低了高血脂小鼠LDL-C水平(p<0.05),陽性藥物和CS-PNP效果最好,LDL-C水平降至0.27 mmol/L,PNP效果次之,也達到了0.29 mmol/L,PS與NP組和CS-NP組也有一定的效果。在一項關(guān)于植物甾烷醇酯的研究中也表明,膽固醇輕微升高的個體每日攝入2.6 g谷甾烷醇酯持續(xù)一年后,與對照組相比谷甾烷醇酯攝入組的TC和LDL-C水平分別降低10.3%和13%[19]。

    表3 給藥后小鼠血清指標(mmol/L)

    2.6 肝脂含量測定

    肝臟是機體新陳代謝最活躍的組織,且脂質(zhì)的合成、分解、轉(zhuǎn)運和代謝等活動主要發(fā)生在肝臟[20]。同時肝臟也是機體中調(diào)節(jié)膽固醇和甘油三酯平衡的重要器官[21],如果肝臟受損,脂肪細胞就不能向血液細胞釋放甘油三酷、膽固醇和磷脂等,從而造成脂質(zhì)的積累,引起肝臟病變,所以肝臟中TG和TC的含量可以直接反應(yīng)植物甾醇對膽固醇代謝的影響[18]。給藥后,小鼠肝臟中TG和TC含量變化如圖3所示。高脂模型組肝臟TG、TC水平均顯著高于正常組(p<0.05),給藥后,陽性對照組、PS組、PNP組和CS-PNP組均顯著降低了肝臟TG水平(p<0.05),且與正常組無顯著差異(p>0.05);NP和CS-NP雖然能降低肝臟TG水平,但效果不顯著(p>0.05)。各藥物干預(yù)組均顯著降低了肝臟TC水平(p<0.05),其中陽性對照組、PNP組和CS-PNP組對于降低肝臟TC效果最明顯(p<0.05),均達到了普通組水平。PS組、NP組和CS-NP組效果次之。說明兩種植物甾醇納米粒對小鼠肝臟的代謝活動有顯著的影響。

    圖3 肝臟中甘油三酯(TG)(A)和總膽固醇(TC)(B)含量

    2.7 肝臟組織病理學觀察

    脂肪肝是指由于各種原因引起的肝細胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變,高脂血癥常常并發(fā)脂肪肝。給藥結(jié)束后,對小鼠肝臟切片,進行組織病理學觀察,結(jié)果如圖4所示。正常組小鼠肝細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)規(guī)整,分布均勻,細胞質(zhì)無明顯空泡,沒有發(fā)生脂肪變性。高脂模型組小鼠肝細胞腫大,結(jié)構(gòu)松散,細胞間隙內(nèi)存在大量大小不一白色空泡,明顯發(fā)生脂肪變性。給藥后,陽性對照組、PS組、NP組和CS-NP組肝細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,分布較均勻,但可見大量不規(guī)則間隙,脂肪變性略微改善。而PNP組和CS-PNP組小鼠肝細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),細胞質(zhì)等分布均趨于正常,對小鼠脂肪肝有明顯在改善。說明阿托伐他汀鈣、PS、NP、CS-NP和PNP、CS-PNP均能改善高血脂小鼠脂肪肝,但后兩者效果更好??梢钥闯龈闻K組織切片觀察所得結(jié)果與圖3所示的數(shù)據(jù)具有很好的一致性,這表明兩種植物甾醇納米粒具有良好的緩解肝臟脂肪病變的功能。

    圖4 小鼠肝臟組織病理學觀察(200×)

    2.8 糞便中甾醇含量測定

    如圖5所示,正常組小鼠糞便中膽固醇含量為1.04 mg/g,而高脂模型組小鼠糞便中膽固醇含量高達30.72 mg/g。添加陽性藥物后,膽固醇排出量增加到了34.29 mg/g。對于植物甾醇給藥組,由于植物甾醇可以降低膽固醇的吸收,PS組小鼠糞便中膽固醇含量增加到了33.37 mg/g,其效果與阿托伐他汀鈣接近;PNP組中植物甾醇納米化后排出膽固醇相對于PS組又有所增加,但同時植物甾醇的排出也從7.20 mg/g增加到9.42 mg/g,CS-PNP組也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果。據(jù)介紹,膽固醇在機體的吸收率可達35%~70%,植物甾醇的吸收率僅為0.4%~3.5%[22]。高脂飼料中添加了1%的膽固醇,加大了機體對膽固醇的攝入量,同時也增加了膽固醇的排出。

    圖5 糞便中甾醇含量

    3 結(jié)論

    本研究通過建立高血脂模型考察自制的兩種植物甾醇納米粒(PNP和CS-PNP)對高血脂小鼠的降膽固醇效果。PNP和CS-PNP可通過降低小鼠肝臟和血脂中TG與TC含量、血清LDL-C水平,升高血清中HDL-C水平,促進機體膽固醇的排出,來改善膳食誘導(dǎo)的脂肪肝、高脂血癥和高膽固醇血癥。本研究為植物甾醇納米粒的降膽固醇效果提供理論依據(jù),為植物甾醇納米粒作為膳食補充劑的應(yīng)用提供了技術(shù)支持。

    猜你喜歡
    甾醇高脂殼聚糖
    高甾醇植物油研究現(xiàn)狀
    高脂血標本對臨床檢驗項目的干擾及消除對策
    運動降低MG53表達及其在緩解高脂膳食大鼠IR中的作用
    殼聚糖的應(yīng)用
    食品界(2016年4期)2016-02-27 07:36:46
    高脂飲食誘導(dǎo)大鼠生精功能障礙
    殼聚糖對尿路感染主要病原菌的體外抑制作用
    味精與高脂日糧對生長豬胴體性狀與組成的影響
    堿浸處理對殼聚糖膜性質(zhì)的影響
    微波輔助植物甾醇油酸酯的酶促催化合成
    UPLC-MS/MS法測定多裂翅果菊中植物甾醇的含量
    食品科學(2013年14期)2013-03-11 18:25:16
    狠狠狠狠99中文字幕| 在线观看免费日韩欧美大片| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 亚洲成国产人片在线观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 嫩草影视91久久| 国产成人系列免费观看| 午夜福利,免费看| 免费人成视频x8x8入口观看| 欧美一级毛片孕妇| 国产伦一二天堂av在线观看| 丁香欧美五月| 69av精品久久久久久| 99久久精品国产亚洲精品| 国产激情欧美一区二区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 男人的好看免费观看在线视频 | 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 日日夜夜操网爽| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美成人性av电影在线观看| 精品久久久久久成人av| 久久国产精品影院| 1024香蕉在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 国产99久久九九免费精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 色综合亚洲欧美另类图片| av视频在线观看入口| 性欧美人与动物交配| 一本综合久久免费| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 99国产综合亚洲精品| 国产国语露脸激情在线看| 怎么达到女性高潮| 国产高清视频在线播放一区| 国产精品日韩av在线免费观看 | 啦啦啦免费观看视频1| 成在线人永久免费视频| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产熟女xx| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲av美国av| 欧美日韩一级在线毛片| 一区二区三区国产精品乱码| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 桃色一区二区三区在线观看| 岛国在线观看网站| 国产一区在线观看成人免费| 中国美女看黄片| 日韩欧美在线二视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产私拍福利视频在线观看| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲在线自拍视频| 身体一侧抽搐| 精品久久久久久久毛片微露脸| 国产成人av教育| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 12—13女人毛片做爰片一| 国产欧美日韩精品亚洲av| 成年人黄色毛片网站| 中文字幕最新亚洲高清| 少妇粗大呻吟视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 少妇的丰满在线观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 丰满的人妻完整版| 亚洲成av人片免费观看| 中文字幕高清在线视频| 亚洲精品在线观看二区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 午夜久久久久精精品| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 午夜福利一区二区在线看| 中亚洲国语对白在线视频| √禁漫天堂资源中文www| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 日本 av在线| 亚洲国产欧美一区二区综合| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲久久久国产精品| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 我的亚洲天堂| 亚洲精品一区av在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| 桃色一区二区三区在线观看| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 啦啦啦免费观看视频1| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 亚洲色图综合在线观看| 久热爱精品视频在线9| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 十八禁网站免费在线| 高清毛片免费观看视频网站| 波多野结衣巨乳人妻| 国产男靠女视频免费网站| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 日韩欧美在线二视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 1024香蕉在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 激情在线观看视频在线高清| 婷婷六月久久综合丁香| 69精品国产乱码久久久| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 99精品久久久久人妻精品| 色综合婷婷激情| 精品久久久久久,| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久青草综合色| 自线自在国产av| 欧美激情高清一区二区三区| 级片在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 99国产综合亚洲精品| 大码成人一级视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产黄a三级三级三级人| 国产成人av教育| 国产免费男女视频| 亚洲片人在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 夜夜爽天天搞| 真人做人爱边吃奶动态| 日本 av在线| 国产色视频综合| 脱女人内裤的视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| 人成视频在线观看免费观看| 中文字幕最新亚洲高清| 日韩精品青青久久久久久| 精品国产乱码久久久久久男人| av中文乱码字幕在线| 亚洲七黄色美女视频| 成人18禁在线播放| 久久欧美精品欧美久久欧美| 18美女黄网站色大片免费观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产男靠女视频免费网站| 高清黄色对白视频在线免费看| 精品久久久久久成人av| 97碰自拍视频| 一级,二级,三级黄色视频| 人人澡人人妻人| 大型黄色视频在线免费观看| 免费搜索国产男女视频| 国产人伦9x9x在线观看| av天堂在线播放| 免费人成视频x8x8入口观看| 中文字幕高清在线视频| 1024香蕉在线观看| 国产成人av教育| 欧美国产精品va在线观看不卡| 一区二区日韩欧美中文字幕| 欧美日韩福利视频一区二区| 日韩国内少妇激情av| 精品久久久久久,| 亚洲国产欧美一区二区综合| www.熟女人妻精品国产| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产高清有码在线观看视频 | 黄片大片在线免费观看| 丝袜美足系列| 亚洲视频免费观看视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产私拍福利视频在线观看| 久久草成人影院| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲九九香蕉| 精品一区二区三区av网在线观看| 中文字幕人成人乱码亚洲影| bbb黄色大片| 色婷婷久久久亚洲欧美| 久久香蕉国产精品| 日本在线视频免费播放| 色在线成人网| 成年人黄色毛片网站| 精品久久久精品久久久| 久热这里只有精品99| 久9热在线精品视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 精品乱码久久久久久99久播| 久久草成人影院| 日本黄色视频三级网站网址| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 午夜久久久久精精品| 日韩精品青青久久久久久| 啪啪无遮挡十八禁网站| 一级毛片女人18水好多| 国产av一区二区精品久久| av福利片在线| 国产精品亚洲一级av第二区| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 亚洲精品国产色婷婷电影| 日韩免费av在线播放| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲av片天天在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲专区国产一区二区| 露出奶头的视频| 欧美中文综合在线视频| 国产野战对白在线观看| 亚洲成av人片免费观看| 国产免费男女视频| 国产精品九九99| 成人亚洲精品av一区二区| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 免费搜索国产男女视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 成人免费观看视频高清| 九色国产91popny在线| 老汉色∧v一级毛片| 精品国产美女av久久久久小说| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 97碰自拍视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 久久精品国产亚洲av高清一级| 我的亚洲天堂| 国产精品久久久人人做人人爽| 一进一出抽搐动态| 一边摸一边做爽爽视频免费| 成人免费观看视频高清| 一级毛片女人18水好多| 国产精品免费一区二区三区在线| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 亚洲精华国产精华精| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 日日干狠狠操夜夜爽| 黄片播放在线免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 一进一出抽搐动态| 老司机靠b影院| 欧美在线一区亚洲| 一本综合久久免费| 90打野战视频偷拍视频| 国内精品久久久久精免费| 久久国产乱子伦精品免费另类| 香蕉国产在线看| 成年版毛片免费区| 51午夜福利影视在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久狼人影院| 男人操女人黄网站| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲第一青青草原| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲伊人色综图| 亚洲五月婷婷丁香| 国产精品一区二区精品视频观看| av在线天堂中文字幕| 免费观看精品视频网站| 久久中文看片网| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久人人精品亚洲av| 国产熟女午夜一区二区三区| 九色亚洲精品在线播放| 久久精品国产亚洲av高清一级| 一区二区三区国产精品乱码| 黄色视频不卡| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产精品久久久久久精品电影 | 女性被躁到高潮视频| 视频区欧美日本亚洲| 天堂影院成人在线观看| 日本 av在线| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲伊人色综图| 后天国语完整版免费观看| 激情在线观看视频在线高清| 欧美成人性av电影在线观看| 99国产精品一区二区三区| 亚洲无线在线观看| 一级毛片高清免费大全| 美女高潮到喷水免费观看| 级片在线观看| 欧美午夜高清在线| 欧美一级a爱片免费观看看 | 亚洲美女黄片视频| 99久久精品国产亚洲精品| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 99在线视频只有这里精品首页| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 日本黄色视频三级网站网址| 日韩高清综合在线| 激情在线观看视频在线高清| 男女下面插进去视频免费观看| 国产亚洲精品一区二区www| 国产午夜精品久久久久久| 国产精品一区二区在线不卡| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产男靠女视频免费网站| 久99久视频精品免费| 亚洲三区欧美一区| 这个男人来自地球电影免费观看| 少妇 在线观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 在线观看舔阴道视频| 国产一区二区在线av高清观看| 欧美大码av| 久热这里只有精品99| 99久久综合精品五月天人人| 午夜福利18| 欧美日韩福利视频一区二区| 18禁观看日本| 在线观看日韩欧美| 午夜视频精品福利| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产高清视频在线播放一区| 久99久视频精品免费| 亚洲精品国产区一区二| 久久九九热精品免费| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 最近最新免费中文字幕在线| 成年版毛片免费区| 国产精品久久视频播放| 在线观看免费视频日本深夜| 高清毛片免费观看视频网站| 久久精品91蜜桃| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲一区中文字幕在线| 母亲3免费完整高清在线观看| 女性被躁到高潮视频| 国产伦人伦偷精品视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 99国产精品一区二区三区| 香蕉丝袜av| 91九色精品人成在线观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 一级毛片女人18水好多| 国产一区二区激情短视频| 国产99久久九九免费精品| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产精品电影一区二区三区| 国产一区二区在线av高清观看| 免费在线观看日本一区| 国产精品日韩av在线免费观看 | 国产高清有码在线观看视频 | 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产高清videossex| 欧美黑人精品巨大| 久久午夜综合久久蜜桃| 在线免费观看的www视频| 最新美女视频免费是黄的| 一区福利在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 在线观看免费视频日本深夜| 香蕉丝袜av| 亚洲一码二码三码区别大吗| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲国产欧美日韩在线播放| a级毛片在线看网站| 黑人操中国人逼视频| 国产一区二区三区视频了| 欧美成人性av电影在线观看| 久久久久久久久中文| 在线观看免费视频网站a站| 午夜精品在线福利| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产又色又爽无遮挡免费看| 中国美女看黄片| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 乱人伦中国视频| 久久久久国内视频| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 这个男人来自地球电影免费观看| 在线观看舔阴道视频| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲成国产人片在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 99国产精品一区二区蜜桃av| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 国产熟女午夜一区二区三区| 999精品在线视频| 99在线视频只有这里精品首页| 国产高清视频在线播放一区| 日本vs欧美在线观看视频| 午夜福利18| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 丁香欧美五月| 午夜久久久在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国产高清videossex| 精品乱码久久久久久99久播| 日日爽夜夜爽网站| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产熟女xx| 亚洲av第一区精品v没综合| 欧美激情久久久久久爽电影 | 日韩免费av在线播放| 精品一区二区三区四区五区乱码| 亚洲自拍偷在线| 成熟少妇高潮喷水视频| 1024香蕉在线观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲久久久国产精品| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产精品一区二区三区四区久久 | 日韩国内少妇激情av| 老司机福利观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 在线av久久热| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 高清在线国产一区| АⅤ资源中文在线天堂| 咕卡用的链子| 免费搜索国产男女视频| 欧美日韩黄片免| 精品熟女少妇八av免费久了| 久久人人精品亚洲av| 人妻久久中文字幕网| 丰满的人妻完整版| 可以在线观看毛片的网站| 成人亚洲精品一区在线观看| 超碰成人久久| a在线观看视频网站| 亚洲成人久久性| 亚洲欧美激情综合另类| 午夜a级毛片| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产一区二区激情短视频| 在线观看舔阴道视频| av视频在线观看入口| 女同久久另类99精品国产91| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 精品久久久久久久久久免费视频| 女性生殖器流出的白浆| 不卡av一区二区三区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 免费在线观看影片大全网站| 老司机午夜十八禁免费视频| 99re在线观看精品视频| 国产精品一区二区免费欧美| 成人免费观看视频高清| 岛国在线观看网站| 两性夫妻黄色片| 97碰自拍视频| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲激情在线av| 免费观看精品视频网站| 午夜福利免费观看在线| 日韩国内少妇激情av| 久久精品成人免费网站| 精品国产亚洲在线| bbb黄色大片| 免费少妇av软件| 91大片在线观看| 色综合站精品国产| 国产精品国产高清国产av| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲全国av大片| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲第一av免费看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久 | 一二三四在线观看免费中文在| 国产色视频综合| 精品人妻1区二区| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 搡老妇女老女人老熟妇| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 无人区码免费观看不卡| 国产又色又爽无遮挡免费看| 怎么达到女性高潮| 18禁美女被吸乳视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 99re在线观看精品视频| 怎么达到女性高潮| 久久人妻熟女aⅴ| 9热在线视频观看99| 好男人在线观看高清免费视频 | 国产高清有码在线观看视频 | 日日爽夜夜爽网站| 男女下面插进去视频免费观看| 妹子高潮喷水视频| 久久久国产成人精品二区| 亚洲成人国产一区在线观看| 看黄色毛片网站| 啪啪无遮挡十八禁网站| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 欧美成人免费av一区二区三区| 男女床上黄色一级片免费看| 中文字幕精品免费在线观看视频| 午夜福利视频1000在线观看 | 伦理电影免费视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 九色亚洲精品在线播放| 无人区码免费观看不卡| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国产1区2区3区精品| 亚洲av第一区精品v没综合| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国内精品久久久久久久电影| 国产精品久久久久久精品电影 | 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 丝袜美腿诱惑在线| 女同久久另类99精品国产91| 性少妇av在线| 黄片小视频在线播放| 香蕉久久夜色| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 久热这里只有精品99| 国产成人免费无遮挡视频| 免费搜索国产男女视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 欧美乱妇无乱码| 国产成人系列免费观看| 免费在线观看日本一区| 免费人成视频x8x8入口观看| 精品电影一区二区在线| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲av成人av| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 中亚洲国语对白在线视频| 黄色 视频免费看| 精品久久蜜臀av无| 国产欧美日韩精品亚洲av| 在线十欧美十亚洲十日本专区| www.www免费av| 久久人人精品亚洲av| 久久久久久久久免费视频了| 日本a在线网址| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲av美国av| 757午夜福利合集在线观看| 国产av又大| 午夜福利18| 精品国产乱子伦一区二区三区| 性色av乱码一区二区三区2| 丝袜在线中文字幕| 午夜成年电影在线免费观看| 久久久精品欧美日韩精品| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 青草久久国产| 精品电影一区二区在线| 女人精品久久久久毛片| 国产av在哪里看| 大码成人一级视频| 精品人妻1区二区| 老司机午夜福利在线观看视频| 美女午夜性视频免费| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 一a级毛片在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲色图综合在线观看| 长腿黑丝高跟| 亚洲av成人一区二区三| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 无人区码免费观看不卡| 欧美av亚洲av综合av国产av| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产成年人精品一区二区| 看片在线看免费视频| 国产精品av久久久久免费| 超碰成人久久| 国产精品久久视频播放| 老司机靠b影院| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 成人亚洲精品av一区二区| 国产一卡二卡三卡精品| 脱女人内裤的视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 9热在线视频观看99| 人成视频在线观看免费观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 精品久久久久久久久久免费视频| cao死你这个sao货| av中文乱码字幕在线| 国产人伦9x9x在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 九色国产91popny在线| 国产成人精品久久二区二区91| 波多野结衣高清无吗| 国产精品一区二区免费欧美| 色播亚洲综合网| 午夜影院日韩av| 丁香六月欧美| 大香蕉久久成人网| 美女午夜性视频免费| 亚洲午夜理论影院|