柞蠶蛹蟲草工廠化栽培技術(shù)

于興軍 安國(guó)中 李東興 吳 杰

（1北華大學(xué)林學(xué)院，吉林吉林132013；2吉林省梅河口市林業(yè)局，吉林梅河口135000；3北京首誠(chéng)農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，北京102402；4北京航天農(nóng)業(yè)生物科技有限公司，北京102447）

蛹蟲草，又名北蟲草、北冬蟲夏草。野生蛹蟲草是麥角菌科蟲草屬蛹蟲草菌（Cordyceps militaris）和鱗翅目大蠶蛾科柞蠶蛹（Antheraea pernyi）的共生體[1]。傳統(tǒng)醫(yī)書記載天然野生蛹蟲草具有補(bǔ)腎潤(rùn)肺的功能[2]，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究也表明了蛹蟲草含有蟲草素、蟲草多糖等活性成分[3-5]，具有提高免疫力、抗疲勞、保護(hù)心腦血管、抗癌等方面的作用[6-7]。近十余年來(lái)，在我國(guó)南北各地涌現(xiàn)出眾多蛹蟲草栽培基地，其中南方以人工培養(yǎng)基代料栽培為主，北方則以利用柞蠶蛹培育蛹蟲草為主。北京航天農(nóng)業(yè)生物科技有限公司經(jīng)過(guò)十年的努力，獨(dú)立設(shè)計(jì)并建成了國(guó)內(nèi)第一座柞蠶蛹蟲草工廠，實(shí)現(xiàn)了周年生產(chǎn)，取得了很好的經(jīng)濟(jì)效益。現(xiàn)將柞蠶蛹蟲草工廠化栽培技術(shù)總結(jié)如下。

1 生產(chǎn)環(huán)境

柞蠶蛹蟲草工廠化栽培要求生產(chǎn)場(chǎng)地內(nèi)外保持良好的環(huán)境條件，符合NY/T395—2000綠色食品產(chǎn)地環(huán)境技術(shù)條件的規(guī)定，生產(chǎn)場(chǎng)地遠(yuǎn)離工礦區(qū)、家禽家畜和其他動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)、垃圾場(chǎng)站、交通主干道等。

2 工廠化設(shè)施及設(shè)備

生產(chǎn)區(qū)分非凈化區(qū)和凈化區(qū)，墻體和屋頂均為凈化板結(jié)構(gòu)，地面為環(huán)氧地坪漆，非凈化區(qū)包括原料前處理車間、原料消毒車間、設(shè)備清洗車間和設(shè)備消毒車間等。凈化區(qū)包括接種車間、菌絲培養(yǎng)車間、搔菌車間、原基培養(yǎng)車間、出草車間、采收車間等，均為十萬(wàn)級(jí)凈化，各車間面積最大不超過(guò)60 m2，凈化區(qū)安裝凈化空調(diào)系統(tǒng)、新風(fēng)系統(tǒng)和臭氧消毒系統(tǒng)，凈化區(qū)安裝環(huán)境監(jiān)控器，自動(dòng)監(jiān)測(cè)車間內(nèi)的溫度、空氣相對(duì)濕度和CO2濃度，每個(gè)車間的溫度、濕度、換氣、凈化操作均可獨(dú)立控制。人員進(jìn)入凈化區(qū)須經(jīng)過(guò)更衣室和風(fēng)淋室，物品進(jìn)入凈化區(qū)，須經(jīng)過(guò)專用物流通道，經(jīng)過(guò)消毒間或消毒室消毒處理后方進(jìn)入。

主要生產(chǎn)設(shè)備：菌種培養(yǎng)基滅菌采用高壓滅菌鍋（上海博迅LS-75HJ）；原料蛹消毒采用臭氧機(jī)（北京博納筑圖BN-CFB-4K）；接種在標(biāo)準(zhǔn)的十萬(wàn)級(jí)20 m2凈化車間進(jìn)行，采用超凈工作臺(tái)（北京亞泰科隆BCL-1000B），接種小環(huán)境達(dá)到100級(jí)。

3 栽培技術(shù)要點(diǎn)

3.1 菌種與培養(yǎng)基配方

經(jīng)過(guò)多年的選育和試驗(yàn)，來(lái)源于吉林長(zhǎng)白山的CGMCC 7.302號(hào)菌株（保藏于中國(guó)微生物菌種保藏中心，保藏號(hào)為CGMCC 7.302）出草整齊、粗壯，適合工廠化栽培和市場(chǎng)要求。

液體菌種培養(yǎng)基配方：土豆200 g，葡萄糖20 g，磷酸二氫鉀3 g，七水硫酸鎂1.5 g，蛋白胨5 g，維生素B12片，定容1000 mL，調(diào)整pH為6.2。

3.2 柞蠶蛹的預(yù)處理

柞蠶蛹蟲草培養(yǎng)以活體柞蠶蛹為原料，帶繭的活體柞蠶蛹可以長(zhǎng)期保存于0～4℃的冷庫(kù)中。接種前一天，將帶繭的活體柞蠶蛹取出，剝繭、清水清洗、臭氧水清洗和消毒處理。消毒在專用蛹消毒車間，將清洗好的活體柞蠶蛹放入帶孔的塑料筐內(nèi)，把塑料筐擺放到貨架上，然后開啟空氣臭氧機(jī)消毒4 h（一般10 m2消毒車間配一臺(tái)4 g/h空氣臭氧機(jī)），空氣消毒機(jī)消毒結(jié)束到次日接種前保持消毒室封閉狀態(tài)。

3.3 接種

接種在專門的凈化接種車間，接種之前，要提前30 min開啟超凈工作臺(tái)的紫外消毒燈和吹風(fēng)系統(tǒng)。接種人員必須嚴(yán)格遵守凈化車間人員進(jìn)出消毒程序。待接種人員完成接種準(zhǔn)備工作后，接種輔助人員進(jìn)入消毒室，取出已經(jīng)消毒的柞蠶蛹（取出時(shí)要整筐取出，并用已消毒的報(bào)紙或牛皮紙蓋好），通過(guò)凈化通道運(yùn)至接種車間。接種人員在超凈工作臺(tái)上采用注射的方式人工接種，每只柞蠶蛹注入菌種量0.2～0.3 mL。接種輔助人員將接種后的柞蠶蛹整齊擺放到已消毒的培養(yǎng)盤中，并用已消毒的報(bào)紙或牛皮紙蓋好，通過(guò)凈化通道運(yùn)至菌絲培養(yǎng)車間。

圖1 柞蠶蛹蟲草工廠化栽培廠區(qū)布局

圖2 柞蠶培養(yǎng)蛹蟲草菌絲

圖3 柞蠶培養(yǎng)蛹蟲草子實(shí)體

3.4 發(fā)菌管理

將裝有已接種的柞蠶蛹的培養(yǎng)盤整齊擺放到菌絲培養(yǎng)車間的培養(yǎng)架上，用已消毒的報(bào)紙或牛皮紙蓋好，每個(gè)培養(yǎng)架6層，每層高40 cm，培養(yǎng)架之間間距70 cm，室內(nèi)溫度16～18℃，空氣相對(duì)濕度70%～80%，CO2濃度在1000 mg/L以下，保持室內(nèi)黑暗。

在開始培養(yǎng)的第3、6、9天分三次檢查并揀除壞蛹，揀除壞蛹時(shí)要盡量不弄破壞蛹，萬(wàn)一弄破壞蛹，則要用酒精棉對(duì)壞蛹周邊進(jìn)行徹底擦拭消毒處理。三次檢查完畢后，提高培養(yǎng)室溫度至20～22℃，空氣相對(duì)濕度70%～80%，CO2濃度在1000 mg/L以下，保持室內(nèi)黑暗，繼續(xù)培養(yǎng)6～7 d后，柞蠶蛹表面80%以上被白色菌絲覆蓋即完成菌絲培養(yǎng)。

3.5 搔菌

搔菌采用人工搓洗的方式，操作之前，搔菌人員須洗凈雙手帶醫(yī)用乳膠手套并用酒精消毒雙手，在流動(dòng)的無(wú)菌水下反復(fù)搓洗柞蠶蛹至大部分表面菌絲被破壞，然后裝入已消毒的培養(yǎng)瓶，并用已消毒的塑料膜封好瓶口。

3.6 原基培養(yǎng)期管理

將裝有已搔菌的柞蠶蛹的培養(yǎng)瓶整齊擺放到原基培養(yǎng)車間的培養(yǎng)架上，每個(gè)培養(yǎng)架6層，每層高40 cm，培養(yǎng)架之間間距70 cm。白天控制室內(nèi)溫度22～24℃，空氣相對(duì)濕度 70%～80%，CO2濃度在1000 mg/L以下，避免日光直接照射，每天用日光燈補(bǔ)光10～12 h，光照強(qiáng)度150 lx；夜間保持室內(nèi)溫度14～16℃，空氣相對(duì)濕度 70%～80%，CO2濃度在1000 mg/L以下，不補(bǔ)光。經(jīng)過(guò)一周左右，柞蠶蛹表面出現(xiàn)米粒狀的橘黃色菌蕾，即為蛹蟲草原基。

3.7 出草期管理

將已長(zhǎng)出蛹蟲草原基的培養(yǎng)瓶整齊擺放到出草車間培養(yǎng)架上，每個(gè)培養(yǎng)架6層，每層高40 cm，培養(yǎng)架之間間距70 cm。白天控制室內(nèi)溫度22～24℃，空氣相對(duì)濕度75%～85%，CO2濃度在1000 mg/L以下，避免日光直接照射，每天用日光燈補(bǔ)光10～12 h，光照強(qiáng)度300 lx；夜間保持室內(nèi)溫度18～20℃，空氣相對(duì)濕度75%～85%，CO2濃度在1000 mg/L以下，不補(bǔ)光。經(jīng)過(guò)一周左右，蛹蟲草子實(shí)體高度達(dá)到1 cm左右時(shí)，用牙簽將封瓶口的塑料膜扎5～6個(gè)洞，以利于內(nèi)外氣體交換，再經(jīng)過(guò)9～10 d，柞蠶蛹子實(shí)體高度達(dá)到8～12 cm，子實(shí)體頂端出現(xiàn)乳頭狀突起的子囊殼時(shí)，表明子實(shí)體成熟，即可采收。

4 采收、烘干與儲(chǔ)藏

柞蠶蛹蟲草從接種到成熟約需要38～40 d，待子實(shí)體頂端出現(xiàn)乳頭狀突起的子囊殼時(shí)，表明子實(shí)體成熟，此時(shí)應(yīng)在兩三天內(nèi)采收完。采收延遲會(huì)導(dǎo)致子實(shí)體過(guò)熟，表現(xiàn)在孢子囊開放并彈射孢子，采收延遲過(guò)久還有可能導(dǎo)致孢子二次萌發(fā)，出現(xiàn)氣生菌絲，影響產(chǎn)品品質(zhì)，甚至子實(shí)體腐爛。

采收時(shí)用已消毒的鑷子小心地將子實(shí)體和柞蠶蛹體保持連接狀態(tài)，一起從培養(yǎng)瓶中取出，擺放到干凈的烘干盤上，在35～45℃低溫真空干燥，出爐柞蠶蛹蟲草的含水量應(yīng)低于10%。烘干的子實(shí)體用薄膜袋密封后，放進(jìn)低溫干燥的倉(cāng)庫(kù)儲(chǔ)存待售。