自體脂肪干細胞的濃縮提取及在面部填充中的應用效果

張若冰 謝惠明 張杰

[摘要]目的：探討自體脂肪干細胞的濃縮提取技巧及在面部填充治療中的遠期效果和安全性。方法：2013年-2017年對38例顏面部凹陷或組織缺容的就醫(yī)者行自體脂肪干細胞移植填充矯治，術后隨訪評價矯治效果。結果：38例就醫(yī)者中，有33例接受了1次自體脂肪干細胞移植，5例進行了再次自體脂肪干細胞移植。術后隨訪時間為3～41個月，術后顏面部缺容及輪廓欠佳現象獲得顯著改善。未出現局部硬結、皮膚表面不平整、注射針孔瘢痕及色素沉著等不良反應。術后就醫(yī)者和醫(yī)師對效果的總有效率評價分別為94.7%和97.4%。結論：自體脂肪干細胞移植是一種安全、遠期療效理想的面部年輕化治療方式，嚴格遵照醫(yī)療規(guī)范及實驗室提取脂肪干細胞的提取方法操作，可以有效提高脂肪干細胞的移植成活率。

[關鍵詞]自體脂肪干細胞;凹陷填充;面部缺容;面部年輕化;注射

[中圖分類號]R622? ? [文獻標志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2019）08-0022-03

面部輪廓是否分明豐滿，除了骨骼因素以外，主要由面部皮下脂肪而定。一般來說，青少年至中年人群面部皮下脂肪豐滿，隨著年齡增長或因某些疾病甚至外傷導致面部皮下脂肪減少，顯得消瘦凹陷，從美學角度來說顯得老態(tài)或給人以滄桑感，這給愛美人士帶來了煩惱，自體脂肪移植修復可以讓消瘦或凹陷的臉龐恢復圓潤曲線，同時讓面部輪廓整體提升，顯年輕化[1]。2013年-2017年，無錫市第二中醫(yī)院醫(yī)學美容外科對38例就醫(yī)者應用自體脂肪干細胞行面部凹陷填充及輪廓修飾等面部年輕化的綜合矯治，取得了滿意的臨床療效?，F報道如下。

1? 資料和方法

1.1 臨床資料：本組共38例就醫(yī)者，其中女性34例，男性4例，年齡27～55歲，平均36.3歲;均已排除高血壓、冠心病等慢性病，排除面部皮膚感染（如痤瘡等），排除正在減肥者。其中33例接受了一次自體脂肪干細胞移植，5例接受了第二次脂肪干細胞移植。

1.2 器材設備：正壓潔凈臺—SW-CJ-2FD，高速冷凍離心機—TD5.5，冷凍生理鹽水。

1.3 方法

1.3.1 自體脂肪的提?。焊鶕歪t(yī)者主觀要求及自身條件，選擇上臂、腹部及大腿內側、外側作為供區(qū)并標記抽取脂肪的范圍[2]。常規(guī)供區(qū)腫脹麻醉，用0.9%生理鹽水500ml+2%鹽酸利多卡因40ml+腎上腺素1ml配成局麻腫脹液，用11號刀片在標記抽吸部位做3～5mm皮膚切口，選用2.8mm直徑的注水針，將一只手放在抽吸部位皮膚表面，可感覺到針的定位及腫脹程度，在標記抽吸供區(qū)范圍內均勻注射至腫脹發(fā)白，皮膚有“橘皮樣”外觀為止[3]。結束注射，輕按摩術區(qū)至腫脹液擴散均勻。麻醉成功后，用20ml注射器與4mm吸脂針沿切口插入皮下脂肪組織，吸脂針呈扇形均勻抽取深層脂肪，至足夠量。

1.3.2 脂肪干細胞的提取與濃縮：①將吸出來脂肪液連同注射器放入4℃～8℃生理鹽水中直立靜置3～5min，混合液為不同顏色的3層，上層為橘紅色的脂肪液體，中間層為淡黃色脂肪顆粒，下層為粉紅色的腫脹液和血液的混合液;②然后取出排去底層液體（轉移至正壓潔凈臺操作），把上兩層脂肪液及脂肪顆粒轉移至50ml離心管內，放入冷凍（4℃）離心機，400r/min離心2min，取出離心管，此時離心管出現兩層（見圖1），上層為淡黃色脂肪，底層為淡紅色腫脹液，用注脂針抽去底層腫脹液（見圖2）;③將獲得純脂肪顆粒轉移至50ml注射器內，再經過雙通脂肪乳糜器（見圖3），分別經3孔、5孔、9孔乳糜器將脂肪顆粒反復推送，直至脂肪完全乳糜粉碎。然后按每25ml乳糜脂肪加入23ml冰生理鹽水+2ml慶大霉素轉移至離心管內混勻，再置于冷凍離心機，以2 500r/min，離心5min;④離心后離心管內出現4層，最頂層為油脂性液體，第二層為破碎脂肪碎片及部分脂肪細胞及淋巴細胞，第三層為生理鹽水，管底一層為脂肪干細胞及少量紅細胞（見圖4）。吸去頂層破碎脂肪油脂，再吸去第三層生理鹽水，在吸去過程中動作要輕緩（50ml可濃縮提取7ml左右，見圖5）;⑤將留下乳糜脂肪及底層干細胞轉移至20ml注射器內，把獲得乳糜脂肪按每15ml加入慶大霉素4U國際單位，2%利多卡因3ml，用兩個注射器通過三通反復推送混勻（見圖6）。

1.3.3 自體脂肪干細胞面部注射移植：就醫(yī)者術前坐立位標記移植部位與范圍，根據缺容量用記號筆由疏至密的虛線標記。局部麻醉后，盡量在隱蔽部位用19G銳針刺破表皮，再用21G鈍針（圓頭）接于1ml注射器，在真皮下及骨膜上游離松解粘連，形成多個線狀腔隙。進針動作輕柔，以最小的壓力緩慢注射，注射前回抽觀察有無回血，避免進入血管，以退針注射方式進行注射，精確控制注入的脂肪量，注射部位的即時效果比周圍不移植部位略為飽滿即可，同時遵循注射量寧少勿多原則，一般注射量多于所需量的20%。同時注意區(qū)域之間的銜接，過渡要平緩自然[4]。注射后24h內輕柔按摩及適當冰敷，以使注射脂肪分布均勻。24h后禁持續(xù)按摩及熱敷，以免脂肪液化。

1.3.4 術后處理：供區(qū)用運動彈力膠布包扎3～5d，根據抽取脂肪量的多少、部位及范圍來決定是否需要穿塑身衣。顏面注射部位用小二退熱貼，避免局部擠壓及做夸張表情。預防性口服抗生素3d。

1.4 效果評估：評價標準遵循就醫(yī)者要求外，還遵循黃金分割定律、三庭五眼等規(guī)律，遵照對稱、均衡、和諧、完整等原則。術后4～6周就醫(yī)者、醫(yī)師及手術組護士結合術前標準照片進行對比評價，總有效率=（效果一般+效果理想）例數/總例數×100%。

2? 結果

本組共38例就醫(yī)者，單次脂肪干細胞移植總量為18～62ml，術后缺容及輪廓明顯改善。術后早期主要是瘀青腫脹，多數在5～7d左右消退，上瞼處及下瞼處相對消退較慢，個別患者就醫(yī)者需要2～3周方能全部消退。圍手術期未出現血腫及感染，未見脂肪液化及栓塞，注射針孔未見瘢痕及色素沉著，恢復自然，未見表情僵硬及局部硬結，未出現并發(fā)癥。大多數就醫(yī)者1次移植后效果滿意，個別就醫(yī)者對療效不滿意，于3個月后行第2次脂肪干細胞移植，從實驗室復蘇凍存脂肪干細胞，直接注射移植。就醫(yī)者及家屬評價有效率為94.7%，醫(yī)師及護士評價有效率為97.4%，具體情況見表1。

3? 典型病例

3.1 病例1：女，31歲，身高166cm，體重52kg。面部缺容特征：顳部凹陷、眉心部不飽滿，側面頰部凹陷，鼻基底及下眶骨緣凹陷扁平，面部整體輪廓不流暢，行自體脂肪干細胞移植，總共注射43ml脂肪干細胞。術后3個月自覺顳部不夠理想，行第2次自體脂肪干細胞移植，同時就醫(yī)者為追求美感，要求豐下頦，于下頦處注射1.5ml脂肪干細胞，一共注射13ml，兩次注射總量為56ml。面部立體感增強，面部輪廓流暢，顯年輕化。術后隨訪41個月，見圖7。

3.2 病例2：男，29歲，身高176cm，體重73kg。面部缺容特征：顳部、頰部凹陷。行自體脂肪干細胞移植，雙側顳部總注射量為18ml，術后5個月復診，自覺效果比較理想。面部輪廓流暢，較前年輕化。術后隨訪9個月，見圖8。

4? 討論

4.1 自體脂肪間充質干細胞及其臨床應用概述：面部組織隨著年齡的增長，會產生皮膚松弛、皮下膠原蛋白減少、脂肪顆粒減少、筋膜松弛、肌肉體積減少及彈性降低等現象，會出現軟組織容積減少，造成骨骼顯形，臉型由年輕時的“類鵝蛋形”變成“類菱形”，因組織減少及松弛緣故，面部輪廓呈現上小下大的橢圓形。隨著人們對美的追求，醫(yī)療美容技術的日臻完美，自體脂肪間充質干細胞逐漸應用于臨床。作為一種自體組織及可再生的填充材料，具有來源豐富、取材方便、操作簡單、仿生自然、安全無排異、預后效果好等優(yōu)點[5-7]。自體脂肪間充質干細胞移植不僅在改善面部輪廓方面發(fā)揮作用，而且還因為脂肪本身含有大量的細胞生長因子、抗自由基及抗氧化功能，再加上間充質干細胞具有多分化潛能，能根據組織需要主動歸巢，促進組織修復，具有改善皮膚組織光澤度，修復受損肌膚等起到抗衰作用。脂肪干細胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）具有多分化潛力，不僅能形成表皮細胞、骨和軟骨細胞、干細胞，還能分化形成心肌細胞、神經細胞、血管內皮細胞和血細胞等，在組織再生、組織器官修復方面也有著巨大潛力[8-10]。目前，自體脂肪移植已經成為安全、效果持久、用途廣泛的抗衰老微創(chuàng)外科方式。人體脂肪組織中除了含有已經定型的前脂肪細胞外，也包含具有多項分化潛能的細胞群—脂肪間充質干細胞[11-12]。

4.2 如何提高自體脂肪干細胞移植的成活率：由于自體脂肪移植后存在一定程度的吸收率。臨床觀察，根據就醫(yī)者的年齡、移植部位、移植體積及個體差異，自體脂肪吸收率約30%～90%，平均超過60%，如何減少移植后的吸收及預后效果成為脂肪干細胞移植的技術關鍵[13-14]。筆者結合在實驗室工作中脂肪干細胞的提取與培養(yǎng)體會總結如下：未分化的脂肪干細胞多數都存在于脂肪內外壁、脂肪組織筋膜等臨近組織中。采用冷凍離心能更好地保護脂肪干細胞的成活，低速短時間的第1次離心能很好保護細胞不被清洗離心掉。反復的雙通脂肪乳糜器過濾式破壁具有很好的粉碎脂肪顆粒的作用，能最大限度地把干細胞暴露出來，再經過高速離心，能很好地把脂肪干細胞沉淀下來。干細胞輔助脂肪移植，能夠分化為脂肪細胞，補充因損傷而減少的脂肪細胞數量，實現脂肪再生;同時可分化為血管內皮細胞，促進血管新生及血供恢復;通過旁分泌作用，釋放血管源性生長因子，調整組織局部微循環(huán)境等[15-17]。

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[收稿日期]2018-12-05

本文引用格式：張若冰，謝惠明，張杰.自體脂肪干細胞的濃縮提取及在面部填充中的應用效果[J].中國美容醫(yī)學，2019，28（8）：22-25.