394例疑似ABO新生兒溶血病實(shí)驗(yàn)結(jié)果研究分析

高楊 寧岡 韋海春

（柳州市婦幼保健院 廣西 柳州 545001）

新生兒溶血?。℉emolytic Disease of the Newborn，HDN）是一種相對常見的新生兒疾病。其主要是由于孕婦和胎兒之間的血型差異，兩者的部分血液交換致孕母血液產(chǎn)生針對胎兒紅細(xì)胞抗原的IgG血型抗體，發(fā)生免疫反應(yīng)，引起分娩前后胎兒紅細(xì)胞不同程度的溶血。導(dǎo)致新生兒黃疸、肝脾損害、貧血、高膽紅素血癥、嚴(yán)重感染等，嚴(yán)重時(shí)可引發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、膽紅素腦病、心衰甚至死亡[1]。臨床上由ABO血型不一致引起的新生兒溶血病遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他血型系統(tǒng)[2]。因此新生兒溶血病檢測實(shí)驗(yàn)對及早診斷和治療ABO新生兒溶血病（ABO-HDN）有重要意義。本文選擇2018年4月—12月期間394例懷疑為ABO-HDN的新生兒樣本的新生兒溶血病檢測結(jié)果進(jìn)行研究分析。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年4月—12月中394例懷疑為ABO血型不合新生兒溶血病患兒送檢樣本，對送檢性別、年齡、血型、直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)（簡稱直抗實(shí)驗(yàn)）、游離抗體實(shí)驗(yàn)（簡稱游離實(shí)驗(yàn)）、紅細(xì)胞抗體釋放實(shí)驗(yàn)（簡稱放散實(shí)驗(yàn)）等結(jié)果進(jìn)行研究分析。

1.2 儀器與試劑

新生兒血型鑒定檢測卡、抗人球蛋白檢測卡由長春博迅生物技術(shù)有限公司提供；ABO血型反定型試劑盒由長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供；血庫專用離心機(jī)KA-2200；FYQ型免疫微柱孵育器、TD-A型血型血清學(xué)用離心機(jī)由長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

1.3 方法

新生兒血型鑒定檢測卡做新生兒血型及直抗實(shí)驗(yàn)，抗人球蛋白檢測卡做游離實(shí)驗(yàn)和放散實(shí)驗(yàn)。所有檢測均嚴(yán)格按照國家臨床實(shí)驗(yàn)室程序和試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.4 結(jié)果判定

HDN三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中有二或三項(xiàng)陽性或只是放散實(shí)驗(yàn)陽性可診斷為HDN；單項(xiàng)直抗實(shí)驗(yàn)或游離實(shí)驗(yàn)陽性，判定為可疑HDN[3]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)用n（%）表示，卡方檢驗(yàn)用于組間比較，以P＜0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 本次統(tǒng)計(jì)的394例檢測結(jié)果中，證實(shí)為新生兒溶血病的有287例，檢出率為72.8%。直抗實(shí)驗(yàn)陽性檢出率占7.6%（30/394），游離實(shí)驗(yàn)陽性檢出率占53.0%（209/394），放散實(shí)驗(yàn)陽性檢出率占72.8%（287/394），放散實(shí)驗(yàn)在所有確診病例中均為陽性。放散實(shí)驗(yàn)分別與直抗實(shí)驗(yàn)、游離實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表。

表 不同性別、血型及年齡HDN三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性率比較[n（%）]

2.2 三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性檢出率女性均高于男性。男性確診率占69%（136/197）；女性確診率占76.6%例（151/197），兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性檢出率A型均高于B型。A型確診率占79.4%（143/180）；B型確診率占67.3%（144/214），兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.4 三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性檢出率≤7d組新生兒均高于＞7d組新生兒。≤7d組確診率占76.1%（268/352）；＞7d組確診率占45.2%（19/42），兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3.討論

本研究中，直抗實(shí)驗(yàn)陽性率明顯低于游離實(shí)驗(yàn)和放散實(shí)驗(yàn)陽性率，且其陽性強(qiáng)度多數(shù)較弱。由于血型抗原在新生兒紅細(xì)胞上表達(dá)較少，所以IgG抗體吸附量小，并且細(xì)胞被IgG抗體致敏后，大量溶解，致使直抗實(shí)驗(yàn)陽性檢出率降低。另外由于實(shí)驗(yàn)用的紅細(xì)胞懸液濃度只有0.8%，被稀釋度較大，致紅細(xì)胞量較少，也是引起直抗實(shí)驗(yàn)陰性率高的原因之一。有研究[4]表明直抗實(shí)驗(yàn)陽性強(qiáng)度可初步區(qū)分ABO-HDN和Rh-HDN，前者大多陽性強(qiáng)度較弱，多為1+左右，后者陽性強(qiáng)度多為2+以上。直抗實(shí)驗(yàn)陽性只說明IgG類抗體已致敏新生兒紅細(xì)胞，但還不能診斷為ABO-HDN[5]，對抗體的特異性，需結(jié)合臨床資料、游離實(shí)驗(yàn)和放散實(shí)驗(yàn)等證實(shí)。

游離實(shí)驗(yàn)作為ABO-HDN的參考實(shí)驗(yàn)，單項(xiàng)陽性只能判為“可疑”，僅指示新生兒血漿中有IgG抗體的存在，這些抗體能否致敏胎兒紅細(xì)胞還要依賴于抗體的滴度和親和力，以及紅細(xì)胞上的抗原結(jié)構(gòu)和數(shù)量[6]。當(dāng)進(jìn)入到胎兒體內(nèi)IgG免疫抗體的量小，且全部吸附到紅細(xì)胞上時(shí)，血漿游離抗體實(shí)驗(yàn)可呈陰性，因此游離抗體實(shí)驗(yàn)陰性也不可輕易排除患兒患ABO-HDN的可能性，還需結(jié)合直抗實(shí)驗(yàn)和放散實(shí)驗(yàn)加以判斷。游離實(shí)驗(yàn)對病情病程和嚴(yán)重程度有提示作用，其陽性患兒病程多較長，也較嚴(yán)重，因?yàn)橹旅艏t細(xì)胞被破壞后，骨髓造血系統(tǒng)新生成的紅細(xì)胞可與血漿中過量的游離抗體結(jié)合，繼續(xù)破壞紅細(xì)胞，導(dǎo)致病程延長[7]。

放散實(shí)驗(yàn)陽性率顯著高于其他兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)（P＜0.05）。直抗實(shí)驗(yàn)和放散實(shí)驗(yàn)都是檢測致胎兒敏紅細(xì)胞上的血型免疫抗體，放散實(shí)驗(yàn)的陽性檢出率卻明顯高于直抗實(shí)驗(yàn)，是因?yàn)榉派?shí)驗(yàn)使用未稀釋的圧積紅細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于直抗實(shí)驗(yàn)，其通過特殊放散液將大量致敏紅細(xì)胞上的免疫抗體從紅細(xì)胞上釋放、濃縮到放散液中，由此達(dá)到更高的敏感性和特異度。因此，放散實(shí)驗(yàn)成為ABO-HDN最重要的指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢出陽性即可明確診斷為ABO-HDN[8]。

三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，女性患兒陽性率均高于男性陽性率，但兩者確診率比較，卻不具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），即本研究未發(fā)現(xiàn)性別與ABO-HDN患病率有相關(guān)性。但有其他研究報(bào)道[9]與本次研究結(jié)果不符，究其原因可能是新生兒性別因地域不同而造成的分布差異所致。

A型患兒陽性率均高于B型患兒，且兩者確診率比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。其原因有可能是由于新生兒紅細(xì)胞表面A抗原決定簇多于B抗原決定簇，免疫原性A抗原強(qiáng)于B抗原，更易誘導(dǎo)免疫應(yīng)答所致[10]。但是血型在不同地域之間的分布差異，仍可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不同，發(fā)病率也因此不盡相同，不能一概而論。

年齡≤7d的患兒各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性率明顯大于年齡＞7d的患兒，兩組確診率相比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明檢出陽性率隨時(shí)間推移降低,其原因是患兒出生后致敏紅細(xì)胞不斷被破壞,血中的游離抗體也不斷隨時(shí)間推移被消耗而破壞紅細(xì)胞,紅細(xì)胞大量減少,最終導(dǎo)致陽性檢出率降低。另外臨床癥狀也有可能隨著患兒年齡天數(shù)的增加而逐漸消退，令真正的新生兒溶血病漏檢[11]。

本院作為一家三級甲等婦女兒童醫(yī)院，入院進(jìn)行產(chǎn)檢及分娩的孕產(chǎn)婦較多。在臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)多次妊娠的孕婦正常分娩后新生兒溶血病的發(fā)生率明顯高于初次妊娠的孕產(chǎn)婦。因?yàn)槎啻稳焉锏脑袐D反復(fù)接觸胎兒的紅細(xì)胞抗原刺激，產(chǎn)生高滴度的IgG抗A和抗B抗體，使免疫應(yīng)答效應(yīng)增強(qiáng)，導(dǎo)致新生兒溶血病的發(fā)病率增高[12]。因此，在妊娠期間詳細(xì)了解母親既往的血型抗原接觸史和檢測母親血清中的免疫性抗A和抗B抗體，對預(yù)測新生兒是否會發(fā)生ABO血型不合溶血病有較大價(jià)值。

綜上所述，新生兒溶血病三項(xiàng)檢測實(shí)驗(yàn)中放散實(shí)驗(yàn)是診斷價(jià)值最高的實(shí)驗(yàn)。A型患兒比B型患兒的ABO-HDN患病率要高，但要考慮地域分布差異。新生兒性別對ABO-HDN患病率影響無意義。出生前，可對妊娠期孕婦做產(chǎn)前免疫抗體效價(jià)檢測，有助于在早期采取有效的防治措施，降低發(fā)病率。出生后懷疑為新生兒溶血病的患兒要盡早送檢標(biāo)本進(jìn)行新生兒溶血病檢測，以免耽誤病情，提高治療效率。