慢性粒細(xì)胞白血?。▋和?28例染色體核型分析

王金

［鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院（河南省兒童醫(yī)院、鄭州兒童醫(yī)院） 兒研所，河南 鄭州 450018］

慢性粒細(xì)胞白血病在青少年及兒童中較為少見(jiàn)，病因也尚未完全清楚。近年來(lái)，發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，一旦發(fā)病對(duì)患兒的身心健康影響巨大，故需引起足夠的重視［1-3］。慢性粒細(xì)胞白血病病程一般較長(zhǎng)，其生存期普遍在3～5年間，而且對(duì)放化療均高度抗拒，多經(jīng)伊馬替尼等藥物治療，治療難度較大，而分析核型有助于了解病情嚴(yán)重程度，判斷預(yù)后情況。本次研究選擇2014年2月至2017年1月在本院接受治療的慢性粒細(xì)胞白血病患者128 例，均經(jīng)由骨髓及外周血液樣本經(jīng)培養(yǎng)后，采用R 顯帶技術(shù)分析染色體核型；急變期積極治療者隨訪6 個(gè)月，以6 個(gè)月內(nèi)患者死亡或6個(gè)月為隨訪截止，獲得一定研究成果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究選擇 2014年 2月至 2017年1月在本院接受治療的慢性粒細(xì)胞白血病患者128 例，對(duì)照組，男89 例（69.53%），女39 例（30.47%），年齡3～12 歲，平均（8.75±1.16）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①入院后均接受血尿常規(guī)、骨髓穿刺等檢查，結(jié)合臨床表現(xiàn)，明確慢性粒細(xì)胞白血病診斷；②年齡均≤12 歲；③意識(shí)清楚，無(wú)精神系統(tǒng)疾病，人格認(rèn)知均正常；④所有患者、法定監(jiān)護(hù)人均對(duì)本次研究?jī)?nèi)容知情同意，自愿參與，并同醫(yī)院簽訂知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①除慢性粒細(xì)胞性以外其他類(lèi)型白血??；②重要臟器嚴(yán)重疾病者；③依從性較差者；④傳染性疾病，除血液系統(tǒng)以外其他臟器或系統(tǒng)惡性疾病。

1.2 方法

所有慢性粒細(xì)胞患者均在空腹?fàn)顟B(tài)下抽取外周靜脈血細(xì)胞樣本，并擇期抽取骨髓樣本，均經(jīng)1～2 d 短期培養(yǎng)，經(jīng)秋水酰胺處理、固定等一系列步驟后，在R 顯帶及染色后，利用顯微鏡觀察并分析核分裂像，參考《人類(lèi)細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名體制（ISCN1995）》描述染色體核型以及核異常者。其中骨髓活檢方法如下：常規(guī)皮膚消毒，取患兒髂前或髂后上棘，局麻后，經(jīng)骨髓穿刺針通過(guò)兩步法抽取骨髓樣本；骨髓樣本處理后，以無(wú)擠壓、至少包含3 個(gè)骨小梁間區(qū)、20 個(gè)分裂像為標(biāo)準(zhǔn)判斷合格樣本［4-5］。明確診斷后積極化療者，觀察并分析治療效果、治療后6 個(gè)月隨訪情況。其中，ISCN （International System for Human Cytogenetic Nomenclature）為人類(lèi)染色體命名國(guó)際規(guī)則。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察指標(biāo)包括pH 檢測(cè)結(jié)果，變異型核型分布，染色體核型演變情況，以及其中包含的急變期患者、慢性期患者及加速期患者例數(shù)及所占比例；部分患者積極化療，觀察并分析治療效果（完全緩解標(biāo)準(zhǔn)為無(wú)pH 陽(yáng)性細(xì)胞，白細(xì)胞計(jì)數(shù)＜10×109/L，血紅蛋白≥100 g/L，無(wú)效標(biāo)準(zhǔn)為白細(xì)胞及血紅蛋白均未見(jiàn)明顯變化，部分緩解標(biāo)準(zhǔn)為介于完全緩解及無(wú)效標(biāo)準(zhǔn)之間）；隨訪6 個(gè)月，以6 個(gè)月內(nèi)患者死亡或6 個(gè)月為隨訪截止。其中，慢性粒細(xì)胞白血病不同染色體分期診斷參考《WHO關(guān)于慢性骨髓增殖性疾病的分類(lèi)和診斷標(biāo)準(zhǔn)》［6］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本次研究以EXCEL 軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以百分比（%）表示，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 慢性粒細(xì)胞白血病染色體分期核型演變情況分布

128 例慢性粒細(xì)胞白血病患者中包含pH 陽(yáng)性者 115 例（89.84%），pH 染色體陰性者 13 例（10.16%）；而pH陽(yáng)性者中，變異型8例（6.96%），染色體核型演變者25 例（21.74%），包括急變期20 例、慢性期4 例及加速期1 例；附加染色體結(jié)構(gòu)異常者25 例，包括單純結(jié)構(gòu)及數(shù)量異常者各 7 例、6 例，其他異常者 12 例。見(jiàn)表1、2。

表1 染色體分期核型演變情況及附加染色體情況分布

表2 染色體不同分期與染色體異常附加情況分布 例（%）

2.2 慢性粒細(xì)胞白血病治療效果及隨訪情況

急變期29 例中積極化療者10 例，完全緩解者4 例，部分緩解1 例，治療無(wú)效者5 例（均染色體復(fù)雜異常），治療后6 個(gè)月內(nèi)死亡1 例。

3 討論

白血病是一種造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，嚴(yán)重者可導(dǎo)致患者死亡。白血病可分為急性白血病以及慢性白血病，根據(jù)其疾病特點(diǎn)不同而分為淋巴細(xì)胞性白血病、粒細(xì)胞性白血病等疾病，男性患者偏多。而慢性粒細(xì)胞白血病源于多能干細(xì)胞，其病變主要涉及髓系粒細(xì)胞以及外周血液循環(huán)粒細(xì)胞，以粒細(xì)胞異常惡性增多、不成熟及脾大為主要臨床特征，屬于獲得性異常，其特征性標(biāo)志為pH 染色體，即費(fèi)城染色體［9 號(hào)染色體易位至 22 號(hào)，即t（9；22）（q34；q11.2）］，可分為3 個(gè)不同亞型，蛋白編碼分別為P210 蛋白、P230 蛋白及 P190 蛋白［7-8］。而且 pH 染色體在慢性粒細(xì)胞白血病與骨髓增生異常綜合征的鑒別診斷方面具有良好的臨床價(jià)值［9］。相關(guān)研究多認(rèn)為白血病患者染色體核型與病情嚴(yán)重程度、預(yù)后之間存在緊密關(guān)聯(lián)，這表明分析染色體核型對(duì)評(píng)估病情、判斷預(yù)后具有良好的臨床價(jià)值［10-12］。

本次研究中，128 例慢性粒細(xì)胞白血病患者中pH 陽(yáng)性率89.84%、陰性率10.16%；提示慢性粒細(xì)胞白血病中pH 陽(yáng)性率較高，不僅證實(shí)上述觀點(diǎn)，還可將慢性粒細(xì)胞白血病分為pH 陽(yáng)性、pH陰性，兩個(gè)不同類(lèi)型。在慢性粒細(xì)胞白血病病變過(guò)程中存在不同時(shí)期，即慢性期，加速期及急變期，pH 陽(yáng)性在不同時(shí)期內(nèi)普遍存在。而pH 陽(yáng)性者中，變異型比例6.96%，染色體核型演變者發(fā)生率21.74%，包括急變期68.97%、慢性期4.17%及加速期33.33%；其中以急變期比例最高；這表明pH 陽(yáng)性+染色體核型演變意味著慢性粒細(xì)胞白血病病情進(jìn)展速度變快，而且隨著病情的加重，染色體核型演變率逐漸提高，故了解慢性粒細(xì)胞白血病染色體核型及附加染色體情況，有助于分析病情嚴(yán)重程度。在急變期29 例中積極化療者10 例，完全緩解者4 例，治療無(wú)效者5 例，治療后6 個(gè)月內(nèi)死亡1 例；而治療無(wú)效者中均為附加其他類(lèi)型，即染色體復(fù)雜附加者；提示染色體附加情況與治療效果、預(yù)后之間存在一定的關(guān)聯(lián)。本文并未就BCR-ABL（P210）融合基因、典型易位與復(fù)雜易位進(jìn)行詳細(xì)研究，且樣本量較小，研究時(shí)間較短，故具有一定的局限性。

總之，慢性粒細(xì)胞白血病核型與判斷白血病患者預(yù)后之間存在一定關(guān)聯(lián)，而附加染色體的復(fù)雜程度越高，提示該患者預(yù)后可能越差。