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    谷子NCED基因家族鑒定及其干旱脅迫響應(yīng)表達(dá)模式分析

    2019-08-13 08:55:35程鴻燕郭昱馬芳芳
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019年1期
    關(guān)鍵詞:干旱脅迫生物信息學(xué)表達(dá)

    程鴻燕 郭昱 馬芳芳

    摘要:基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析并結(jié)合谷子基因組數(shù)據(jù)庫鑒定出10個(gè)候選NCED基因,對它們的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、理化性質(zhì)、啟動子元件功能等進(jìn)行分析,并以抗旱(GG)和干旱敏感谷子品種(JF16)為材料,對PEG脅迫前后差異基因的表達(dá)特點(diǎn)進(jìn)行分析。結(jié)果表明,谷子中編碼NCED家族基因啟動子中含較多與抗旱脅迫相關(guān)的功能元件;經(jīng)PEG脅迫處理后,Seita.2G035400在GG和JF16中表達(dá)量均上調(diào),但上調(diào)幅度有所差異。該研究結(jié)果進(jìn)一步加強(qiáng)了對植物NCED基因家族的了解,也為后續(xù)進(jìn)行谷子抗旱機(jī)制和抗旱分子育種提供了理論借鑒依據(jù)。

    關(guān)鍵詞:谷子;NCED家族基因;干旱脅迫;表達(dá);生物信息學(xué)

    中圖分類號: S515.01 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2019)01-0040-04

    谷子[Setaria italica (L.) P. Beauv.]是禾本科狗尾草屬的糧草兼用作物,最早被馴化種植于中國北方,已有8 700多年的栽培史[1],其營養(yǎng)價(jià)值高,富含人體所需的類胡蘿卜素、氨基酸、葉酸和硒等成分[2],至今仍被譽(yù)為“五谷之首”。谷子葉面積小、自花授粉、蒸騰效率和水分利用效率高,具有耐干旱、耐貧瘠特性[3]。但是近年來,隨著全球氣候變暖,可利用水資源日趨匱乏,干旱成為制約作物正常生長發(fā)育的關(guān)鍵因素之一。

    發(fā)掘谷子耐旱基因,了解其基因家族在干旱脅迫條件下的表達(dá)模式,對谷子抗旱新品種選育具有極為重要的指導(dǎo)作用。作物在干旱、鹽堿、低溫、凍害等非生物脅迫條件下,可通過自身調(diào)節(jié)來適應(yīng)或抵制這些脅迫[4-5]。脫落酸(abscisic acid,ABA)作為一種植物激素,是一種極為重要的逆境信號,不僅在植物生長發(fā)育過程不同階段起重要作用,而且在干旱、低溫、衰老、鹽漬等多種逆境響應(yīng)中起著重要調(diào)控作用,可通過介導(dǎo)葉片氣孔關(guān)閉過程來抵御干旱脅迫[6-7]。

    9-順式-環(huán)氧類胡蘿卜素雙加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase,NCED)屬于類胡蘿卡素雙加氧裂解酶 (carotenoid cleavage dioxygenases,CCDs)家族成員,被認(rèn)為是高等植物ABA生物合成過程中最重要的限速酶,有研究表明其表達(dá)量與植物體內(nèi)ABA含量呈正相關(guān)[8-10]。編碼NCED的基因最初是從玉米突變體viviparousl4(vpl4)中被克隆[11],隨后在其他植物如番茄[12]、豇豆[13]、擬南芥[8,14]、柱花草[15]等中也克隆得到了NCED基因。近年來,我國在NCED響應(yīng)小麥、擬南芥、花生、煙草、水稻等作物干旱脅迫的研究中發(fā)現(xiàn),干旱脅迫可以誘導(dǎo)NCED基因表達(dá)和內(nèi)源ABA的積累,且在一定范圍內(nèi),該基因表達(dá)與ABA積累隨脫水延長而明顯增強(qiáng)[16-20],這說明NCED基因在提高植物抗旱能力方面具有重要研究價(jià)值。

    谷子是重要的抗逆模式作物,目前,尚無對谷子中NCED家族進(jìn)行系統(tǒng)研究的相關(guān)報(bào)道,干旱脅迫下谷子NCED基因家族情況及其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和表達(dá)特征并不明晰。本研究以耐旱品種勾勾母雞咀(GG)和干旱敏感品種晉汾16(JF16)為試驗(yàn)材料,在人工氣候室模擬晝夜條件對其進(jìn)行培養(yǎng),于苗期進(jìn)行20%聚乙二醇6000(PEG-6000)模擬干旱處理后取材,用于表達(dá)譜測序。從中找到抗旱相關(guān)基因NCED后,利用生物信息學(xué)方法從谷子基因組數(shù)據(jù)庫中鑒定同源NCED基因,并系統(tǒng)分析其基因家族成員的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、理化特性、啟動子調(diào)控元件、進(jìn)化關(guān)系以及該基因家族成員在干旱脅迫下的表達(dá)特點(diǎn),旨在為進(jìn)一步研究谷子抗旱分子育種提供有用信息。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    本試驗(yàn)所用植物材料為耐旱性品種勾勾母雞咀(GG)和干旱敏感性品種晉汾16(JF16),均由山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)生物工程研究所提供。將這2個(gè)品種種植在混合均勻的基質(zhì)(營養(yǎng)土 ∶ 蛭石=3 ∶ 1)上,然后將其放于人工氣候室,模擬外界晝夜條件進(jìn)行14 h光培養(yǎng)(28 ℃)和10 h暗培養(yǎng)(23 ℃),出苗培養(yǎng)21 d后,將2個(gè)品種谷子幼苗用一定量的20% PEG-6000模擬干旱脅迫處理0.5 h,而對照組幼苗用同等量的蒸餾水處理相同時(shí)間。之后在對照組和處理組中的每個(gè)品種中分別隨機(jī)取出3株幼苗,進(jìn)行RNA提取和表達(dá)譜測序。

    1.2 試驗(yàn)方法

    根據(jù)表達(dá)譜測序結(jié)果查詢到NCED基因名,并通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)和代謝途徑,明確其注釋功能;利用Phytozome v 12.1(https://phytozome.jgi.doe.gov/pz/portal.html)基因組數(shù)據(jù)庫進(jìn)行搜索,查找NCED基因家族信息。利用GSDS 2.0(http://gsds.cbi.pku.edu.cn/)軟件進(jìn)行基因結(jié)構(gòu)分析;利用ExPASY(https://web.expasy.org)軟件對谷子NCED基因家族的蛋白質(zhì)分子量和理論等電點(diǎn)等理化性質(zhì)進(jìn)行預(yù)測分析;利用PlantCARE(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/)預(yù)測谷子NCED基因家族啟動子(基因上游1 500 bp序列)相關(guān)元件并進(jìn)行統(tǒng)計(jì);采用MAGA 7.0軟件對谷子NCED蛋白及擬南芥、水稻、小麥和玉米等近源物種中NCED蛋白構(gòu)建進(jìn)化樹,進(jìn)行親緣關(guān)系比對。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 谷子NCED基因的基本信息及結(jié)構(gòu)分析

    在Phytozome v12.1的谷子數(shù)據(jù)庫中找到10個(gè)NCED家族基因,并對其基本信息(染色體位置、CDS序列和氨基酸序列)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn),谷子NCED家族基因分布在不同的染色體上,其中1號、4號和9號染色體上各包含1個(gè)成員,2號和3號染色體上各包含2個(gè)成員,5號染色體上的NCED家族基因最多,為3個(gè)(表1)。谷子NCED家族基因CDS序列的平均長度為1 773 bp,不同成員的CDS序列長度之間也存在差異,其中Seita. 9G156500的CDS序列最長,為1 965 bp;Seita. 3G408300的CDS序列最短,為1 638 bp(表1)。

    為進(jìn)一步分析谷子NCED家族基因的結(jié)構(gòu)特征,使用GSDS 2.0軟件對NCED家族成員的基因序列和CDS序列進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析,結(jié)果顯示,NCED家族不同成員之間的結(jié)構(gòu)存在較大差異,其中Seita. 2G035400和Seita. 3G391000具有相同的結(jié)構(gòu),都沒有內(nèi)含子和上下游,只有編碼區(qū)序列;其余8個(gè)基因都含有內(nèi)含子和編碼區(qū)序列,但數(shù)目差異較大,并且Seita. 1G288400和Seita. 4G062800與其余6個(gè)基因結(jié)構(gòu)差異更大,未發(fā)現(xiàn)上下游結(jié)構(gòu)(圖1)。

    2.2 谷子NCED理化性質(zhì)

    根據(jù)豫谷1號NCED的cDNA序列預(yù)測到的氨基酸序列可知,谷子NCED家族基因氨基酸序列的平均長度為590 aa,而不同成員的氨基酸序列長度之間存在差異,其中Seita. 9G156500的氨基酸序列最長,為654 aa;Seita. 3G408300的氨基酸序列最短,為545 aa(表1)。蛋白質(zhì)分子量在 60 585.91~70 862.56 ku之間,平均值為64 656.88 ku,其中Seita. 9G156500的蛋白質(zhì)分子量最大(70 862.56 ku),Seita. 5G315700的蛋白質(zhì)分子量最?。?0 585.91 ku);等電點(diǎn)介于5.81(Seita. 4G062800)~7.66(Seita. 5G315700)之間,均值為6.37,并且除Seita. 5G315700的蛋白質(zhì)等電點(diǎn)呈弱堿性外,其余9個(gè)均呈酸性,可見它們發(fā)揮其最大催化活性的最適pH值有所差異(表1)。

    2.3 谷子NCED基因家族系統(tǒng)進(jìn)化樹

    為進(jìn)一步分析谷子NCED基因家族之間及其與其他植物NCED之間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近,了解其進(jìn)化過程,將所得到的谷子NCED基因編碼的蛋白序列與其他物種(水稻、玉米、高粱、擬南芥、大麥、小麥和狗尾草)進(jìn)行BLAST蛋白同源性檢索,并下載其他物種的NCED蛋白序列,之后將其與谷子NCED基因家族成員進(jìn)行比對,并構(gòu)建進(jìn)化樹(圖2)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),谷子NCED基因家族中,Seita. 5G315800、Seita. 5G315600和Seita. 5G315700單獨(dú)聚為一大類,暗示這3個(gè)基因雖然與谷子中一些基因親緣關(guān)系較近,但在進(jìn)化過程中它們所編碼的蛋白序列存在較多氨基酸變異位點(diǎn);而其余7個(gè)基因與其他7個(gè)物種的NCED聚為一大類,說明谷子的這7個(gè)基因親緣關(guān)系較近,并且在這一大類中,谷子Seita. 2G035400與狗尾草中NCED基因 (Sevir. 2G040100)是相同的,它們與高粱的NCED親緣關(guān)系最近,與水稻、小麥的親緣關(guān)系次之;谷子Seita. 9G156500與大麥NCED的親緣關(guān)系最近;谷子Seita. 3G391000與玉米NCED的親緣關(guān)系最近;而Seita. 9G156500和Seita. 3G391000與擬南芥NCED的親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近各次于大麥和玉米。這一結(jié)果與植物經(jīng)典分類結(jié)果相一致。

    2.4 谷子NCED家族基因啟動子調(diào)控元件功能分析

    通過PlantCARE軟件對谷子NCED家族基因啟動子(基因上游1 500 bp)順式作用元件進(jìn)行功能預(yù)測,有利于進(jìn)一步鑒定該家族基因在谷子抗旱機(jī)制中所起的作用。本研究主要對激素響應(yīng)元件和逆境脅迫響應(yīng)元件進(jìn)行了統(tǒng)計(jì),結(jié)果(表2)表明,每個(gè)基因啟動子中均含有厭氧誘導(dǎo)響應(yīng)元件,有部分基因啟動子中含有低溫響應(yīng)和熱響應(yīng)元件;除基因Seita. 5G315600外,其余9個(gè)基因啟動子中均含有ABA響應(yīng)元件;除基因Seita. 9G156500、Seita. 1G288400和Seita. 3G408300外,其余7個(gè)基因均含有MeJA響應(yīng)元件,并且Seita. 5G315800中最多(為12個(gè));有5個(gè)基因啟動子中含有SA響應(yīng)元件,它們分別是Seita. 3G391000、Seita. 3G408300、Seita. 2G174500、Seita. 5G315600和Seita. 5G315700;除基因Seita. 2G035400、Seita. 9G156500和Seita. 2G174500外,其余7個(gè)基因啟動子中均含有GA響應(yīng)元件,并且Seita. 4G062800中最多(為3個(gè));有5個(gè)基因啟動子均含有MYB響應(yīng)元件,它們分別是Seita. 9G156500、Seita. 3G391000、Seita. 2G174500、Seita. 5G315800和Seita. 5G315600。

    2.5 谷子NCED家族基因成員在干旱脅迫下的表達(dá)模式

    對谷子幼苗進(jìn)行干旱脅迫處理后,根據(jù)表達(dá)譜測序結(jié)果,對勾勾母雞咀和晉汾16中NCED基因表達(dá)量進(jìn)行分析,這2個(gè)品種中均含有Seita.2G035400基因。從圖3中可以看出,GG和JF16經(jīng)不同處理后其體內(nèi)Seita.2G035400基因均有表達(dá),并且經(jīng)干旱脅迫處理后該基因的表達(dá)量與對照相比均升高,但該基因在干旱敏感性品種JF16中表達(dá)量增幅明顯高于在耐旱品種GG中表達(dá)量增幅(圖3)。

    3 討論與結(jié)論

    脫落酸ABA與植物生長發(fā)育調(diào)控、氣孔開閉以及對逆境適應(yīng)和抵御之間關(guān)系密切,是一種尤為重要的激素調(diào)節(jié)物質(zhì)[21-22]。因此,有必要分析ABA生物合成關(guān)鍵基因,明確其家族基因結(jié)構(gòu)與功能,掌握其在ABA生物合成中所起作用,進(jìn)而通過調(diào)控植物體內(nèi)ABA含量來達(dá)到植物自身生理調(diào)控目的。NCED基因就是參與ABA生物合成調(diào)控的一類關(guān)鍵基因[9]。

    從谷子NCED家族基因啟動子元件功能預(yù)測發(fā)現(xiàn),有很多調(diào)控元件與植物干旱脅迫響應(yīng)物質(zhì)有關(guān),如ABRE和motif IIb(CCGCCGCGCT)是ABA響應(yīng)元件,而ABA可通過調(diào)節(jié)氣孔開閉或者促進(jìn)根系對水分吸收等途徑來調(diào)控植物對干旱脅迫的適應(yīng)性,Neill等研究認(rèn)為,ABA是植物的抗逆誘導(dǎo)因子[23];CGTCA-motif和TGACG-motif為茉莉酸甲酯(methyl-jasmonate,MeJA)響應(yīng)元件,而研究報(bào)道MeJA在代謝和生理調(diào)控上類似于植物激素脫落酸的作用[24],它可以提高作物抗旱性[25];TCA-element是水楊酸(salicylic acid,SA)響應(yīng)元件,水楊酸是植物內(nèi)源信號分子之一,可通過減少植物體內(nèi)細(xì)胞自由基積累和減輕細(xì)胞膜脂過氧化等途徑來緩解干旱脅迫對植物自身的影響。陶宗婭等通過對干旱脅迫下的小麥外施一定濃度的SA發(fā)現(xiàn),SA具有緩解干旱作用[26];TATC-box是赤霉素(gibberellin acid,GA)響應(yīng)元件,用一定濃度GA對煙草種子進(jìn)行引發(fā)處理后可提高其種子和幼苗的抗旱性[27];MBS(TAACTG和CAACTG)是MYB轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)響應(yīng)元件,MYB轉(zhuǎn)錄因子與植物抗逆脅迫有關(guān),據(jù)報(bào)道,擬南芥中ATMYB41在干旱、ABA和鹽脅迫處理下高水平表達(dá)[28]。此外,HSE(AAAAAATTT)和LTR(CCGAAA)分別是熱脅迫和低溫脅迫響應(yīng)元件,TC-rich repeats(ATTCTCTAAC)是脅迫調(diào)控相關(guān)元件。因此可以推測谷子生長發(fā)育過程中通過這些調(diào)控元件共同作用來響應(yīng)干旱、低溫等逆境脅迫。

    從本試驗(yàn)中對NCED家族中Seita.2G035400基因表達(dá)量的分析可以看出,在正常澆水條件下,2個(gè)品種谷子GG和JF14中Seita.2G035400表達(dá)量很低或者幾乎不表達(dá),干旱脅迫后誘導(dǎo)該基因大量表達(dá)(圖3),說明該基因響應(yīng)干旱脅迫,并且在耐旱品種與干旱敏感品種中所起作用相同,只是由于表達(dá)量的差異而引起這2個(gè)谷子品種的抗旱能力不同。這與前人研究結(jié)果相一致,前人研究報(bào)道已證明NCED基因經(jīng)干旱脅迫后大量表達(dá),并通過調(diào)控植物內(nèi)源ABA含量來抵御干旱脅迫[14,29-30]。

    綜上所述,本研究基于PEG脅迫后谷子表達(dá)譜數(shù)據(jù)和Phytozome谷子基因組數(shù)據(jù)庫,鑒定出10個(gè)谷子NCED基因,運(yùn)用生物信息學(xué)方法對其基本信息、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、蛋白理化性質(zhì)和啟動子元件功能等進(jìn)行了分析預(yù)測,并對其中一個(gè)基因Seita.2G035400在干旱脅迫條件下的表達(dá)模式進(jìn)行了分析,研究結(jié)果為谷子抗旱分子育種提供了理論借鑒基礎(chǔ),后期研究有望通過克隆谷子中NCED基因,利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)使其在谷子中過量表達(dá),并通過耐旱性篩選試驗(yàn)來驗(yàn)證基因功能。

    參考文獻(xiàn):

    [1]李蔭梅. 谷子育種學(xué)[M]. 北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1997:421-446.

    [2]Muthamilarasan M,Prasad M. Advances in setaria genomics for genetic improvement of cereals and bioenergy grasses[J]. Theoretical and Applied Genetics,2015,128(1):1-14.

    [3]Diao X,Schnable J,Bennetzen J L,et al. Initiation of setaria as a model plant[J]. Frontiers of Agricultural Science and Engineering,2014,1(1):16-20.

    [4]Hu H,Xiong L. Genetic engineering and breeding of drought-resistant crops[J]. Annual Review of Plant Biology,2014,65(1):715-741.

    [5]Zhu J K. Salt and drought stress signal transduction in plants[J]. Annual Review of Plant Biology,2002,53:247-273.

    [6]Cutler S R,Rodriguez P L,F(xiàn)inkelstein R R,et al. Abscisic acid:emergence of a core signaling network[J]. Annual Review of Plant Biology,2010,61(1):651-679.

    [7]Shinozaki K,Yamaguchi-Shinozaki K. Gene networks involved in drought stress response and tolerance[J]. Journal of Experimental Botany,2007,58(2):221-227.

    [8]Tan B C,Joseph L M,Deng W T,et al. Molecular characterization of the Arabidopsis 9-cis epoxycarotenoid dioxygenase gene family[J]. The Plant Journal:for Cell and Molecular Biology,2003,35(1):44-56.

    [9]Ren H,Gao Z,Chen L,et al. Dynamic analysis of ABA accumulation in relation to the rate of ABA catabolism in maize tissues under water deficit[J]. Journal of Experimental Botany,2007,58(2):211-219.

    [10]Schwartz S H,Qin X,Zeevaart J A. Elucidation of the indirect pathway of abscisic acid biosynthesis by mutants,genes,and enzymes[J]. Plant Physiology,2003,131(4):1591-1601.

    [11]Tan B C,Mccarty D R. Genetic control of abscisic acid biosynthesis in maize[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1997,94(22):12235-12240.

    [12]Burbidge A,Grieve T,Jackson A,et al. Structure and expression of a cDNA encoding a putative neoxanthin cleavage enzyme(NCE)isolated from a wilt-related tomato(Lycopersicon esculentum Mill.)library[J]. Journal of Experimental Botany,1997,48(12):2111-2112.

    [13]Iuchi S,Kobayashi M,Yamaguchi-Shinozaki K,et al. A stress-inducible gene for 9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase involved in abscisic acid biosynthesis under water stress in drought-tolerant cowpea[J]. Plant Physiology,2000,123(2):553-562.

    [14]Iuchi S,Kobayashi M,Taji T,et al. Regulation of drought tolerance by gene manipulation of 9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase,a key enzyme in abscisic acid biosynthesis in Arabidopsis[J]. Plant Journal,2001,27(4):325-333.

    [15]Yang J,Guo Z. Cloning of a 9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase gene (SgNCED1) from Stylosanthes guianensis and its expression in response to abiotic stresses[J]. Plant Cell Reports,2007,26(8):1383-1390.

    [16]李 康,聶小軍,方桂英,等. 普通小麥及其近緣種NCED基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2010,19(6):55-59.

    [17]李嘉怡,蘇良辰,何月容,等. 超表達(dá)AhNCED1擬南芥植株在滲透脅迫下抗氧化能力和抗旱相關(guān)下游基因表達(dá)變化 [J]. 植物生理學(xué)報(bào),2012,48(12):1167-1172.

    [18]胡 博,肖素妮,呂 滟,等. 不同花生品種響應(yīng)干旱脅迫后葉片內(nèi)ABA與AhNCED1的分布[J]. 中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào),2012,34(10):992-997.

    [19]牛志強(qiáng),劉國順,師婷婷,等. 煙草NCED3基因的克隆及其干旱脅迫表達(dá)分析[J]. 中國煙草學(xué)報(bào),2015,21(3):100-106.

    [20]徐學(xué)中,汪 婷,萬 旺,等. 水稻ABA生物合成基因OsNCED3響應(yīng)干旱脅迫[J]. 作物學(xué)報(bào),2018,44(1):24-31.

    [21]Davies W J,Zhang J. Root signals and the regulation of growth and development of plants in drying soil[J]. Physiol Plant Mol Biol,1991,42(1):55-76.

    [22]And P C,Robertson M. Gene expression regulated by abscisic acid and its relation to stress tolerance[J]. Physiol Plant Mol Biol,1994,45(1):113-141.

    [23]Neill S J,Desikan R,Clarke A,et al. Nitric oxide is a novel component of abscisic acid signaling in stomatal guard cells[J]. Plant Physiology,2002,128(1):13-16.

    [24]劉 新,張蜀秋,婁成后.茉莉酸信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及其與脫落酸信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)系[J]. 植物生理學(xué)通訊,2002,38(3):285-288.

    [25]Turner J G,Ellis C,Devoto A. The jasmonate signal pathway[J]. Plant Cell,2002,14(l):S153-S164.

    [26]陶宗婭,鄒 琦,彭 濤,等. 水楊酸在小麥幼苗滲透脅迫中的作用[J]. 西北植物學(xué)報(bào),1999,19(2):296-302.

    [27]坎 平,王莎莎,馬文廣,等. 赤霉素引發(fā)同時(shí)提高煙草種子及幼苗抗旱性和抗冷性[J]. 種子,2014,33(2):30-34,38.

    [28]Cominelli E,Sala T,Calvi D,et al. Over-expression of the Arabidopsis AtMYB41 gene alters cell expansion and leaf surface permeability[J]. The Plant Journal,2008,53(1):53-64.

    [29]Qin X Q,Zeevaart J A. The 9-cis-epoxycarotenoid cleavage reaction is the key regulatory step of abscisic acid biosynthesis in water-stressed bean[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1999,96(26):15354-15361.

    [30]Burbidge A,Grieve T M,Jackson A,et al. Characterization of the ABA-deficient tomato mutant notabilis and its relationship with maize Vp14[J]. The Plant Journal,1999,17(4):427-431.杜尚廣,余 波. 互葉白千層優(yōu)株篩選及叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2019,47(1):44-47.

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