癌胚抗原、糖類(lèi)抗原、CA125、血管生成素、細(xì)胞角蛋白19片段及甲胎蛋白檢測(cè)在肺癌診斷中的臨床研究*

王 玲，申 鴻

1.西安大興醫(yī)院檢驗(yàn)科(西安 710016)；2.西安交通大學(xué)醫(yī)院檢驗(yàn)科(西安 710061)

肺癌發(fā)病率及病死率在我國(guó)均居惡性腫瘤之首，流行病學(xué)專(zhuān)家預(yù)測(cè)顯示，我國(guó)2025年肺癌患病人數(shù)將突破1千萬(wàn)[1]。早發(fā)現(xiàn)、早診斷是提高患者治療效果，改善患者預(yù)后的關(guān)鍵。然肺癌早期臨床癥狀不明顯，加之肺部豐富的血運(yùn)易造成腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移，因此絕大多數(shù)肺癌在發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于晚期。伴隨分子生物學(xué)發(fā)展，血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)因取材方便、創(chuàng)傷性小和重復(fù)性較好等特點(diǎn)，使得其在腫瘤良惡性鑒別診斷和癌癥早期篩查、臨床療效評(píng)價(jià)、預(yù)后判斷等方面的價(jià)值越來(lái)越受關(guān)注[2-3]。癌胚抗原(Carcino-embryonic antigen， CEA)、糖類(lèi)抗原199(Carbohydrate antigen，CA199)、CA125、血管生成素-2(Angiogenin-2， Ang-2)、細(xì)胞角蛋白19片段(Cytokeratin 19 fragment，CYFRA211)及甲胎蛋白(Alpha fetal protein，AFP)均是臨床報(bào)道的與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展存在相關(guān)性的標(biāo)志物。本研究通過(guò)回顧性分析本院收治的96例肺癌患者臨床資料，并與同時(shí)期接受的肺部良性病變者和正常體檢者血清腫瘤標(biāo)志物表達(dá)水平進(jìn)行比較。旨在通過(guò)對(duì)比分析，總結(jié)上述6項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物在肺癌診斷中的靈敏度、特異度、診斷符合率及其與腫瘤細(xì)胞分化程度、腫瘤分期、肝轉(zhuǎn)移等病理特征的相關(guān)性。

資料與方法

1 一般資料 選取2013年1月至2017年12月本院初診為肺部病變的患者150例作為研究對(duì)象。入選病例均經(jīng)病理學(xué)檢查確診，未接受任何方式的放化療和靶向藥物治療，且病歷資料記錄完整。其中包括74例肺癌患者(肺癌組)和76例良性病變者(良性組)，肺癌組男51例、女23例，年齡40～85歲，平均(57.12±5.68)歲；鱗癌37例、腺癌25例、小細(xì)胞癌12例；Ⅰ期7例、Ⅱ期21例、Ⅲ期32例、Ⅳ期14例。良性組男48例、女28例，年齡45～85歲，平均(57.35±5.64)歲；肺炎43例、支氣管擴(kuò)張13例、肺結(jié)核11例、肺膿腫8例、炎性假瘤1例。同時(shí)采用分層抽簽方式從同期體檢人群中選擇70例健康人員作為對(duì)照組，男44例、女26例，年齡43～82歲，平均(57.28±5.69)歲。三組性別、均齡間對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

2 研究方法 三組研究者均取清晨空腹肘靜脈血樣5ml，加入無(wú)抗凝劑的無(wú)菌試管中保存于-20℃冰箱，待析出血清后，離心，3000r/min，10min，所分離血清-20℃保存。選擇型號(hào)為DXI800的全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司生產(chǎn))及其配套試劑等測(cè)定血清CEA；CA199、CA125、CYFRA211及AFP選擇型號(hào)為E601的電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)分析儀及配套試劑進(jìn)行測(cè)定；Ang-2采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)，選擇美國(guó)Bio-Kinet-ics公司提供的FL-312e全自動(dòng)酶標(biāo)儀及配套試劑。所有操作過(guò)程嚴(yán)格遵循說(shuō)明書(shū)，質(zhì)控符合要求。血清標(biāo)志物正常參考范圍：CEA<3.4ng/ml、CA199<39U/ml、CA125<35U/ml、Ang-2<278.5ng/ml、CYFRA211<3.3ng/ml、AFP<20ng/ml。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)處理選擇SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)水平以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，不同組間計(jì)量資料比較行單因素ANOVA分析；陽(yáng)性率間比較行卡方檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水平為α=0.05。

結(jié) 果

1 三組研究對(duì)象血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)水平 見(jiàn)表1。三組血清腫瘤標(biāo)志物CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測(cè)水平間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，肺癌組6項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)水平均明顯高于良性組和健康對(duì)照組(P<0.05)，但對(duì)照組和良性組各指標(biāo)檢測(cè)水平間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2 不同癌變類(lèi)型患者血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)水平比較 見(jiàn)表2。鱗癌、腺癌、小細(xì)胞癌不同病變類(lèi)型患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測(cè)水平間比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。腺癌患者血清CEA、CA199、CA125、AFP檢測(cè)水平均明顯高于鱗癌及小細(xì)胞癌患者(P<0.05)；小細(xì)胞癌患者血清Ang-2顯著低于鱗癌及腺癌患者，而鱗癌血清CYFRA211水平明顯高于腺癌和小細(xì)胞癌(P<0.05)。

3 不同TNM分期患者血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)水平比較 見(jiàn)表3。不同病理分期患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測(cè)水平間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Ⅲ期患者標(biāo)志物檢測(cè)水平明顯高于Ⅰ和Ⅱ期，Ⅳ期明顯高于Ⅲ期(P<0.05)。

表1 三組研究對(duì)象血清腫瘤標(biāo)志物比較

注：與對(duì)照組比較,*P<0.05；良性組比較,#P<0.05

表2 不同癌變類(lèi)型患者血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)水平比較

注：與鱗癌比較，*P<0.05；腺癌比較，#P<0.05

表3 不同TNM分期患者血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)水平比較

注：與Ⅰ和Ⅱ期比較，*P<0.05；與Ⅲ期比較，#P<0.05

4 血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在肺癌診斷中敏感性、特異性和準(zhǔn)確度 見(jiàn)表4。各指標(biāo)單項(xiàng)檢測(cè)肺癌診斷敏感度和準(zhǔn)確度均較低，CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211及CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211+AFP聯(lián)合檢測(cè)診斷肺癌診斷敏感性和準(zhǔn)確度明顯高于單項(xiàng)檢測(cè)及CEA+CA199、CA125+CEA+CA199(P<0.05)，而6項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)敏感性和準(zhǔn)確度顯著高于CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211聯(lián)合檢測(cè)(P<0.05)，但特異度未出現(xiàn)明顯下降(P>0.05)。

表4 血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在肺癌診斷中敏感性、特異性和準(zhǔn)確度

注：與其他各指標(biāo)及聯(lián)合指標(biāo)檢測(cè)比，*P<0.05

討 論

肺癌已成為全球性公共健康難題，為癌癥主要死亡病因之一，5年生存率很低。我國(guó)江蘇南通市2002-2014年肺癌5年生存率僅為12.40%[4]；珠海2003-2010年為15.70%[5];新疆2010-2014年則有相對(duì)較高生存率為19.42%[6]。肺癌早期診斷率低是患者預(yù)后不良及生存率低的主要因素。研究指出，早期肺癌臨床確診率不足15%，多數(shù)患者在確診時(shí)已處于晚期[7]。因此，早期篩查、早期確診、及早治療是改善肺癌患者預(yù)后，提高其生存率的關(guān)鍵途徑之一。CT等影像學(xué)檢查在胸部病變?cè)\斷中應(yīng)用廣泛，可清晰顯示腫瘤的形態(tài)特征，操作者可直觀觀察到腫瘤大小、位置、形態(tài)及邊緣情況，甚至還可通過(guò)影像學(xué)重建方式觀察腫瘤周?chē)拇笱堋⑿呐K等，起到良好定位、分期等幫助[8]。但該診斷方式在肺癌早期篩查中的效果較差。腫瘤標(biāo)志物是機(jī)體癌變發(fā)生發(fā)展過(guò)程中原癌基因及產(chǎn)物異常表達(dá)所產(chǎn)生的活性物質(zhì)，其異常表達(dá)往往早于影像學(xué)可見(jiàn)的組織學(xué)表現(xiàn)[9]。腫瘤標(biāo)志物主要存在于機(jī)體血液、體液和(或)組織間隙中，因此具有檢測(cè)簡(jiǎn)單方便及可動(dòng)態(tài)檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，所以可通過(guò)測(cè)定機(jī)體腫瘤標(biāo)志物表達(dá)水平輔助惡性腫瘤的篩查診斷。

CEA是最早發(fā)現(xiàn)與結(jié)腸癌及胎兒腸組織中的酸性糖蛋白，存在于各類(lèi)癌變組織中，其表達(dá)水平在肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌中均明顯升高，但糖尿病、吸煙、妊娠期等人群中15%～53%血清CEA也會(huì)升高，因此，其并非惡性腫瘤的特異性標(biāo)志物，但在癌變篩查中具有輔助價(jià)值。國(guó)內(nèi)外報(bào)道均顯示，肺癌患者血清CEA表達(dá)水平明顯高于良性病變者及健康人群[10-11]；且研究認(rèn)為，CEA表達(dá)水平與癌變分期存在明確相關(guān)性，分期越晚，CEA濃度越高[12]。CYFRA211屬于上皮細(xì)胞支架蛋白，主要分布于單層上皮細(xì)胞，因此在來(lái)源于上皮組織的腫瘤組織中具有很高的表達(dá)量，是診斷肺小細(xì)胞癌的敏感標(biāo)志物，尤其是對(duì)鱗癌診斷具有較高特異度。CA199和CA125是肺癌中研究相對(duì)較少的腫瘤標(biāo)志物。CA199屬于酸化的乳-N-鹽藻戊糖Ⅱ，其異常表達(dá)在多種惡性腫瘤中均有表現(xiàn)。CA199敏感度低、但具有相對(duì)較高的特異性，需要同其他標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用[13]。CA125屬于卵巢癌相關(guān)抗原，其表達(dá)升高多見(jiàn)于婦科腫瘤患者，近期研究發(fā)現(xiàn)肺癌患者血清中亦存在此物質(zhì)升高現(xiàn)象，尤其是肺腺癌患者中更為明顯[14]。Ang-2屬于分泌性糖蛋白，正常組織中表達(dá)水平低，但腫瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)。近年關(guān)于Ang-2對(duì)結(jié)直腸癌、胃癌及非小細(xì)胞肺癌腫瘤細(xì)胞侵襲、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移的研究日益增加，且結(jié)果顯示，其具有損傷腫瘤周邊原有正常血管，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、腫瘤血管形成，抑制腫瘤細(xì)胞分化等功效[15]。AFP是胎兒期即合成的糖蛋白，其在促生長(zhǎng)、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等多方面均具有重要作用。在胚胎組織及多數(shù)腫瘤細(xì)胞，尤其是生長(zhǎng)迅速的腫瘤細(xì)胞中均有AFP受體表達(dá)。雷程琳等[16]研究顯示，原發(fā)性肺癌患者血清AFP含量明顯高于良性病變者和健康對(duì)照者，但其在原發(fā)性肺癌診斷中靈敏性及特異性均較低，而其與CYFRA211和神經(jīng)元特異性烯醇化酶聯(lián)合檢測(cè)的靈敏性、特異性及準(zhǔn)確度均得到明顯提升。 本研究結(jié)果顯示，肺癌組患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測(cè)水平均明顯高于良性組和健康對(duì)照組，該結(jié)果與以往報(bào)道結(jié)果相吻合[12,17]。表明，本研究所選6項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物均在肺癌早期診斷中均具有一定應(yīng)用價(jià)值。鱗癌、腺癌、小細(xì)胞癌不同病變類(lèi)型患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測(cè)水平間比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。腺癌患者血清CEA、CA199、CA125、AFP檢測(cè)水平均明顯高于鱗癌及小細(xì)胞癌患者；小細(xì)胞癌患者血清Ang-2顯著低于鱗癌及腺癌患者，而鱗癌血清CYFRA211水平明顯高于腺癌和小細(xì)胞癌；不同病理分期患者血清CEA、CA199、CA125、Ang-2、CYFRA211、AFP檢測(cè)水平間比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ⅲ期患者各項(xiàng)標(biāo)志物檢測(cè)水平明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期，Ⅳ期明顯高于Ⅲ期。提示，本研究所選6項(xiàng)標(biāo)志物可用于腺癌、鱗癌及小細(xì)胞癌的癌變類(lèi)型，同時(shí)也是判斷癌變分期，判斷患者預(yù)后的良好指標(biāo)。而在肺癌早期診斷敏感性和準(zhǔn)確性方面，6項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)效果均明顯優(yōu)于CA125+CEA+CA199+Ang-2、CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211聯(lián)合檢測(cè)及各項(xiàng)指標(biāo)單項(xiàng)檢測(cè)，但特異度未出現(xiàn)明顯下降。提示，CA125+CEA+CA199+Ang-2+CYFRA211+Ang-2+AFP聯(lián)合檢測(cè)具有很好的敏感度及準(zhǔn)確性，但并不影響其診斷的特異性。

腺癌血清CEA、CA199、CA125、AFP水平明顯高于鱗癌及小細(xì)胞癌；鱗癌血清CYFRA211水平明顯高于腺癌和小細(xì)胞癌；小細(xì)胞癌血清Ang-2顯著低于鱗癌及腺癌，且各項(xiàng)標(biāo)志物表達(dá)水平與患者病理分析呈一定相關(guān)性。然而6項(xiàng)標(biāo)志物在肺癌診斷中的敏感性及準(zhǔn)確性均較低，而多種聯(lián)合檢測(cè)能顯著提高對(duì)肺癌的敏感性及診斷準(zhǔn)確性，有利于患者的早發(fā)現(xiàn)、早治療，在肺癌診斷方面具有重要價(jià)值。