兩款糖化血紅蛋白床旁分析儀的正確性評價

王 尉，鄭華榮，周 睿，宋智心

（1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院輸血科，北京100015；2.中國計量科學(xué)研究院，北京100013；3.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽醫(yī)院檢驗科，北京100020；4.北京市房山區(qū)良鄉(xiāng)醫(yī)院檢驗科，北京102401）

糖尿病是目前世界范圍高發(fā)的慢性代謝性疾病。早期識別糖尿病前期和糖尿病人群，可以有效減少大血管、微血管病變等糖尿病并發(fā)癥的發(fā)展，有效改善糖尿病高危人群和糖尿病人群生存質(zhì)量。HbA1c作為國際上公認(rèn)的糖尿病檢測指標(biāo)，在臨床應(yīng)用越來越廣泛。1996 年美國糖尿病協(xié)會（ADA）［1］推薦將HbA1c≥6.5%作為臨床診斷的指標(biāo)，HbA1c在5.7%～6.4%之間為糖尿病前期，糖尿病患者HbA1c控制指標(biāo)定為7%。在我國也將HbA1c＜7%作為臨床對糖尿病患者血糖控制情況的評價標(biāo)準(zhǔn)［2］。使用POCT方法進(jìn)行HbA1c檢測為臨床和患者監(jiān)測糖尿病控制情況提供了更為便捷的方式。國外研究［3］表明，有些POCT HbA1c在經(jīng)過臨床評估后可以較好的應(yīng)用于臨床。本研究使用溯源到IFCC的二級參考測量程序（SRMP），探討兩臺POCT HbA1c分析儀檢測的正確性。

材料和方法

1 儀器與試劑

1.1 POCT儀器 POCT-1糖化分析儀為Alere Afinion AS100，試劑批號為10173570，配套質(zhì)控品批號為10182606。POCT-2糖化分析儀為博唐平TMA1C EZ 2.0，試劑批號為AMC16010702，使用Canterbury Scientific Ltd.質(zhì)控品，批號為0105P。兩儀器檢測均為硼酸鹽親和原理，均可以使用靜脈和末梢兩種采血模式，精密度評價均符合NGSP要求。

1.2 參比儀器 中心實驗室Tosoh G8作為二級參考測量程序（SRMP），采用離子交換高效液相色譜 法 （ion exchange high performance liquid chromatographym，HPLC ion exchange），色譜柱批號YJ3908E；原廠配套質(zhì)控品批號AB1040。該種儀器從2009年起參加美國病理學(xué)家協(xié)會（CAP）的能力驗證（PT）計劃，結(jié)果正確度均符合質(zhì)評要求。使用可溯源到IFCC參考物質(zhì)的國家二級有證參考物質(zhì)（冰凍混合人血糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）對Tosoh G8進(jìn)行校準(zhǔn)和驗證。其中，使用編號GBW（E）090634（靶值±不確定度為34.43±1.54mmol/mol）和編號GBW（E）090637（靶值±不確定度為86.79±3.87mmol/mol）的參考物質(zhì)作為校準(zhǔn)物對Tosoh G8進(jìn)行校準(zhǔn)，使用編號為GBW（E）090636（靶值±不確定度為62.29±2.93 mmol/mol）的參考物質(zhì)進(jìn)行曲線驗證，通過分析檢測結(jié)果是否在參考物質(zhì)定值范圍內(nèi)，對實現(xiàn)溯源后的Tosoh G8檢測曲線的有效性進(jìn)行判斷。

1.3 標(biāo)本 收集40例體檢人群驗后EDTA抗凝靜脈全血標(biāo)本，排除脂血、黃疸、溶血、貧血、腎病患者的標(biāo)本，存儲在2～8℃并在收集后48 h內(nèi)完成測試.

2 方法

2.1 標(biāo)本檢測 依據(jù)美國國家臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（CLSI）EP9-A2［4］用患者樣本進(jìn)行方法學(xué)對比和偏移評估；批準(zhǔn)指南-第三版。選取40份EDTA抗凝全血樣本涵蓋POCT HbA1c分析測量范圍：10個樣本濃度在4% ～6%之間，10個樣本濃度在6%～8%之間，10個樣本濃度在8%～10%之間，10個樣本濃度＞10%。每天測量8個標(biāo)本，每個樣本雙份測定，連續(xù)檢測5 d。以二級參考測量程序（溯源到參考方法的Tosoh G8）作為參比儀器。

2.2 偏倚計算 根據(jù)指南要求進(jìn)行方法內(nèi)離群點檢驗及方法間離群點檢驗。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)求得回歸方程Y＝aX+b及相關(guān)系數(shù)r，利用偏倚SE＝｜a+（b-1）Xc｜公式得出其預(yù)期偏倚（Bc），相對預(yù)期偏倚SE% ＝（Bc/Xc）×100%。分別對5.7%、6.5%、7%臨床診斷、監(jiān)測關(guān)鍵點進(jìn)行評價，評估相對偏倚是否小于NGSP和CAP要求的±6%的允許誤差［5-6］，評價POCT儀器和參比儀器間結(jié)果是否具有可比性。

3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用Excel 2010軟件作直線回歸和偏倚分析。

結(jié) 果

1 前期結(jié)果

參比儀器校準(zhǔn)方程為：Y＝1.4194X-0.9186，檢測 GBW （E）090636 的 驗 證 結(jié) 果 為 7.7%（60.66mmol/mol）在62.29±2.93 mmol/mol范圍內(nèi)。根據(jù)指南要求的方法內(nèi)和方法間離群點檢驗，均未發(fā)現(xiàn)離群點。

2 直線回歸方程和偏倚圖

以溯源到IFCC方法的Tosoh G8分析儀作為參比系統(tǒng)（X），POCT-1（紅色三角）和POCT-2（藍(lán)色菱形）作為比對系統(tǒng)（Y），進(jìn)行回歸分析得到回歸方程和相關(guān)系數(shù)（R2）見圖1。計算偏倚繪制偏差圖見圖2?；貧w分析顯示POCT-1和POCT-2回歸方程分別為Y＝1.0424X-0.3144和Y＝1.0054X-0.2242，R2分別為0.9918和0.8967。

圖1 兩臺POCT HbA1c與可溯源到IFCC參考方法的G8相關(guān)圖

圖2 兩臺POCTHbA1c與可溯源到IFCC參考方法的G8偏差圖

3 偏倚

將檢測的40組結(jié)果根據(jù)EP9-A2方法計算偏倚，并用NGSP和CAP評價標(biāo)準(zhǔn)（6%）對臨床決定值進(jìn)行評估。見表1。

表1 兩臺POCT儀器正確性評價結(jié)果

討 論

我國HbA1c檢測質(zhì)量，多年來雖有改進(jìn)，但與發(fā)達(dá)國家比較存在一定差距［7-8］。臨床檢測中，HbA1c檢測儀分析質(zhì)量直接影響到各患者診療效果，隨著POCT HbA1c分析儀在臨床使用的日益廣泛，其檢驗結(jié)果的正確性已經(jīng)成為關(guān)注的焦點。

本研究，使用溯源到IFCC參考方法的Tosoh G8作為參比儀器，采用CLSIEP9-A2文件對兩臺POCT HbA1c分析儀進(jìn)行方法學(xué)比對以及偏差評估，結(jié)果顯示回歸分析POCT-1和POCT-2兩儀器R2分別為0.9918和0.8967，顯示兩臺POCT HbA1c分析儀與溯源到IFCC參考方法的中心實驗室儀器的檢測結(jié)果相關(guān)性良好。HbA1c醫(yī)學(xué)決定水平5.7%、6.5%和7%時，POCT-1和POCT-2偏倚分別為-0.07、-0.04、-0.02和-0.21、-0.20、-0.19，預(yù)期偏倚結(jié)果小于NGSP和CAP標(biāo)準(zhǔn)要求的允許誤差（±6%）。兩臺POCT HbA1c分析儀與溯源到IFCC參考方法的Tosoh G8在臨床患者測定結(jié)果之間具有良好的可比性。

因此，兩臺POCT HbA1c分析儀測定靜脈血結(jié)果具有良好的正確性，臨床檢測結(jié)果可靠，可用于糖尿病治療療效評價和血糖水平監(jiān)測，末梢血情況將在后續(xù)實驗中進(jìn)行研究。