西安地區(qū)健康人群血清胃泌素-17生物參考區(qū)間的建立

陳慧昱，楊 光，陳健康，吳永昌，房 艷，邢瑞青，劉 楊，李 靜，彭道榮

（1.空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院檢驗科，陜西 西安710032；2.空軍軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院腫瘤科，陜西 西安710038）

生物參考區(qū)間是解釋檢驗結(jié)果、分析檢驗信息的基本尺度和依據(jù)。確立可靠的參考區(qū)間能為臨床提供準(zhǔn)確的實驗室依據(jù)［1］，指導(dǎo)臨床對患者或體檢者進(jìn)行診斷和治療。臨床上常見的胃部疾病有慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍、胃癌等。其中胃癌是我國常見的消化道惡性腫瘤，其病死率較高，早發(fā)現(xiàn)、早治療對提高胃癌患者的生存率尤為關(guān)鍵［2］。目前，胃鏡聯(lián)合組織病理學(xué)檢查仍用于胃癌的確診，但由于其屬于侵襲性的檢測方法并且費(fèi)用較昂貴，因此并不適用于胃癌高危人群的初步篩查［3］。近年來，血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物胃泌素-17等的檢測已用于胃癌的早期篩查［4］。胃泌素-17可以經(jīng)過胃粘膜的毛細(xì)血管而進(jìn)入血液循環(huán)，它在血液中可以穩(wěn)定存在，能夠客觀地反應(yīng)胃粘膜的總體功能與狀態(tài)。因此，血清胃泌素-17水平對慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍、胃息肉等胃部疾病也有重要的診斷與篩查價值。此外，幽門螺桿菌的感染與胃泌素-17水平也具有一定的相關(guān)性［5］。國內(nèi)尚無胃泌素-17生物參考區(qū)間建立的相關(guān)報道，因此本文以西安地區(qū)健康體檢人群為研究對象，按照ISO 15189實驗室認(rèn)可文件《血清胃泌素-17 ELISA法檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》要求，對西安地區(qū)10039例健康體檢者進(jìn)行血清胃泌素-17的檢測，并對檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析和比較，以求建立本地區(qū)健康人群血清胃泌素-17的生物參考區(qū)間，為臨床相關(guān)疾病的診治提供幫助。

材料和方法

1 一般資料

收集2017年7月至2018年6月在西京醫(yī)院進(jìn)行健康體檢者共計10039例，其中男性6073例，女性3966例；年齡l3～89歲，平均年齡45.5±11.5歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：按照NCCLS要求［6］，健康者的原則是乙、丙肝血清標(biāo)志物、HIV、梅毒抗體檢測陰性，心肺功能正常，血壓正常，影像學(xué)檢查正常，近期沒有過量飲酒，沒有服藥、手術(shù)及住院治療，無肥胖癥，無家族遺傳病史，排除消化系統(tǒng)疾病、慢性病及腫瘤的健康體檢者。本次分析的10039例健康體檢者均為西安及周邊地區(qū)的常住居民。所有體檢者均通過“知情問卷調(diào)查”，為符合NCCLS要求的健康體檢者。

2 儀器與試劑

檢測儀器為基因有限公司生產(chǎn)的ELx808酶標(biāo)儀，檢測試劑由必歐瀚生物技術(shù)有限公司提供。在此檢測試劑盒中，制造商使用商業(yè)合成的胃泌素-17多肽（Gastrin I human，G9020，Sigma Stlouis Missouri USA）作為標(biāo)準(zhǔn)品。該標(biāo)準(zhǔn)品的固定值為10，根據(jù)本實驗室質(zhì)控累積的結(jié)果，其測定結(jié)果浮動范圍為10±0.3。

3 血清胃泌素-17的檢測

受檢者早7：30至9：30空腹抽血，采集3mL靜脈血于真空干燥促凝管中，標(biāo)本置于3000r/min離心機(jī)離心5min，取血清立即檢測。應(yīng)用ELx808酶標(biāo)儀及必歐瀚生物技術(shù)有限公司的胃泌素-17檢測試劑盒，采用雙抗體夾心法（ELISA）進(jìn)行胃泌素-17的測定。測定過程嚴(yán)格按照試劑的操作說明書及儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行。

4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用統(tǒng)計軟件SPSS24.0對胃泌素-17檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。先對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗，若所得結(jié)果屬正態(tài)分布，用±s表示正態(tài)分布數(shù)據(jù)，按±1.96s計算參考區(qū)間。若數(shù)據(jù)的分布屬于偏態(tài)分布，用中位數(shù)（四分位數(shù)范圍）［M（P25～P75）］表示，其參考區(qū)間為百分位數(shù)2.5%和97.5%的對應(yīng)值。不同性別間比較采用Mann-WhitneyU檢驗，不同年齡組之間兩兩比較采用Kruskal-WallisH檢驗，P＜0.05說明差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 西安地區(qū)健康人群血清胃泌素-17水平的頻數(shù)分布

10039例健康體檢者血清胃泌素-17檢測結(jié)果呈偏態(tài)分布（見圖1），故應(yīng)采用非參數(shù)檢驗進(jìn)行統(tǒng)計分析。

圖1 健康人群血清胃泌素-17水平頻數(shù)分布圖

2 不同性別健康人群血清胃泌素-17水平及生物參考區(qū)間（pmol/L）

由于胃泌素-17檢測結(jié)果屬偏態(tài)分布，百分位數(shù)2.5%和97.5%的對應(yīng)值為其參考區(qū)間。男性參考區(qū)間為0.1～29.52 pmol/L，女性參考區(qū)間為0.1～41.89pmol/L?？傮w參考區(qū)間為0.1～32.7 pmol/L。不同性別之間差異非常顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）（見表1）。

表1 不同性別健康人群血清胃泌素-17水平及參考區(qū)間（pmol/L）

3 各年齡組血清胃泌素-17檢測結(jié)果的比較

對健康體檢者按年齡進(jìn)行分組，由于＜20歲年齡組和≥80歲年齡組人數(shù)較少，不具備建立生物參考區(qū)間的條件，因此這兩組體檢者血清胃泌素-17水平不參與組間比較。對其余各年齡組的檢測結(jié)果進(jìn)行兩兩比較，發(fā)現(xiàn)各組間胃泌素-17水平不全相同，部分組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中包括：20～29歲組與40～49歲組、50～59歲組、60～69歲組、70～79歲組的比較（P＝0.015、P＜0.001、P＝0.001、P＜0.001）；30～39歲組與40～49歲組、50～59歲組、60～69歲組、70～79歲組的比較（P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（見表2）。

表2 各年齡組健康人群血清胃泌素-17水平及參考區(qū)間（pmol/L）

4 相同性別各年齡組之間及同年齡組不同性別之間血清胃泌素-17檢測結(jié)果的比較

同性別各年齡組之間及同年齡組不同性別之間胃泌素-17檢測結(jié)果兩兩比較（＜20歲年齡組和≥80歲年齡組不參與比較），部分組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中包括：同一年齡組中，30～39歲、40～49歲、50～59歲、60～69歲及70～79歲組中男女兩性之間比較（P＝0.005、P＝0.001、P＜0.001、P＝0.001、P＝0.004），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。男性中，30～39歲組與40～49歲組及50～59歲組的比較（P＝0.015、P＝0.009）；女性中，20～29歲組與50～59歲組、60～69歲組及70～79歲組的比較（P＝0.016、P＝0.009、P＜0.001）；30～39歲組與50～59歲組、60～69歲組及70～79歲組的比較（P＝0.002、P＝0.002、P＜0.001）；40～49歲組與70～79歲組之間的比較（P＝0.034），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（見表3）。

表3 兩性不同年齡段健康體檢者血清胃泌素-17水平（pmol/L）

討 論

胃泌素是一種多肽類的胃腸激素，具有刺激胃酸分泌、促進(jìn)胃粘膜再生、調(diào)節(jié)胃腸功能等作用，空腸及十二指腸少量分泌，主要由胃竇部的G細(xì)胞分泌，其中80%～90%是胃泌素-17。胃內(nèi)pH值及胃竇部G細(xì)胞的數(shù)量影響胃泌素-17的分泌水平，胃酸可抑制胃竇G細(xì)胞釋放胃泌素-17，胃酸與胃泌素-17之間存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，當(dāng)胃竇萎縮時，胃泌素-17水平下降［7］。它是反應(yīng)胃功能的敏感指標(biāo)。有研究發(fā)現(xiàn)，胃泌素-17可以反應(yīng)胃黏膜的狀態(tài)，若胃部黏膜發(fā)生病理性的改變時，血清中的胃泌素-17水平也會發(fā)生變化［8-9］。在萎縮性胃炎、胃潰瘍、胃息肉、胃癌等疾病中，血清胃泌素-17均存在高表達(dá)的狀態(tài)，且表達(dá)呈遞增趨勢。這可能與胃粘膜病變的嚴(yán)重程度有一定的相關(guān)性，當(dāng)胃粘膜組織的改變越接近胃癌粘膜組織的狀態(tài)時，血清中胃泌素-17的水平升高越明顯［10］。這就為胃泌素-17在胃癌及癌前病變的篩查中能夠發(fā)揮出重要的作用提供了理論支持。也有研究表明，萎縮性胃炎合并高胃泌素的狀態(tài)對于胃黏膜的癌變也有一定的促進(jìn)作用［11］。因此，對血清胃泌素-17水平進(jìn)行監(jiān)測，可以間接反應(yīng)胃黏膜的狀態(tài)及功能，可稱為是胃粘膜狀態(tài)的“血清學(xué)活檢查”。

胃泌素-17是一個非特異性的腫瘤標(biāo)志物，只能用作胃癌等腫瘤的輔助篩查診斷指標(biāo)，其升高不一定是患有腫瘤，其結(jié)果正常也不能絕對排除疾病。為提高胃癌等腫瘤疾病早期診斷的靈敏度，應(yīng)使用多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測［12］，且對腫瘤疾病的綜合判斷應(yīng)結(jié)合臨床其他癥狀，最好能做到定期監(jiān)測。雖然胃泌素-17的檢測不能作為胃癌的確證實驗，但其檢測方便，可用于大規(guī)模健康人群的篩查實驗。若臨床初篩發(fā)現(xiàn)胃癌可疑病例，即可及時通過胃鏡及病理檢查以確診，就能夠達(dá)到對疾病早發(fā)現(xiàn)、早治療的效果，從而降低病死率。目前，這項檢測已被芬蘭、日本、挪威等國家用于對胃癌及癌前病變的篩查［13］。確立血清胃泌素-17的生物參考區(qū)間，即成為該篩查指標(biāo)的首要任務(wù)。

由于地域、生活環(huán)境、生活方式、飲食習(xí)慣及檢測方法的不同，均可影響胃竇部G細(xì)胞對胃泌素-17的分泌，造成健康人群血清胃泌素-17水平的檢測結(jié)果存在差異。各個實驗室有必要根據(jù)當(dāng)?shù)氐娜巳禾攸c(diǎn)選擇合適的檢測方法建立相應(yīng)的參考區(qū)間。本研究中西安地區(qū)健康人群血清胃泌素-17水平呈偏態(tài)分布。表1的統(tǒng)計結(jié)果顯示：西安地區(qū)健康人群不同性別之間血清胃泌素-17水平存在差異。本研究發(fā)現(xiàn)按年齡分組，部分組間兩兩比較結(jié)果差異也具有統(tǒng)計學(xué)意義。說明不同性別及年齡的胃粘膜狀態(tài)不同，胃泌素-17的水平也不同。因此，各實驗室應(yīng)按性別及年齡分別建立胃泌素-17的生物參考區(qū)間。

健康人群參考區(qū)間的建立是應(yīng)用該項檢測指標(biāo)的首要條件，此范圍只代表一個特定的人群。參考區(qū)間的建立是實驗室為臨床提供服務(wù)，保證質(zhì)量的重要任務(wù)之一。本研究以西安地區(qū)的健康人群為基礎(chǔ)，考慮到性別，年齡因素的影響，建立了符合西安地區(qū)人群特征的血清胃泌素-17水平參考區(qū)間，為臨床相關(guān)疾病的診治提供了可靠的實驗室依據(jù)，對胃部炎性疾病、癌前病變及胃癌的早期篩查具有重要意義。