4479例不孕夫妻男性患者精液檢測結(jié)果分析

陳涓涓，雷 婷，李 欣，劉 娜，張曼，

（1.北京大學(xué)第九臨床醫(yī)學(xué)院，北京100038；2.尿液細胞分子診斷北京市重點實驗室，北京100038；3.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀壇醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科，北京100038；4.云南省人口和計劃生育科學(xué)技術(shù)研究所生化免疫室，云南 昆明650021）

精液質(zhì)量是反映男性生育力最直接和最基本的指標，精液質(zhì)量關(guān)系到人口素質(zhì)、生殖健康水平及種族的延續(xù)。近幾年，全球男性精液質(zhì)量呈現(xiàn)下降趨勢引起了廣泛關(guān)注。1992年丹麥學(xué)者CARLSEN等［1］最先使用Meta分析法研究了1938～1990年世界各地發(fā)表的有關(guān)男子精液質(zhì)量分析發(fā)現(xiàn)：50年來全球性的精子計數(shù)呈下降趨勢，平均每次射精量由1940年的3.4mL下降到1990年的2.7mL，精子密度由1940年的113×106/mL下降到1990年的66×106/mL，在半個世紀內(nèi)下降了近50%。為了解近年來云南省男性生育力的變化趨勢，本研究對2012年5月以來，于我生殖中心就診的4479名男性患者進行了精液常規(guī)分析。

材料和方法

1 研究對象

自2012年5月31日至2016年6月6日到我生殖中心就診的4479例婚后性生活正常并未采取任何避孕措施1年以上不孕夫妻的男性患者。

2 標本采集

所有研究對象禁欲2～7d，在專用取精室手淫采集全份精液于一次性取精杯中，置37℃恒溫箱液化，待其完全液化后進行檢測。

3 檢測方法

肉眼觀察精液樣本的顏色、黏稠度及液化情況，pH試紙測試pH值，稱量精液質(zhì)量，質(zhì)量除以密度換算精液體積。根據(jù)制造商的計算機輔助精子分析（CASA，NIKON E200相差顯微鏡，SCA@COMPLETE MODLE軟件，巴塞羅那，西班牙）評估精子密度、一次射精的精子總數(shù)，快速前向運動精子百分比、前向運動精子百分比和活動精子百分比。根據(jù)操作指南，使用移液器將2μL精液或稀釋精液加至SCA 20μm腔室顯微鏡載玻片的一側(cè)，通過載玻片加熱器保持在37℃。通過將精子密度乘以每個樣品中的精液體積來計算一次射精的精子總數(shù)。在離心并分析來自每位患者的至少兩個樣品中的精子后評估無精子癥。參考標準按第5版《WHO人類精液檢查與處理實驗室手冊》規(guī)定的標準。

4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 22.0及Graphpad Prism 6進行分析，作圖描述2012～2016年5年間不孕癥就診夫妻男性患者的年齡分布、精液量、精子密度、一次射精的精子總數(shù)、快速前向運動精子百分比、前向運動精子百分比和活動精子百分比的變化情況。由于精液量、精子密度、一次射精的精子總數(shù)、快速前向運動精子百分比、前向運動精子百分比和活動精子百分比為偏態(tài)分布，使用Kruskal Wallis Test方法分析其變化趨勢，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

2012～2016年到我生殖中心就診的4479名男性研究對象的各項分析數(shù)據(jù)，如表1。

表1 2012年至2016年4479名男性研究對象年齡及精液相關(guān)參數(shù)比較

1 4479名男性研究對象年齡段人數(shù)分布

圖1為2012年至2016年不孕癥就診夫妻男性患者的年齡分布情況。所有研究對象中各年齡段人數(shù)成正態(tài)分布，研究對象的平均年齡為34.0±6.2歲，眾數(shù)為30歲，占總樣本數(shù)的6.9%（309人），23至45歲年齡分布較廣。24歲以后接受精液常規(guī)檢查的患者人數(shù)劇增，在30歲達到高峰，從42歲以后迅速下降，直到60歲仍然有接受精液常規(guī)檢查的患者。

圖1 2012年至2016年不孕癥就診夫妻男性患者的年齡分布（n＝4479）

2 精液量變化

圖2為2012年至2016年5年間精液量變化，結(jié)果表明精液量不同年份組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＝0.079，P＞0.05）。

圖2 2012年至2016年精液量變化（n＝4479）

3 精子密度和精子總數(shù)變化

圖3為2012年至2016年精子密度變化，統(tǒng)計結(jié)果表明，精子密度不同年份組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.001），并呈現(xiàn)下降趨勢，其中位數(shù)從2012年41.70×106/mL，下降至2016年34.35×106/mL。圖4為2012年至2016年精子總數(shù)變化趨勢，統(tǒng)計結(jié)果表明，精子總數(shù)不同年份組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001），并呈現(xiàn)下降趨勢，從2012年142.46×106/一次射精，下降至2016年89.35×106/一次射精。

圖3 2012年至2016年精子密度變化（n＝4479）

圖4 2012年至2016年精子總數(shù)變化（n＝4479）

4 快速前向運動精子百分比、前向運動精子百分比及活動精子百分比變化

圖5、6、7分別為2012年至2016年快速前向運動精子百分比、前向運動精子百分比及活動精子百分比變化趨勢，結(jié)果表明快速前向運動精子百分比（P＝0.078）、前向運動精子百分比（P＝0.066）及活動精子百分比（P＝0.068）三個參數(shù)5年間變化無顯著性差異（P＞0.05）。

圖5 2012年至2016年快速前向運動精子百分比變化（n＝4479）

圖6 2012年至2016年前向運動精子百分比變化（n＝4479）

圖7 2012年至2016年活動精子百分比變化（n＝4479）

討 論

研究對象的年齡主要集中分布在23～45歲，占總受檢人群的95%，是不孕癥就診的主要群體，主要原因是由于該年齡段男性屬于生育高峰期，對生育的要求最為迫切，對生殖健康更為關(guān)注，應(yīng)該給予這個年齡段的男性更多的重視與指導(dǎo)。

根據(jù)《WHO人類精液與精子-宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》第5版公布的參考值：精液體積＞1.5mL；前向運動精子百分比＞32%；活動精子百分比＞40%；精子濃度＞15×106/mL；精子總數(shù)＞39×106/一次射精。對5年間的精液常規(guī)結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，精液量、快速前向運動百分比、前向運動精子百分比、活動精子百分比、精子濃度、精子總數(shù)中位數(shù)均在參考值以上，表明前來就診的不孕夫妻的發(fā)病原因并非完全來自男性；精液量、快速前向運動精子百分比、前向運動精子百分比及活動精子百分比不同年份組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但精子濃度、精子總數(shù)不同年份組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，并明顯呈現(xiàn)下降趨勢。

近年來，多個國家與地區(qū)的回顧性研究也發(fā)現(xiàn)男性精液質(zhì)量隨社會發(fā)展總體呈現(xiàn)下降趨勢，如印度［2-5］、法國［6-7］等國家的學(xué)者發(fā)現(xiàn)本國男性的精子密度、總精子數(shù)、活動精子百分比、快速直線運動精子百分比等參數(shù)呈現(xiàn)逐年下降趨勢。國內(nèi)也有學(xué)者在回顧過去25年間精液常規(guī)部分指標發(fā)現(xiàn)，1985年至1994年間國內(nèi)正常男性精液質(zhì)量參數(shù)中精液量、精子密度和精子總數(shù)未見明顯下降趨勢，但自1995年后的14年以來，精液量沒有明顯變化，但精子密度和精子總數(shù)呈現(xiàn)顯著下降趨勢［8-9］，這與本研究發(fā)現(xiàn)的5年來精子密度與精子總數(shù)下降的結(jié)果一致。

隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展，工作壓力及環(huán)境污染等因素直接影響著男性生殖的健康［10-13］。男性精液質(zhì)量改變是由各種因素長期相互作用，逐步累積造成的結(jié)果。目前男性生育力治療的方法非常有限，通過婚檢、孕前檢查進行精液常規(guī)檢測，可提前預(yù)防部分不育癥的發(fā)生，延緩不育癥的進程，保護男性生育力，從而緩解或逆轉(zhuǎn)我地區(qū)男性精液質(zhì)量下降趨勢。