白細(xì)胞介素-13和白細(xì)胞介素-17在口腔扁平苔蘚患者血清中的表達(dá)及臨床意義

王 偉

(同濟(jì)大學(xué)附屬口腔醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200072)

口腔扁平苔蘚(OLP)是一種常見(jiàn)的慢性角化性口腔黏膜疾病，一般不具有傳染性。該病的發(fā)病原因比較復(fù)雜，有研究表明，其發(fā)病與精神因素如壓力大、疲勞、抑郁、焦慮、免疫因素、內(nèi)分泌因素、微循環(huán)障礙因素、微量元素缺乏及一些全身疾病如糖尿病、感染消化道功能紊亂等有關(guān)[1]。常見(jiàn)分型主要是網(wǎng)紋型、糜爛型和萎縮型。白細(xì)胞介素(IL)是由機(jī)體內(nèi)多種細(xì)胞產(chǎn)生并調(diào)節(jié)細(xì)胞間功能的一類(lèi)細(xì)胞因子[2]。目前研究發(fā)現(xiàn)了38種IL，IL-13和IL-17是其中的兩種，它們?cè)诿庖呒?xì)胞的增生、活化及免疫調(diào)節(jié)等過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，此外它們還參與機(jī)體的生理及病理反應(yīng)過(guò)程。IL和血細(xì)胞生長(zhǎng)因子同屬于細(xì)胞因子[3-4]，二者之間協(xié)調(diào)合作，共同完成細(xì)胞造血等功能。本文主要對(duì)IL-13和IL-17在OLP患者血清中的表達(dá)及臨床意義進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年5月至2018年2月本院收治的32例初診為OLP患者(OLP組)作為研究對(duì)象，其中男12例，女20例，年齡22～73歲，平均(47.13±7.94)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者均不伴有皮損，無(wú)心血管、肝炎等系統(tǒng)性疾??；(2)無(wú)牙周炎、牙齦炎等其他口腔疾病；(3)近3個(gè)月內(nèi)未接受任何局部或全身的激素或抗菌藥物治療。根據(jù)臨床檢查和OLP診斷標(biāo)準(zhǔn)及分型標(biāo)準(zhǔn)[5]對(duì)患者進(jìn)行確診和分型；其中網(wǎng)紋型包括網(wǎng)狀型、條紋型及斑塊型等15例，糜爛型包括紅斑型、萎縮型l5例。對(duì)照組28例來(lái)自于同期體檢健康者，男11例，女17例，年齡24～68歲，平均(46.19±5.26)歲。本研究經(jīng)倫理委員會(huì)同意，所有研究對(duì)象均知情并簽署知情同意書(shū)。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 儀器與試劑 補(bǔ)體C3/C4檢測(cè)試劑盒來(lái)自于貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)蘇州有限公司，免疫球蛋白(Ig)G/M/A檢測(cè)試劑盒恒溫水浴箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠)，Model680酶標(biāo)儀采用美國(guó)的BIO-RAD公司生產(chǎn)，超低溫冰箱采用冠深生物科技上海有限公司生產(chǎn)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒由上海撫生實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)，流式細(xì)胞儀、6色TBNK檢測(cè)試劑盒由美國(guó)BD公司生產(chǎn)，特定蛋白分析系統(tǒng)來(lái)自于美國(guó)Beckman Coulter公司。

1.3 檢測(cè)方法 于次日清晨采取患者空腹時(shí)的靜脈血5.5 mL，對(duì)照組則在體檢時(shí)抽取即可，2 500 r/min離心15 min后取血清，置于-80 ℃環(huán)境中存放，按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定血清IL-13和IL-17水平。散射比濁法檢測(cè)患者體液免疫指標(biāo)，包括C3、C4、IgG、IgM、IgA；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者自然殺傷細(xì)胞(NK,CD16+CD56+)、CD3+、CD4+、CD8+、CD19+細(xì)胞免疫指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；各因素間相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組體液免疫水平檢測(cè)結(jié)果比較 OLP組患者免疫水平與對(duì)照組作比較，OLP組C4值低于對(duì)照組，IgM高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.2 兩組細(xì)胞免疫水平檢測(cè)結(jié)果比較 兩組體液免疫水平檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，OLP 組CD19+水平高于對(duì)照組，CD3+、CD4+、CD8+低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表1 兩組患者體液免疫檢測(cè)結(jié)果比較

注：*P<0.05，與對(duì)照組比較

表2 兩組患者細(xì)胞免疫檢測(cè)結(jié)果比較

注：*P<0.05，與對(duì)照組比較

2.3 兩組IL-13和IL-17的表達(dá)水平比較 OLP組IL-13和IL-17的表達(dá)水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

2.4 OLP患者與血清中IL-13和IL-17表達(dá)水平的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示，OLP患者血清中IL-13和IL-17的表達(dá)水平呈正相關(guān)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.824，P<0.05)。

2.5 OLP患者血清中IL-13和IL-17表達(dá)水平與免疫指標(biāo)的相關(guān)性分析 采用Spearman相關(guān)分析法分析OLP患者IL-13和IL-17的表達(dá)與免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性，見(jiàn)表4。OLP患者IL-12和IL-27的表達(dá)水平與IgG呈正相關(guān)(r1=0.643，P1=0.012；r2=0.747，P2=0.001)，與CD16+CD56+呈負(fù)相關(guān)(r1=-0.705，P1=0.012；r2=-0.782，P2=0.022)。

表3 兩組IL-13和IL-17的表達(dá)水平比較

注：*P<0.05，與對(duì)照組比較

表4 OLP患者血清中IL-13和IL-17表達(dá)水平與

注：*P<0.05

3 討 論

OLP是一種常見(jiàn)的不具有感染性的口腔黏膜疾病，多見(jiàn)于中年女性，由粟米狀或丘疹狀的線條構(gòu)成的網(wǎng)紋狀損害，隨著病情加重會(huì)出現(xiàn)紅斑和糜爛[6]。發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，精神因素是造成此病的主要原因，由于精神壓力過(guò)大導(dǎo)致內(nèi)分泌紊亂，機(jī)內(nèi)臟器功能失調(diào)而引發(fā)疾病[7]。

補(bǔ)體C3、C4的臨床意義相似，它們?cè)谥泻筒《?、促進(jìn)吞噬、補(bǔ)體活化和預(yù)防免疫復(fù)合物沉著等方面發(fā)揮作用，增高常見(jiàn)于某些急性炎癥或傳染病早期[8]。IgG、IgM和IgA均屬于人體免疫球蛋白，具有抗炎、抗病毒功能，對(duì)機(jī)體其免疫保護(hù)作用[9]。本研究顯示OLP組與對(duì)照組相比，C3、C4水平降低，IgG、IgM、IgA均升高，可能與參與機(jī)體免疫反應(yīng)，對(duì)抗炎癥和細(xì)菌有關(guān)，可作為判斷某些疾病狀態(tài)的重要指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，OLP組CD3+、CD4+、CD8+水平都低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，可能是因?yàn)樵跈C(jī)體受到感染時(shí)，抑制性T細(xì)胞對(duì)免疫應(yīng)答起負(fù)功能調(diào)節(jié)作用。CD19+表達(dá)高低代表B細(xì)胞水平[10]，本文研究表明OLP患者CD19+高于對(duì)照組，可能與B細(xì)胞在抗原刺激下可分化為漿細(xì)胞，合成和分泌免疫球蛋白，集中參與了機(jī)體體液免疫調(diào)節(jié)有關(guān)。NK能夠介導(dǎo)天然免疫應(yīng)答，不依賴(lài)抗體和補(bǔ)體，具有自然殺傷活性，能識(shí)別并殺傷腫瘤細(xì)胞或病毒感染的細(xì)胞等；參與機(jī)體內(nèi)移植排斥反應(yīng)和某些自身免疫病的發(fā)生發(fā)展，具有免疫調(diào)節(jié)功能，是機(jī)體最重要的免疫細(xì)胞[11]。NK活性可作為判斷機(jī)體抗腫瘤和抗病毒感染的相關(guān)指標(biāo)，有研究表明[12]：在免疫缺陷疾病、實(shí)體腫瘤、血液系統(tǒng)腫瘤和某些病毒感染患者體內(nèi)，NK活性減低；宿主抗移植物反應(yīng)者，NK活性升高，本研究中OLP患者NK細(xì)胞水平與對(duì)照組相比，患者NK細(xì)胞水平下降，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

本研究顯示：OLP組患者血清中IL-13和IL-17的表達(dá)均高于對(duì)照組，且相關(guān)性分析顯示，IL-13與IL-17水平呈正相關(guān)。推測(cè)IL-13與IL-17均參與了OLP患者的局部炎性反應(yīng)的發(fā)展過(guò)程。IL-13由TH2細(xì)胞產(chǎn)生，與IL-4基因緊密連接，在功能上也與IL-4有許多相似之處[13]。IL-13可誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化，增強(qiáng)其MHCⅡ類(lèi)分子的表達(dá)；抑制lps誘導(dǎo)的單核因子分泌，控制炎性反應(yīng)[14]。IL-17是目前已發(fā)現(xiàn)的30余種IL之一，而Th17細(xì)胞主要效應(yīng)因子是IL-17[15]。研究發(fā)現(xiàn)IL-17是T細(xì)胞來(lái)源細(xì)胞因子，IL-17是由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的誘導(dǎo)炎性反應(yīng)的細(xì)胞因子，可以促進(jìn)T細(xì)胞的激活和刺激內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞等產(chǎn)生多種細(xì)胞因子如IL-6、IL-8、化學(xué)增活素、細(xì)胞黏附分子1(CAM-1)及粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞刺激因子(GM-CSF)，從而導(dǎo)致機(jī)體炎性反應(yīng)的產(chǎn)生[16]。本文IL-13和IL-17表達(dá)水平與免疫指標(biāo)的相關(guān)性研究結(jié)果顯示，OLP組與體液免疫中IgG呈正相關(guān)，與OLP細(xì)胞免疫中NK細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),提示患者出現(xiàn)免疫功能低下的狀況。IL-13能促進(jìn)B細(xì)胞脫氧核糖核酸合成，刺激細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)免疫蛋白產(chǎn)生并轉(zhuǎn)換成IgG，而IL-17本身也可參與多種自身免疫性疾病的過(guò)程，可誘導(dǎo)其他炎癥因子的表達(dá)增多，推測(cè)IL-17激發(fā)IgG生成增多，參與殺傷炎癥因子和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。IL-13和IL-17在機(jī)體出現(xiàn)炎癥時(shí)大量增多，協(xié)同增進(jìn)了NK細(xì)胞增殖，對(duì)抗炎性反應(yīng)發(fā)展，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力[17-18]。

綜上所述，OLP患者血清中的IL-13和IL-17水平升高促進(jìn)了炎性反應(yīng)的發(fā)展，也導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)體液調(diào)節(jié)紊亂，在一定程度上可以反應(yīng)機(jī)體免疫功能狀況，其具體機(jī)制還需進(jìn)一步的拓展研究。