川西北地區(qū)人乳頭瘤病毒感染與宮頸病變程度的相關(guān)性研究

胥明勇，吳泳樺

(綿陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 綿陽(yáng) 621000)

目前認(rèn)為宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）及宮頸癌發(fā)生與人乳頭狀病毒 (Human Papillomaviruses，HPV)感染密切相關(guān)[1]。為了了解本地區(qū)女性感染HPV的年齡分布情況，以及宮頸病變與HPV感染之間的關(guān)系，我們使用HPV基因分型（PCR-反向點(diǎn)雜交法）檢測(cè)技術(shù)，進(jìn)行HPV分型檢測(cè)研究，探討本地區(qū)HPV亞型感染與年齡分布、宮頸病變程度的相關(guān)性。

1 材料與方法

1．1 標(biāo)本來(lái)源 收集2015年7月至2016年8月來(lái)自我院門診及住院女性患者3947例，年齡14～87歲，平均39．15歲，其中宮頸炎患者955例，宮頸上皮內(nèi)瘤變140例（CINⅠ～Ⅲ），宮頸癌110例。

1．2 儀器與試劑 珠海黑馬9600擴(kuò)增儀 （廣州珠海），YN-H16型雜交儀(深圳亞能)；HPV 基因分型試劑(深圳亞能）。

1．3 檢測(cè)方法

1．3．1 HPV樣本采集及保存 臨床醫(yī)生使用宮頸采集器采集脫落細(xì)胞，放入專用取樣管中，貯存于2～8℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1．3．2 HPV分型檢測(cè) 由工作人員嚴(yán)格按HPV基因分型進(jìn)行檢測(cè)，在YN-H16型雜交儀中完成雜交。質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)：陰性質(zhì)控品只有內(nèi)控位點(diǎn)顯色，陽(yáng)性質(zhì)控品必須在相應(yīng)的HPV基因型位點(diǎn)及內(nèi)控位點(diǎn)顯色；結(jié)果判讀：根據(jù)顯色信號(hào)的有無(wú)及位置判斷HPV基因型。該試劑盒能檢測(cè)23個(gè)亞型，其中包含有 18 種高危亞型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83，5 種 低危型：HPV6、11、42、43、81。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19．0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0．05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 HPV總感染率及亞型分布情況 在3947例臨床標(biāo)本中21種亞型全部檢出，共檢出HPV陽(yáng)性1140例，總陽(yáng)性率為28．88%，其中感染高危型HPV為737例，陽(yáng)性率為18．67%；感染低危型HPV為182例，陽(yáng)性率為4．61%；感染混合型（高危型與低危型）HPV為221例，陽(yáng)性率為5．60%，高危亞型HPV52、16、58檢出率居前3位。

2．2 各年齡組HPV感染情況 HPV感染人群分布以≤40歲年齡組為主，≤20歲組感染率最高，陽(yáng)性率為 85．29%，明顯高于其它年齡組（P＜0．05），21歲后隨著年齡的增加，其檢出率呈下降趨勢(shì)，但大于60歲檢出率又有明顯上升。見(jiàn)表1。

2．3 宮頸病變患者感染HPV結(jié)果 三種不同程度宮頸病變患者感染HPV陽(yáng)性率相比較，P＜0．05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；HPV高危型在三種不同程度宮頸病變患者感染HPV陽(yáng)性率相比較，P＜0．05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表1 各年齡組HPV感染情況

表2 宮頸病變患者感染HPV結(jié)果[n（%）]

2.4 HPV亞型在宮頸病變中分布 在955例宮頸炎患者中，陽(yáng)性率前4位的亞型為HPV16、52、58、51；在140例CIN患者中，陽(yáng)性率前4位的亞型為HPV16、58、52、33；在 110 例宮頸癌患者中，陽(yáng)性率前 4 位的亞型為 HPV16、52、53、39。通過(guò)對(duì) HPV各亞型在三種不同程度宮頸病變陽(yáng)性率中相比較，HPV16、58、56、33 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05（χ2值分別為 31.477、13.138、7.74 和 13.179；P 值分別為 0.000、0.001、0.021和 0.001）， 其余亞型的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表3。

3 討論

目前已鑒定出HPV有200多個(gè)基因型，其中約50余型可以感染人生殖道[2]。根據(jù)發(fā)生宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)性將HPV基因型分成高危型和低危型[3]，特別是高危亞型持續(xù)感染，可以引起宮頸上皮內(nèi)瘤病變甚至宮頸癌的發(fā)生[4]，故對(duì)HPV進(jìn)行分型研究具有重要的臨床價(jià)值。

基因芯片技術(shù)被認(rèn)為宮頸癌篩查首選HPV分型檢測(cè)方法，對(duì)于宮頸癌的預(yù)后評(píng)估具有重要的臨床價(jià)值。通過(guò)該方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)本地區(qū)HPV總陽(yáng)性率為28.88%，高于三亞地區(qū)[5]，而低于浙江地區(qū)[6]、貴州地區(qū)[7]，其中感染高危型HPV的陽(yáng)性率為18.67%，卻高于景德鎮(zhèn)地區(qū)[8]報(bào)道，這些差異也許與地域分布、環(huán)境有關(guān)，還與研究者選擇的研究對(duì)象，選取的檢測(cè)方法有關(guān)[9]。各亞型在本地區(qū)檢出率前3位分別為HPV52、16、58，三亞地區(qū)檢出率前3位分別為HPV16、6、58；浙江地區(qū)檢出率前3位分別為HPV16、11、58；貴州地區(qū)檢出率前3位分別為HPV16、52、58，顯然感染的HPV亞型分布存在一定的地區(qū)差異性，這對(duì)于HPV疫苗的研發(fā)及使用，都具有一定的指導(dǎo)作用[10]。

表3 HPV亞型在宮頸病變中分布[n（%）]

HPV感染的年齡分布結(jié)果顯示，HPV感染率與年齡有一定關(guān)系。本組資料中≤20歲組陽(yáng)性率最高為85.29%，明顯高于其它年齡組（P＜0.05），21歲后隨著年齡的增加，其陽(yáng)性率呈下降趨勢(shì)，但大于60歲陽(yáng)性率又有明顯上升，表明年輕女性及老年女性是本地區(qū)HPV感染的主要高發(fā)人群。就這感染特點(diǎn)，年輕女性陽(yáng)性率高也許與患者性生活開始早及生育年齡較小，因這一時(shí)期是處于宮頸鱗柱上皮轉(zhuǎn)化期，易受HPV感染[11]，以及與該年齡段總樣本量太少有關(guān)。而老年女性陽(yáng)性率高可能是由于與機(jī)體絕經(jīng)前后激素水平的改變有關(guān)，若宮頸遭到持續(xù)的HPV高危型感染，可能進(jìn)一步引起宮頸惡變，又特別是絕經(jīng)前感染了HPV高危型沒(méi)有及時(shí)清除，在絕經(jīng)后尤其易于發(fā)展成為宮頸癌[12]。據(jù)李巖[13]研究表明HPV高危型感染與女性陰道內(nèi)環(huán)境的改變存在密切關(guān)系，這也許是引起本地區(qū)年輕女性及老年女性HPV感染率高的另一個(gè)誘因，應(yīng)引起臨床上高度重視。所以，年輕女性及老年女性成為本地區(qū)宮頸癌篩查的主要人群，對(duì)預(yù)防宮頸癌的發(fā)生和早期干預(yù)治療具有重要意義。

從宮頸病變患者感染HPV結(jié)果可以看出，感染HPV高危型陽(yáng)性率隨宮頸病變程度的增加而增加，本研究結(jié)果與顏曉慧等[14]報(bào)道一致，從而說(shuō)明了HPV高危型感染是引起發(fā)生CIN、宮頸癌的首要因素。在宮頸病變患者感染HPV亞型中，經(jīng)分析陽(yáng)性率前4位的亞型，HPV16、52為宮頸病變患者共同感染亞型，而HPV58只出現(xiàn)在宮頸炎、CIN中，HPV51只出現(xiàn)在宮頸炎中，HPV33只出現(xiàn)在CIN中，HPV53、39只有出現(xiàn)在宮頸癌中。由此可見(jiàn)， 本地區(qū) HPV16、52、58、53、51、39 和 33 是常見(jiàn)的高危型，在宮頸癌篩查中應(yīng)引起釋重視。

通過(guò)對(duì)HPV各亞型陽(yáng)性率在宮頸病變中相比較，HPV16、58、56和33型與宮頸病變程度相關(guān)。對(duì)宮頸癌患者進(jìn)行Meta分析，發(fā)現(xiàn)HPV16為宮頸癌患者中最常見(jiàn)亞型[3]，這是因?yàn)镠PV16在促癌物的作用下能引起人胚宮頸上皮細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化[15]。在本文研究中，HPV16在宮頸病變陽(yáng)性率中位于首位，因此針對(duì)宮頸炎患者適時(shí)篩查、及時(shí)治療，對(duì)于防止感染了HPV的宮頸炎患者向CIN、宮頸癌轉(zhuǎn)化具有十分重要的臨床意義。在國(guó)內(nèi)外報(bào)道中，宮頸癌患者感染HPV的主要致病型中，HPV18僅次于HPV16，但在本文的研究中HPV18既不是常見(jiàn)的亞型，又不是主要的致病型，這可能是本地區(qū)HPV基因型分布特點(diǎn)。在宮頸病變中，雖然HPV52檢測(cè)陽(yáng)性率居于2、3位，但是與宮頸病變程度不相關(guān)，然而陽(yáng)性率相對(duì)較低的HPV56、33型，卻與宮頸病變程度相關(guān)，還有待進(jìn)一步研究。本研究認(rèn)為，在宮頸癌篩查中如發(fā)現(xiàn)HPV16、58、56和33型陽(yáng)性的患者，要及時(shí)干預(yù)、治療，以防止其發(fā)展為宮頸癌。

綜上所述，女性感染HPV，特別是感染了HPV高危型，是引起CIN和宮頸癌發(fā)生的主要原因，所以，HPV基因分型檢測(cè)對(duì)于本地區(qū)HPV感染的診斷以及流行病調(diào)查具有十分重要的臨床意義。