惠州市兒童肺炎支原體感染流行病學(xué)及耐藥性分析

林國棟，朱文艷，王 芳

(惠州市第三人民醫(yī)院兒科一區(qū)，廣東 惠州 516001)

肺炎支原體(mycoplasma pneumonia，MP)屬于無細胞壁的病原微生物，是引起兒童呼吸道感染的常見病原體之一[1]。由于MP缺乏細胞壁，因而對于影響細胞壁合成的抗生素具有一定的耐藥性。臨床對于肺炎支原體的治療，多以抑制蛋白質(zhì)、核酸合成的藥物為主，比較常見的如大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、喹諾酮類[2]。兒童階段是人生長發(fā)育的關(guān)鍵階段，對于抗生素的使用要保持高度謹慎，部分毒副作用較強的藥物應(yīng)該避免使用，而毒副作用較小的藥物，如羅紅霉素、阿奇霉素等大環(huán)內(nèi)酯類藥物可以多加考慮。相關(guān)調(diào)查[3]表明，近年來MP感染率有了明顯的上升，抗生素的濫用進一步增加了MP感染的出現(xiàn)，這對臨床治療造成了嚴重的干擾和影響。本研究針對惠州市第三人民醫(yī)院收治的2000例急性下呼吸道感染患兒進行研究，分析惠州市兒童MP感染流行病學(xué)及耐藥情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2017年6月至2018年6月在本院住院的急性下呼吸道感染患兒2000例，均有典型的臨床癥狀或表現(xiàn)，如咳嗽、發(fā)熱、氣促、喘息等?；純涸诰驮\時予以采集靜脈血2 mL，并于當日送檢。其中男1042例，女958例；<1歲374例，1～3歲396例，>3～5歲411例，>5～7歲405例，>7歲414例；春季檢測478例，夏季檢測512例，秋季檢測491例，冬季檢測519例。

1.2 檢測方法

1.2.1 MP-IgM檢測

采用血清MP被動凝集法檢測，試劑盒產(chǎn)自日本富士瑞必歐株式會社，型號為SERODIA-MYCOII。嚴格按照說明書和相關(guān)要求進行操作：將100、25 μL的血清稀釋液分別加入反應(yīng)板(12×8)第1孔、第2—12孔，另外第1—12孔加入25 μL待檢血清，并進行套倍稀釋處理，第2孔加入未致敏因子(25 μL)，第3—12孔各加入致敏因子(25 μL)，第3—12孔最終稀釋倍數(shù)(1:40、1:80)，充分混勻，反應(yīng)板加蓋，放置3 h，注意調(diào)節(jié)室溫在15～30 ℃。對凝集反應(yīng)圖像進行觀察和讀取，若MP-IgM在1:160及以上，則表示MP感染陽性。

1.2.2 MP快速培養(yǎng)

針對MP-IgM 1:160及以上的患兒，進行MP快速培養(yǎng)鑒定(隨機抽取100例樣本)及藥物敏感試驗。藥敏板：1)紅霉素高濃度、低濃度分別為1.0、0.1 mg·L-1；2)羅紅霉素高濃度、低濃度分別為2.0、0.1 mg·L-1；3)克拉霉素高濃度、低濃度分別為1.0、0.1 mg·L-1；4)阿奇霉素高濃度、低濃度分別為1.0、0.1 mg·L-1；5)乙酰螺旋霉素高濃度、低濃度分別為1.0、0.1mg/L；6)克林霉素高濃度、低濃度分別為4.0、1 mg·L-1；7)左氧氟沙星高濃度、低濃度分別為4.0、1 mg·L-1。

培養(yǎng)方法：取分裝干粉培養(yǎng)基1支，打開蓋子(保證無菌操作)，將1.5 mL超純水加入其中，待其溶解后加入50 μL培養(yǎng)液至藥敏板陰性孔(C-孔)中。用咽拭子(棉試紙)采集標本，然后將棉試紙第一時間放置進培養(yǎng)基瓶內(nèi)，反復(fù)攪動并提取棉試紙，對著瓶壁擠出液體，取出棉試紙，液體混合均勻，吸取50 μL加入各藥敏板孔及觀察孔(C+孔)中，丟棄培養(yǎng)瓶，藥敏板放置于溫度為35～37 ℃的孵箱培養(yǎng)，培養(yǎng)24 h后觀察結(jié)果。

1.3 判斷標準

1.3.1 陽性和陰性判斷標準

1)陽性：陽性對照孔培養(yǎng)基變黃色；2)陰性：陽性對照孔培養(yǎng)基不變色。

1.3.2 藥敏結(jié)果判斷標準

A孔為藥物高濃度，B孔為藥物低濃度。敏感：藥敏板A孔不變色，B孔不變色；中敏： A孔不變色，B孔變黃色；耐藥：A孔變黃色，B孔變黃色。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析使用SPSS21.0統(tǒng)計軟件包，計數(shù)資料以例(%)描述。

2 結(jié)果

2.1 不同季節(jié)MP感染情況

冬季感染率最高，夏季感染率最低，見表1。

表1 不同季節(jié)MP感染情況

2.2 不同性別MP感染情況

男性MP感染率低于女性，見表2。

表2 不同性別MP感染情況

2.3 不同年齡MP感染情況

<1歲幼兒MP陽性率最低，>7歲的兒童MP陽性率最高；隨著年齡的增加，MP陽性率逐漸上升。見表3。

表3 不同年齡MP感染情況

2.4 不同抗生素耐藥情況

對MP-IgM≥1:160患兒隨機抽取無菌采集咽拭子100例作MP快速培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗，79例培養(yǎng)有支原體生長。不同抗生素耐藥情況見表4，顯示阿奇霉素的耐藥性比較低，克拉霉素、羅紅霉素、紅霉素的耐藥性比較高。

表4 不同抗生素耐藥情況 n=79

3 討論

兒童急性下呼吸道感染疾病中，最為常見的病原體之一為MP，在自然界中廣泛存在，飛沫傳播是其主要的傳播途徑，因此傳染性非常強[4]。相關(guān)調(diào)查[5]表明，因MP引起的呼吸道感染逐漸增多，并且日趨流行，越來越多的嬰幼兒受到急性下呼吸道感染的影響，導(dǎo)致健康水平下降，生長發(fā)育因此受限。MP感染具有較強的隱匿性，起病早期并不具備典型的臨床表現(xiàn)，通過X線片等手段檢查也不具有明顯的特異性，因而診斷存在較大的難度，多數(shù)情況下需通過實驗室檢查或者病原體分離、培養(yǎng)才能確診；但普通培養(yǎng)的陽性率比較低，并且所需的時間比較長[6]。本研究選擇的MP培養(yǎng)方式為快速培養(yǎng)，培養(yǎng)的速度比較快，陽性符合率也比較高。

人類對MP具有普遍易感染性，而嬰幼兒群體因為年齡、身體條件等原因，感染的可能性更高，并且不同年齡段的兒童，感染率有所不同。本研究結(jié)果顯示：>7歲的兒童MP陽性率最高，<1歲幼兒MP陽性率最低，并且隨著年齡的增加，MP陽性率逐漸上升。這可能是因為嬰幼兒群體中，7歲以上的兒童為學(xué)齡前兒童，人群比較密集，呼吸道傳播的可能性更大，并且相較于低齡兒童，MP初次感染時的特異性更高，更容易檢出[7]；在性別方面，男性MP感染率低于女性，而基本資料中的女性要少于男性，這就可以排除人數(shù)因素，因此可以認為女性相較于男性，對MP存在易感性，但其真實性還有待進一步研究；在季節(jié)方面，冬季感染率最高，夏季感染率最低，這與所處的地區(qū)有很大關(guān)系，亞熱帶、熱帶地區(qū)在冬季時比較濕冷，室外活動減少，室內(nèi)空氣的流動相對較差，相互感染的可能性增加[7]；另外本研究結(jié)果還顯示，阿奇霉素的耐藥性比較低，克拉霉素、羅紅霉素、紅霉素的耐藥性比較高。分析原因認為可能與阿奇霉素組織濃度高、藥物從細胞內(nèi)釋放緩慢等因素有關(guān)[8]。

綜上所述，MP感染與患兒的性別、年齡以及季節(jié)有關(guān)，女性感染率高于男性，年齡越大感染率越高，冬季的感染率高于其他季節(jié)，阿奇霉素的耐藥率比較低，克拉霉素、羅紅霉素等耐藥率比較高，臨床治療時應(yīng)合理地選擇藥物。