藤黃不同炮制品急性毒性研究

趙琴

【摘要】目的：比較生藤黃和清水制藤黃的急性毒性。方法：通過預實驗計算出生藤黃和清水制藤黃的最小全致死量Dm和最大全不致死量Dn，進行生藤黃和清水制藤黃對小鼠的急性毒性試驗。 結果：急性毒性結果顯示，生藤黃醇提物對小鼠單次ig給藥的半數(shù)致死量（LD50）為2422.95 mg·kg-1 ，95%可信區(qū)間為1935.154～3070.311 mg·kg-1，清水制藤黃的半數(shù)致死量為LD50為2791.368 mg·kg-1，95%可信區(qū)間為2074.983～3543.582mg·kg-1。 結論：藤黃各炮制品的急毒實驗結果表明，藤黃經(jīng)炮制后毒性顯著降低。

【關鍵詞】生藤黃醇提物;清水制藤黃醇提物;急性毒性;半數(shù)致死量;半數(shù)致死濃度

[Abstract]Objective：To analyze the toxicity changes of the Gambogic. Methods： The acute toxicity of Gambogic and its processed products was compared on mice in accordance with classical test method for acute toxicity and experimental data were calculated with bliss method.? Results： acute toxicity results showed that students gambogic alcohol extract on mice given a single oral half lethal dose （LD50） 2422.95 mg·kg-1， 95% confidence interval for 1935.154～3070.311 mg·kg-1， half of the water system of Garcinia lethal amount of LD50 for 2791.368mg·kg-195% confidence interval for2074.983～3543.582mg·kg-1.Conclusion：The toxicity of gambogic decreased significantly after processing.

【Key words】raw gamboge alcohol extract; water system of gambogic alcohol extract; acute toxicity; median lethal dose; median lethal concentration

【中圖分類號】R821.4+2【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2019）07-057-01

藤黃為藤黃科藤黃屬植物藤黃和印支藤黃的干燥膠樹脂，又名海藤、玉皇、月黃，始載于《海藥本草》[1]木部，其呈圓柱狀或不規(guī)則塊狀物，色黃質(zhì)脆，味酸、辛、澀，有毒。藤黃具有散結、解毒、止血、殺蟲的功效。由于藤黃毒性較大，用藥安全不易保證，一大程度限制了臨床應用[2-5]。本實驗比較了藤黃生品醇提物和清水制品醇提物的急性毒性和各炮制品體外培養(yǎng)小鼠脾淋巴細胞的方法，探討藤黃各炮制品的毒性大小。

1 材料

1.1 藥材和動物 藤黃購自安徽亳州藥材市場。昆明種小鼠，（20±2）g，雌雄各半，上海斯萊克實驗動物有限公司。

1.2 試劑 RPMI1640培養(yǎng)基（HyClone，批號：NZM1294）;小牛血清（四季青，批號：150208）;乙醇等分析試劑均購自上海國藥集團試劑有限公司。

2 方法

2.1 藤黃各炮制品醇提物的制備

2.1.1 藤黃生品 將原藥材揀去雜質(zhì)，軋成粗粒。

2.1.2 藤黃清水制品 分別取生藤黃粗粉，放入燒杯內(nèi)，加水10倍量。煮沸，濾過，不斷攪拌，中途添加沸水，連續(xù)煮2h，濃縮至糊狀，取出，低溫干燥，制備得到2h的清水制藤黃。

2.1.3 95%乙醇提取生藤黃、清水制藤黃：取生藤黃、清水制藤黃各100g，分別加入6、4、2倍量乙醇提取3次，時間分別為20、15、15min，濾過，合并濾液，回收乙醇，55℃下干燥，取出備用。

2.2 小鼠急性毒性正式實驗

取小白鼠110只，雌雄各半，按體重隨機分為11組，每組10只。組間計量為1：0.65。實驗前禁食不禁水16h，按0.2ml·g-1進行灌胃1次，空白組給予等體積的0.8%CMC-Na溶液。給藥后連續(xù)觀察14d。觀察小鼠的毛色、精神、動度、進食、飲水等一般情況、中毒癥狀及死亡情況。

2.3 統(tǒng)計方法 用Bliss法計算半數(shù)致死量（LD50），半數(shù)抑制濃度（IC50），用SPSS18.0軟統(tǒng)計分析。

3 結果分析

3.1 小鼠急性毒性

3.1.1 小鼠死亡情況

根據(jù)表1小鼠死亡數(shù)，計算出生藤黃醇提物對小鼠的半數(shù)致死量為2422.95 mg·kg-1 ，95%可信區(qū)間為1935.154～3070.311 mg·kg-1。根據(jù)表2小鼠死亡數(shù)，計算出清水制藤黃對小鼠的半數(shù)致死量為2791.368 mg·kg-1 95%可信區(qū)間為2074.983～3543.582mg·kg-1 。

3.1.2 臨床表現(xiàn)

在一次性ig給藥后2h，小鼠出現(xiàn)不同程度的腹瀉，便便黃色、肛門口黃色、活動滯呆、飲食減少、精神狀態(tài)萎靡、被毛蓬松、眼不睜或半睜。給藥4h后，高劑量組出現(xiàn)動物死亡，小鼠脫水、腹瀉致死，全身緊縮，僵硬。給藥后2d～7d都出現(xiàn)小鼠死亡，7d后活動開始正常，飲食正常、大便正常，不在出現(xiàn)小鼠死亡。

3.1.3 生藤黃和清水制藤黃毒性比較

4 討論

藤黃經(jīng)加熱反復煮炮制后，其毒性在一定程度上有所下降，加熱可能是降低藤黃毒性的主要機理。生藤黃和清水制藤黃體外對小鼠脾淋巴細胞都有致炎作用，生品>清水制品，說明經(jīng)炮制后藤黃毒性有所降低。綜上所述，藤黃經(jīng)炮制后毒性在一定程度上有所下降，但深入探討炮制減毒機理提供具體作用靶點的實驗有待進一步研究。

參考文獻：

[1] 李珣.尚志鈞輯校.海藥本草[M].蕪湖：皖南醫(yī)學院科研科印，1983：26.

[2] 賀百花，彭求賢，高倩.中藥藤黃藥理作用研究進展[J].河北北方學院學報，2009，26 （5）：71.

[3] 徐文龍，楊柏霖.中藥藤黃藥理作用的研究進展[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2013，22（11）：1239.王園園，汪盈盈.中藥藤黃研究進展[J].長江大學學報，2014，23（11）：50.

[4] 歐水平，王森，楊啟悅等.有毒中藥藤黃炮制“減毒增效”作用的研究進展[J].中草藥，2011， 42（12）：2560.

[5] 丁安偉，束曉云，張麗，唐于平.甘遂飲片的毒效物質(zhì)基礎研究[C].全國第8屆天然藥物資源學術研討會論文集，656.