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    徐香獼猴桃莖段快繁技術(shù)研究

    2019-07-29 11:17:52王建萍李公存顧亮沙玉芬劉笑宏蘇佳明
    落葉果樹 2019年4期
    關(guān)鍵詞:草炭莖段生根

    王建萍,李公存,顧亮,沙玉芬,劉笑宏,蘇佳明

    (煙臺(tái)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,山東煙臺(tái) 265500)

    徐香獼猴桃萌芽率、成枝率和坐果率高,豐產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn),適應(yīng)性強(qiáng)。果實(shí)圓柱形,果皮黃綠色,被黃褐色硬刺毛,果肉綠色、質(zhì)細(xì)多汁、酸甜可口,單果重75~110g,最大果重137g,具有極高的推廣價(jià)值[1]。獼猴桃的常規(guī)育苗方法主要是實(shí)生苗嫁接法和枝條扦插繁殖法。嫁接苗童期生長(zhǎng)緩慢,育苗周期達(dá)2年以上,扦插苗成活率極低[2]。因此傳統(tǒng)的育苗方法已經(jīng)不能滿足日益增長(zhǎng)的獼猴桃產(chǎn)業(yè)需求。組織培養(yǎng)具有繁殖速度快、繁殖系數(shù)大,而且具有繁殖后代整齊一致、能保持原有品種優(yōu)良性狀的優(yōu)點(diǎn),本試驗(yàn)對(duì)徐香獼猴桃的莖段快速繁殖技術(shù)進(jìn)行了研究,探討了不同培養(yǎng)階段不同培養(yǎng)基對(duì)培養(yǎng)效果的影響,旨在為生產(chǎn)上進(jìn)行徐香獼猴桃工廠化生產(chǎn)提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    以徐香獼猴桃當(dāng)年生健壯枝條的莖段為組織培育材料。

    1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    初代培養(yǎng),采用MS培養(yǎng)基,添加3種激素ZT(玉米素)、6-BA(6-芐氨基腺嘌呤)、NAA(萘乙酸),設(shè)置6個(gè)不同處理(表1)。增殖培養(yǎng),采用MS培養(yǎng)基,添加3種激素,6-BA、IAA(吲哚乙酸)、GA3(赤霉素),設(shè)置8個(gè)處理(表2)。生根培養(yǎng),采用1/2MS培養(yǎng)基,添加2種激素,NAA、IBA(吲哚丁酸),設(shè)置9個(gè)處理(表3)。煉苗及移栽,使用河沙、蛭石、草炭土3種基質(zhì),設(shè)置5個(gè)處理(表4)。分別調(diào)查組培苗各階段的生長(zhǎng)情況,移栽的成活率等。

    1.3 試驗(yàn)方法

    剪掉徐香獼猴桃當(dāng)年生健壯枝條上的葉片,用自來(lái)水沖洗30~60分鐘,在超凈工作臺(tái)上嚴(yán)格消毒,過(guò)程為:先用75%酒精浸泡45秒,再用0.1%升汞浸泡10~12分鐘,最后用無(wú)菌水沖洗4~6次。將消毒好的枝條剪成2cm左右的帶芽莖段,縱剖成兩半,將剖面向下接種到預(yù)先配制好的初代培養(yǎng)基上,分化成苗后,轉(zhuǎn)到增殖培養(yǎng)基上,經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng)形成一定數(shù)量的試管苗后,選取高約2cm以上的健壯幼苗轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上。生長(zhǎng)至高約3cm、并生有3~4條1cm左右的新根時(shí),即可煉苗移栽。在自然光下馴化煉苗4~6天,然后揭開瓶蓋進(jìn)行透氣鍛煉,每天噴清水2~3次,3天后小心取出幼苗,洗凈根部的培養(yǎng)基進(jìn)行移栽。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 MS培養(yǎng)基加不同激素對(duì)徐香獼猴桃初代培養(yǎng)的影響

    由表1可以看出,徐香獼猴桃莖段在不同初代培養(yǎng)基中的誘導(dǎo)分化植株情況不同,其中處理6的生長(zhǎng)情況最好,成活率最高,為90.0%,生長(zhǎng)50天后平均株高最高,為2.9cm,且生長(zhǎng)健壯;處理4的生長(zhǎng)健壯,生長(zhǎng)50天后平均株高較高,為2.8cm,但是成活率較處理6低,為66.7%;處理1的生長(zhǎng)情況最差,成活率僅有16.7%,平均株高1.7cm,且生長(zhǎng)細(xì)弱。因此,徐香獼猴桃初代培養(yǎng)適合的培養(yǎng)基為MS+ZT 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L。

    表1 MS培養(yǎng)基加不同激素對(duì)徐香獼猴桃初代培養(yǎng)的影響

    2.2 MS培養(yǎng)基加不同激素對(duì)徐香獼猴桃增殖培養(yǎng)的影響

    由表2可以看出,徐香獼猴桃莖段在不同激素的MS培養(yǎng)基上繼代增殖情況不同,隨著繼代次數(shù)的增多,增殖系數(shù)基本呈上升的趨勢(shì)。其中處理6的增殖及生長(zhǎng)情況最好,第5代時(shí)增殖系數(shù)達(dá)6.8,叢生芽多且生長(zhǎng)健壯;處理2和處理5的增殖和生長(zhǎng)情況較好,第5代時(shí),增殖系數(shù)分別達(dá)6.0和5.6,叢生芽均較多,生長(zhǎng)較健壯;處理1、4、7和8的增殖情況均一般,且處理4、7和8出現(xiàn)了不同程度的玻璃化現(xiàn)象。因此,徐香獼猴桃繼代培養(yǎng)適合的培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.5mg/L+IAA 0.2mg/L+GA30.1mg/L。

    表2 MS培養(yǎng)基加不同激素對(duì)徐香獼猴桃繼代增殖的影響

    2.3 1/2培養(yǎng)基加不同激素對(duì)徐香獼猴桃生根培養(yǎng)的影響

    由表3可以看出,徐香獼猴桃莖段在不同激素的1/2培養(yǎng)基上生根情況不同,處理5生根最好,生根率100%,單株生根5.8條,平均根長(zhǎng)2.5cm,生長(zhǎng)粗壯;處理2、6生根情況較好,生根率均為100%,生根分別為5.2和5.0條,平均根長(zhǎng)較長(zhǎng),分別為2.2cm和2.3cm,根系均粗壯;處理3、8生根率較高,均為83.3%,單株生根分別為4.2和3.3條,平均根長(zhǎng)較短,分別為2.0cm和1.9cm;處理1、4生根情況較差,生根率分別僅有16.6%和33.0%,單株生根分別為0.83和1.0條,平均根長(zhǎng)0.5cm和0.9cm。因此,徐香獼猴桃適合的生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.15mg/L+IBA 0.1mg/L。

    2.4 煉苗與移栽

    由表4可看出,當(dāng)基質(zhì)為蛭石+草炭土?xí)r,徐香獼猴桃試管苗移栽成活率最高,為90%;當(dāng)基質(zhì)為河沙+草炭土?xí)r,移栽成活率也較高,為87%;當(dāng)基質(zhì)分別為河沙和蛭石時(shí),移栽成活率較低,分別僅為27%和22%,這可能是由于單用河沙和蛭石保水性差;當(dāng)基質(zhì)為草炭土?xí)r,移栽成活率也不高,為47%,這可能是因?yàn)椴萏客镣笟庑圆睢R虼?,煉苗后將徐香獼猴桃移栽到蛭石+草炭土基質(zhì)中,確保成活率。

    表3 1/2MS培養(yǎng)基加不同激素對(duì)徐香獼猴桃生根的影響

    表4 不同基質(zhì)對(duì)徐香獼猴桃試管苗移栽的影響

    3 小結(jié)與討論

    在培養(yǎng)基中加入適當(dāng)?shù)闹参锷L(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(人工合成的植物激素)后,才能誘導(dǎo)細(xì)胞的分裂,愈傷組織的形成和生長(zhǎng)以及根、芽的分化等變化[3]。朱學(xué)棟等[4]認(rèn)為MS+ZT 0.8mg/L+NAA 0.1mg/L能很好地誘導(dǎo)紅陽(yáng)獼猴桃莖段分化。本研究采用較低濃度的ZT、6-BA與低濃度的NAA搭配,對(duì)徐香獼猴桃誘導(dǎo)效果較好,最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+ZT 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L,成活率達(dá)90%。

    本研究結(jié)果表明,徐香獼猴桃最佳增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.5mg/L+IAA 0.2mg/L+GA30.1mg/L,第5代增殖系數(shù)達(dá)6.8。這與文國(guó)琴[5]使用較高的激素濃度MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.4mg/L+GA30.1mg/L組合相比有些差異。但GA3濃度太低不利于增殖培養(yǎng),6-BA濃度太高容易出現(xiàn)植株玻璃化。本研究發(fā)現(xiàn)繼代培養(yǎng)次數(shù)影響增殖效果,第5代時(shí)的增殖系數(shù)明顯高于第1代和第3代,這與Standardi[6]研究的獼猴桃繼代次數(shù)越多,芽增殖率越高的結(jié)果一致。

    馬歡[7]認(rèn)為在1/2MS+IBA 1.0mg/L培養(yǎng)基上獼猴桃生根效果較好,低濃度的IBA不適宜獼猴桃生根。本研究結(jié)果表明在1/2MS+NAA 0.1mg/L+IBA 0.1mg/L培養(yǎng)基上,徐香獼猴桃生根效果很好,生根率達(dá)100%,低濃度的NAA和IBA搭配也能有效的促進(jìn)獼猴桃生根。

    移栽時(shí)采用蛭石+草炭土作為基質(zhì)成活率最高,由此可見(jiàn)獼猴桃移栽對(duì)基質(zhì)的保水性及透水性要求均較高,透氣性差容易爛根,保水性差小苗容易萎蔫。

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