HPIP與VIMENTIN在宮頸鱗癌組織中的表達(dá)

徐紅苗，孫盛梅

（佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003）

宮頸癌是婦科最常見的腫瘤之一，是僅次于乳腺癌的第2位常見女性惡性腫瘤，是全世界排名第4位的常見惡性腫瘤，對(duì)于女性來說無疑是優(yōu)先考慮的健康“焦點(diǎn)”，需認(rèn)真對(duì)待。雖然宮頸癌的篩查已作為基礎(chǔ)婦科檢查手段，手術(shù)的操作技巧、先進(jìn)放療設(shè)備以及聯(lián)合化療等治療方案也已逐漸改進(jìn)，針對(duì)早中期宮頸癌患者術(shù)前行輔助化療有助于縮小腫瘤體積，降低轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)以及有助于保留年輕患者的生育功能[1]，但臨床上對(duì)于晚期和復(fù)發(fā)型宮頸癌的治療效果不盡如人意，預(yù)后極差。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)和基因組學(xué)的發(fā)展，靶向藥物治療已經(jīng)成為治療晚期或復(fù)發(fā)型宮頸癌的研究熱點(diǎn)之一，并在宮頸癌的治療中取得較好的臨床療效[2]，但是靶向藥物不良反應(yīng)大，對(duì)于這類患者來說靶向藥物并不能顯著改善生存質(zhì)量，所以，探尋臨床治療療效更佳、不良反應(yīng)更小、生存質(zhì)量更高的治療方法仍是我們需要攻破的難題。研究顯示，宮頸癌侵襲、轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡的主要原因，因此，對(duì)腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究具有重要的意義。腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)是腫瘤上皮細(xì)胞的極性和細(xì)胞間連接逐漸喪失、細(xì)胞骨架重構(gòu)，從而使上皮細(xì)胞變形、遷移和運(yùn)動(dòng)能力增加，獲得間質(zhì)細(xì)胞特征的過程，這一過程被稱為上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mensenchymal transition，EMT）現(xiàn)象[3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年10月～2018年10月于佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診患者，行婦科手術(shù)，術(shù)后由病理科存檔的蠟塊組織，其中選擇宮頸鱗癌組織標(biāo)本50例（實(shí)驗(yàn)組），宮頸上皮內(nèi)瘤變（包括LSIL和HSIL）20例，另選擇因子宮肌瘤行全子宮切除術(shù)，宮頸TCT及HPV篩查均為陰性的20例標(biāo)本（對(duì)照組），以上標(biāo)本資料具備以下特點(diǎn)：臨床相關(guān)資料完整，包括婦科檢查、病理報(bào)告單、CT及磁共振報(bào)告等；術(shù)前未行抗腫瘤相關(guān)治療并且除外其他惡性腫瘤疾病；年齡21～72歲。50例宮頸鱗癌患者按2009年FIGO分期臨床分期分為Ⅰa期7例，Ⅰb期24例，Ⅱa期19例，按2008年WHO病理分級(jí)分類標(biāo)準(zhǔn)，其中高分化Ⅰ級(jí)者26例、中分化Ⅱ級(jí)14例、低分化Ⅲ級(jí)10例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病理8例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病理42例。所有患者臨床病理資料由病理科兩人以上專業(yè)醫(yī)師確診，并提供完整資料。

1.2 判定與統(tǒng)計(jì)方法

HPIP與VIMENTIN蛋白均表達(dá)在腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)，陽性均呈棕黃色顆粒。光鏡調(diào)節(jié)為高倍視野，使其每個(gè)高倍視野內(nèi)的細(xì)胞數(shù)為100個(gè)，查看組織細(xì)胞染色情況，分別對(duì)著色細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞的著色強(qiáng)度進(jìn)行計(jì)數(shù)。應(yīng)用Choi[4]等采用的半定量評(píng)分方法，評(píng)分方法如下：把陽性細(xì)胞染色強(qiáng)弱記為A（不著色為0分，淡黃色為1分，黃色為2分，棕黃色為3分）。把陽性細(xì)胞百分比記為B（1%～10%陽性細(xì)胞記為1分，11%～50%為2分；51%～80%為3分；81%～100%為4分）。A與B的乘積進(jìn)行半定量分析：0分為（-），1～4分為（+），5～8分為（++），9～12分為（+++）。統(tǒng)計(jì)分析最終結(jié)果，認(rèn)定（-）為陰性，（+）至（+++）為陽性。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 24進(jìn)行分析，樣本陽性率采用卡方（x2）檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料來評(píng)估，以P＜0.05則表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究?jī)蓚€(gè)蛋白相關(guān)性用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，以a=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

隨著正常宮頸、上皮內(nèi)瘤變宮頸到宮頸癌組織的轉(zhuǎn)變，HPIP及VIMENTIN的陽性率隨之升高，差異有顯著性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

隨著疾病惡性程度越高，HPIP、VIMENTIN蛋白的陽性表達(dá)水平越高；年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而與臨床分期、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表1 正常宮頸、上皮內(nèi)瘤變宮頸到宮頸癌組織的轉(zhuǎn)變，HPIP及VIMENTIN的陽性率比較（n，%）

表2 HPIP、VIMENTIN蛋白的陽性比較（n，%）

近年來，宮頸癌的發(fā)病率呈現(xiàn)出明顯的上升趨勢(shì)，且逐漸趨于“年輕化”。人造血相關(guān)的PBX作用蛋白質(zhì)（HPIP）是近期發(fā)現(xiàn)的人類蛋白，在2000年，有學(xué)者首次以PBX1為誘餌，利用酵母雙雜交技術(shù)從胎兒肝臟cDNA文庫中提取得到的HPIP蛋白[5]。HPIP蛋白具有許多功能，是癌發(fā)生過程中重要的分子生物標(biāo)志物。有研究表明，HPIP蛋白的表達(dá)與乳腺癌，肺癌，頭頸部鱗狀細(xì)胞癌，甲狀腺癌，胃癌等腫瘤的發(fā)生與轉(zhuǎn)移有關(guān)，由此可見HPIP蛋白與腫瘤有著密切關(guān)聯(lián)。波形蛋白（VIMENTIN）是細(xì)胞中間絲蛋白家族的成員，它主要表達(dá)于間充質(zhì)，波形蛋白異位使上皮細(xì)胞的骨架發(fā)生重構(gòu)，上皮細(xì)胞形態(tài)和生物結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，變成了更易移動(dòng)的纖維樣細(xì)胞（即間質(zhì)細(xì)胞），這種誘導(dǎo)機(jī)制就是EMT現(xiàn)象，EMT使腫瘤更易侵襲及轉(zhuǎn)移。以細(xì)胞角蛋白為主的細(xì)胞骨架轉(zhuǎn)變?yōu)橐圆ㄐ蔚鞍诪橹鲝亩鸶淖兪荅MT過程中的重要步驟，即可以表示為上皮標(biāo)記物如E-cadherin等蛋白等表達(dá)降低，間質(zhì)標(biāo)記物如VIMENTIN蛋白等表達(dá)增加。

綜上所述，HPIP蛋白、VIMENTIN蛋白分別在正常組織中、上皮內(nèi)瘤變組織及宮頸鱗癌組織的表達(dá)呈上升趨勢(shì)，并且臨床分期越重、病理分級(jí)越高、伴隨淋巴轉(zhuǎn)移的癌組織中兩種蛋白表達(dá)越強(qiáng)。HPIP表達(dá)也與VIMENTIN呈正相關(guān)，HPIP蛋白可能通過參與EMT過程促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移。HPIP蛋白可能是預(yù)測(cè)宮頸鱗癌預(yù)后及生存率參考的指標(biāo)，同時(shí)抑制HPIP蛋白的表達(dá)可能作為治療宮頸癌的新靶點(diǎn)。