30%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑的高效液相色譜分析

陸東亮，卜德紅，苑志軍

（1.上海杜邦農(nóng)化有限公司，上海200137；2.上海生農(nóng)生化制品股份有限公司，上海201619）

吡丙醚又稱蚊蠅醚，是苯醚類昆蟲生長調(diào)節(jié)劑，屬保幼激素類的新型殺蟲劑，具有內(nèi)吸轉(zhuǎn)移活性、低毒、對(duì)生態(tài)環(huán)境影響小和持效期長等特點(diǎn)，對(duì)蒼蠅、蚊蟲等衛(wèi)生害蟲具有很好的防治效果，同時(shí)對(duì)煙粉虱、介殼蟲、小菜蛾、木虱、薊馬等也有良好的防治效果，能夠有效抑制幼蟲化蛹和羽化。蟲螨腈是新型吡咯類殺蟲劑，作用于昆蟲體內(nèi)細(xì)胞的線粒體，在昆蟲體內(nèi)多功能氧化酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)闅⑾x活性化合物，通過抑制二磷酸腺苷向三磷酸腺苷的轉(zhuǎn)化，使細(xì)胞合成因缺少能量而停止生命活動(dòng)，該藥具有胃毒和觸殺作用、殺蟲廣譜、與其他殺蟲劑無交互抗性等特點(diǎn)[1-2]。但有關(guān)吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑的高效液相色譜分析方法，目前尚未見到公開報(bào)道。

該實(shí)驗(yàn)建立使用的是Kromasil C18柱和紫外可變波長檢測器，以乙腈-水為流動(dòng)相的液相色譜分析方法，用外標(biāo)法對(duì)有效成分進(jìn)行定量分析。該方法同時(shí)適用于吡丙醚和蟲螨腈原藥及制劑的分析，具有簡便、快速、準(zhǔn)確、分離效果好的特點(diǎn)，用于產(chǎn)品質(zhì)量的檢測分析。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilengt 1260高效液相色譜儀，具有紫外檢測器和自動(dòng)進(jìn)樣器；Agilengt色譜工作站；色譜柱：Kromasil C18 250 mm×4.6 mm（id）不銹鋼柱；紫外分光光度計(jì)；乙腈：色譜純；水：二次蒸餾水；吡丙醚、蟲螨腈標(biāo)準(zhǔn)品：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)；30%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑（上海生農(nóng)生化制品股份有限公司）。

1.2 色譜條件

流量：1.5 mL/min；柱溫：25℃；檢測波長：254 nm；進(jìn)樣體積：5 μL；流動(dòng)相：乙腈 + 水 =65+35（V/V）；保留時(shí)間：蟲螨腈約12.4 min，吡丙醚約14.6 min。

上述參數(shù)可根據(jù)儀器特點(diǎn)進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果，典型液相色譜分離圖見圖1。

圖1 30%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑液相色譜圖

1.3 測定步驟

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱量吡丙醚和蟲螨腈標(biāo)樣各約0.05 g（精確至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容后備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱量試樣約0.33 g（精確至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，用0.45 μm過濾膜過濾后備用。

1.3.3 測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針吡丙醚和蟲螨腈的相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣測定。

1.3.4 計(jì)算

將測得的兩針試樣溶液以及試樣溶液前后兩針標(biāo)樣溶液中吡丙醚（蟲螨腈）峰面積分別進(jìn)行平均。吡丙醚（蟲螨腈）質(zhì)量分?jǐn)?shù)X（%）按下式計(jì)算：

式中：A1—標(biāo)樣溶液中吡丙醚（蟲螨腈）峰面積的平均值；A2—試樣溶液中吡丙醚（蟲螨腈）峰面積的平均值；m1—吡丙醚（蟲螨腈）標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2—試樣的質(zhì)量，g；P—吡丙醚（蟲螨腈）標(biāo)樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

兩次平行測定結(jié)果之差應(yīng)不大于0.3%，取其算數(shù)平均值作為測定結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件選擇

2.1.1 檢測波長的選擇

對(duì)吡丙醚和蟲螨腈標(biāo)樣溶液分別用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行全波長掃描，得到相應(yīng)的吸收波長與吸光度的紫外吸收光譜圖。當(dāng)選用254 nm作為檢測波長時(shí)，兩者均具有較強(qiáng)的吸收峰，同時(shí)雜質(zhì)干擾小，流動(dòng)相無吸收。因此，為兼顧兩者，將檢測波長定為254 nm[3-5]。

2.1.2 流動(dòng)相的選擇

根據(jù)吡丙醚和蟲螨腈的特點(diǎn)，以不同比例的甲醇-水和乙腈-水作為流動(dòng)相進(jìn)行分離檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在乙腈-水體積比為65∶35（V/V）時(shí)，分離效果好，峰型對(duì)稱，基線平穩(wěn)[6-7]。

2.2 線性相關(guān)性測定

分別稱取99.5%吡丙醚標(biāo)樣0.134 2 g和98.0%蟲螨腈標(biāo)樣0.255 8 g于500 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度。準(zhǔn)確吸取 5 mL、10 mL、15 mL、20 mL、25 mL于5只100 mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻后進(jìn)樣分析。以標(biāo)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：吡丙醚Y=2.2298X+2.9000，相關(guān)系數(shù)r=1.0；蟲螨腈Y=5.233 2X+4.418 7，相關(guān)系數(shù)r=1.0，數(shù)據(jù)見表1。

表1 20%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑線性測定

2.3 方法精密度測定

對(duì)同一30%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑按上述色譜操作條件下重復(fù)測定6次，吡丙醚、蟲螨腈含量平均值分別為10.26%和20.22%，標(biāo)準(zhǔn)偏差吡丙醚、蟲螨腈分別為0.013%和0.019%，變異系數(shù)吡丙醚、蟲螨腈分別為0.130%和0.094%，結(jié)果見表2。

表2 20%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑精密度測定

2.4 方法準(zhǔn)確度測定

采用標(biāo)準(zhǔn)加入法，在已知含量的30%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑中加入一定量的吡丙醚和蟲螨腈標(biāo)準(zhǔn)品，按上述色譜條件分析測定，計(jì)算回收率，結(jié)果如表3。吡丙醚添加回收率在99.33%～100.63%之間，平均回收率為99.78%；蟲螨腈添加回收率在99.16%～99.95%之間，平均回收率為99.43%。由表3可知該法準(zhǔn)確度較高，可準(zhǔn)確測量。

表3 30%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑回收率測定

3 結(jié)論

綜上所述，實(shí)驗(yàn)建立的30%吡丙醚·蟲螨腈懸浮劑中有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的高效液相色譜分析方法線性關(guān)系良好，精密度和準(zhǔn)確度高，并具有操作簡便、快速、分離效果好等優(yōu)點(diǎn)，可適用于產(chǎn)品質(zhì)量分析檢測的需要。