茶樹胚根倒接方法及不同砧穗品種的嫁接效果

張永利 王燁軍 蘇有健 羅毅 孫宇龍 廖珺 謝明之 桂利權 吳衛(wèi)國

摘 ?要 ?為了研究茶樹胚根倒接嫁接方法的優(yōu)劣，篩選茶樹胚根倒接方法的適宜根砧、接穗品種，通過田間試驗，設置胚根順接法與倒接法2種嫁接方法，祁門櫧葉種、黃山大葉種、松蘿種3種根砧，紅旗1號與漕溪1號2種接穗，在不同時期取樣觀察嫁接苗愈合、成活及生長情況。結果表明：茶樹胚根嫁接后40 d愈合率為93.93%，平均成活率為99.26%;80 d后嫁接口已完全愈合，平均成活率為90.50%;145 d后平均成活率為76.1%，平均株高為20.22 cm，葉片數(shù)為5.89，平均根粗為3.73 cm;倒接法早期（40 d）愈合稍慢，但后期（145?d）生長加速，甚至超過順接法;漕溪1號接穗為半木質化新梢，葉面積大，成活率高（80.92%），前期（40?d）以根系發(fā)育為主，80?d以后地上、地下生長速度均大于紅旗1號（為木質化留養(yǎng)枝）;不同品種茶樹根砧的嫁接效果無顯著性差異，嫁接后5個月，黃山大葉種的地上部分表現(xiàn)最好，祁門櫧葉種的主根長及主、側根鮮重等地下部分表現(xiàn)最好;整體來看，祁門櫧葉種根砧倒接漕溪1號接穗處理為最優(yōu)選擇。因此，茶樹胚根倒接方法技術可行，嫁接時選擇大葉種茶樹的未木質化或半木質化新梢作為接穗，配合親和性強的根系粗壯的根砧，更有利于嫁接苗的成活及后期的生長發(fā)育。

關鍵詞 ?茶樹;胚根倒接;砧穗品種;愈合;成活率;生長情況

中圖分類號 ?S339;S571.1 ????文獻標識碼 ?A

Abstract ?A field experiment was conducted to study the effects of different radicle-stocks and scions on the healing percentage， survival percentage and growth of grafting tea plants. The healing rate of the grafted seedlings was 93.93% 40 days after grafting， and the average survival rate was 99.26%. The grafting site completely healed 80 days after grafting， and the average survival rate was 90.50%. 145 days after grafting， the average survival rate was 76.1%， the average plant height was 20.22 cm， the number of leaves was 5.89， and the average root diameter was 3.73 cm. In the early stage （40 d）， tea plants were healed later under the reverse radicle-grafting method， but the growth of tree plants accelerated during the later stage （145 d）， even more than that under the?radicle-grafting method. Compared with ‘Hongqi 1 scion， the plants grafted on ‘Caoxi 1 scion which had larger leaf area， had higher survival percentage （80.92%） and better?underground growth situation during the early stage， and faster growth rate during the later stage. There was no significant difference of grafting effect among different varieties of stocks. Five months after grafting， the ‘Huangshan daye stock was the best for above-ground growth， and the ‘Qimen zhuye stock was the best for underground growth， including longer taproot length， heavier main and lateral root fresh weigh. On the whole， the reverse grafting of the ‘Qimen zhuye root-stock to ‘Caoxi 1 scion was?the optimum?choice. The technique of reverse radicle-grafting is feasible for tea plant. A large-leaf tea scion from the non-lignification or semi-lignification new shoot， grafting on a strong radicle which has?a good affinity， is more advantageous to the grafting survival and growth.

Keywords ?Camellia sinensis; reverse radicle-grafting; rootstock and scion varieties; healing; survival percentage; growth situation

DOI ?10.3969/j.issn.1000-2561.2019.06.005

茶樹品種是茶產業(yè)的基礎，優(yōu)良的茶樹品種是獲得優(yōu)質、高產、高效的重要保證，在茶葉生產中起著基礎性和先導性作用，茶樹良種的推廣依賴于育苗技術。茶樹種子繁殖方法簡單，但存在后代遺傳性復雜、易產生變異、良種性狀不易保持的缺陷。短穗扦插是目前茶樹無性繁育的主要方法，該技術不僅能保持茶樹品種原有的優(yōu)良特征、特性，而且繁殖系數(shù)高[1]，用扦插苗建成的茶園，茶樹蓬面整齊一致，便于機械化操作，并能提高茶葉品質，但短穗扦插的扦插成活率、出圃率及茶苗質量受扦插基質、扦插時間[1]、扦插技術、苗圃管理[2]等諸多因素的影響，不易控制，且在圃時間長、管理繁瑣[3]，短穗扦插苗生根慢，無主根系，抗逆性差，對土肥條件要求較高。我國現(xiàn)有茶園面積290多萬hm2，大多分布在山地丘陵地帶，茶園土層較薄，土壤相對貧瘠，且易水土流失，而傳統(tǒng)的扦插苗須根系分布淺，水肥吸收能力弱，茶園容易早衰，因此，亟需一種新的茶樹育苗技術，對老茶園進行改種換植，建設無性系良種標準園。

在一些果樹、苗木的繁育領域，有關于利用胚根嫁接或者芽砧嫁接的零星報道，如蛋黃果胚根倒置嫁接繁殖新法[4]，板栗[5]、油茶[6]等芽苗砧嫁接育苗技術等。而大部分茶樹品種為灌木型，芽砧嫁接繁育則存在嫁接后除萌工作量大，苗種純度難以保證等問題。針對茶樹育苗領域多年來存在的技術問題，提出茶樹胚根嫁接技術，即以茶樹實生茶苗胚根為砧木，以無性系良種穗條為接穗進行嫁接，傳統(tǒng)的順接嫁接方式在嫁接時受根粗限制[7]，操作困難，本研究將采用胚根倒接法，即將根砧插入接穗，通過研究茶樹胚根倒接法與順接法的嫁接傷口愈合速度、嫁接成活率、嫁接苗地上部和地下部生長情況，明確茶樹胚根倒接嫁接法的實用性和嫁接效果，通過研究不同根砧、接穗品種組合的嫁接效果，分析茶樹胚根倒接嫁接方法的可行性，以期探索出適用于茶樹良種規(guī)?；a的嫁接繁殖新技術，并篩選出適宜的根砧和接穗品種，為茶樹育苗提供一種操作簡便、成活率高、茶苗長勢好、抗逆性強的新技術。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

試驗于2014—2015年在黃山綠源農林開發(fā)有限公司基地進行。參試砧木品種為經過沙藏催芽處理的實生苗。在2014年10—11月份采收成熟飽滿的茶果，于蔭涼、通風、干燥處攤放至80%的果實開裂后，用11～13 mm篩孔的竹篩去果皮并除雜，12月在沙藏催芽前用1000～2000倍高錳酸鉀水溶液進行種子消毒，在向陽、地勢平坦或緩坡、排水良好的地塊搭建沙床進行沙藏催芽，待2015年5月中下旬，種子主根長度達到10～15cm、胚芽長1.5～2.0 cm時取出，淘洗干凈，保濕待用。供試接穗品種為紅旗1號（來自祁門箬坑鄉(xiāng)母穗園，為木質化新梢）、漕溪1號（來自黃山綠源農林開發(fā)有限公司母穗園，為半木質化新梢），保濕待用。

1.2 ?方法

1.2.1 ?試驗設計 ?試驗設置5個處理（表1）：T1，祁門櫧葉種根砧-根部順接法-紅旗1號接穗（祁-順-紅）;T2，祁門櫧葉種根砧-根部倒接法-紅旗1號接穗（祁-倒-紅）;T3，祁門櫧葉種根砧-根部倒接法-漕溪1號接穗（祁-倒-漕）;T4，黃山大葉種根砧-根部倒接法-紅旗1號接穗（黃-倒-紅）;T5，松蘿種根砧-根部倒接法-紅旗1號接穗（松-倒-紅）。按照行距7～10?cm，株距5～6?cm的密度，每畦隨機假植5個處理，每個處理140株，小區(qū)面

1.2.2 ?嫁接 ?根部正接法：取整株實生茶苗，在主根上端子葉以下1～2 cm處切斷，保留下半部分作根砧。再將根砧縱劈成兩半，切口深度為1.0～ 1.2?cm，根砧長度控制在12 cm以下。將穗條剪成3 cm為一穗，保留一芽一葉，在芽的下部1.5～2.0 cm處將穗削成楔字形，斜面長1.0～1.2?cm。把削好的接穗插入根砧切口，使根砧和接穗的形成層對齊并緊密貼合，并用長約3 cm、寬約0.5 cm的鋁箔膠帶在嫁接處纏繞固定。

根部倒接法：如根部正接法準備根砧和接穗，將主根上端削成楔字形，斜面長1.0～1.2?cm，將接穗下端剪平，在截面中心縱切一刀，切縫要長于根砧楔面長度。將實木苗根砧輕輕插入接穗，纏繞固定。

1.2.3 ?假植 ?地塊布置：選擇避風陰涼、排水良好、疏松肥沃的地塊。5月中下旬前進行整地做畦，畦面寬1.2 m，溝寬25 cm，苗床上鋪一層厚4～5 cm的黃心土，上方搭設高約1.5 m的遮陽棚，覆蓋遮陽率約75%的遮陽網。

假植方法：按照常規(guī)扦插密度用竹筷在苗床上插10～15 cm深的小孔，然后將嫁接苗輕輕的垂直插至孔穴底部，防止傷到根系，最后培土使根頸以上1.0～1.5?cm露在土層外，使根系與土壤密接。

假植后管理：假植后澆定根水，噴施多菌靈。在苗床上每隔50～60?cm用鋼筋架一拱，拱高40?cm，然后覆膜并壓緊實。適時澆水以保持苗床土壤濕度約為田間持水量的60%。在8月上旬揭膜，10月揭網。

1.2.4 ?觀測方法 ?在嫁接后40、80、145 d調查嫁接成活率，接穗青綠者成活，接穗發(fā)黑干枯則失敗。同時觀察嫁接苗的傷口愈合情況，以砧穗結合部位瘤狀愈傷組織的有無為評判標準。然后取樣調查生長情況，每個處理隨機采集10株，洗去泥土并擦干，調查茶苗的株高、新梢長、葉片數(shù)、根粗、主根長，以及地上部鮮重、根系鮮重、主根鮮重、側根鮮重。

1.3 ?數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel 2010及SPSS 19.0統(tǒng)計分析軟件進行數(shù)據(jù)處理，并且采用Duncan法進行差異顯著性檢驗。

2 ?結果與分析

2.1 ?不同根部嫁接方法的茶樹嫁接效果

相同砧穗條件下，根部順接嫁接法和倒接嫁接法的嫁接效果見表2。T1處理根部順接法愈合組織形成較早，嫁接后40 d，倒接和順接2種嫁接苗的愈合率分別達到86.67%和96.67%（P>0.05），成活率分別為97.02%和100%;2種嫁接方式均有少數(shù)嫁接苗長出新生芽葉和少量側根，且生長指標差異均不顯著。嫁接后80 d，倒接和順接的嫁接苗愈合率均達到100%，成活率稍有降低，其中前者低于后者;2種方式的嫁接苗株高、葉片、新生芽、根系均有不同程度的增加，其中順接法的增加幅度高于倒接法，但除順接法的側根鮮重顯著高于倒接法外，其他指標差異均不顯著。嫁接后145 d，倒接和順接2種嫁接苗的成活率分別降至72.50%和85.71%（P>0.05）;倒接法處理的嫁接苗地上部和地下部生長均加速，與順接法的差異減小，甚至超過順接法處理，2種嫁接方式的株高均達到20 cm左右，新梢長達12～13 cm，新生葉約6片，側根鮮重達0.5～0.6 g/株?？梢?，2種嫁接方式的愈合率和成活率雖然有所差別，但均未達顯著水平，順接法較倒接法愈合早，成活率高，前期生長快，倒接法愈合速度稍慢，前期根系生長較弱，后期地上部和地下部生長均加速，與順接法差異減小，甚至超過順接法處理。

2.2 ?不同品種接穗的茶樹根部嫁接效果

相同根砧和嫁接方法條件下，不同品種接穗處理的嫁接效果見表3。嫁接后40?d，漕溪1號接穗處理的嫁接愈合率和成活率均達到100%，高于紅旗1號接穗處理;漕溪1號接穗處理的嫁接苗地上部幾乎沒有生長，其中株高和新梢長顯著低于紅旗1號接穗處理，但是地下部生長狀況明顯好于紅旗1號接穗處理，其中根粗、根系鮮重、主根鮮重均顯著高于紅旗1號接穗處理。嫁接后80 d，漕溪1號接穗處理的嫁接成活率達96.57%，高于紅旗1號接穗;漕溪1號接穗處理的嫁接苗地上部生長速度加快，株高、新梢長等地上部生長指標，以及地上鮮重（P<0.01）、根粗（P<0.05）、根系鮮重、主根鮮重、側根鮮重等地下部生長指標均高于紅旗1號接穗處理。嫁接后145 d，漕溪1號接穗的成活率為80.92%，顯著高于紅旗1號接穗成活率（66.67%）;漕溪1號接穗的地上部和地下部生長指標除葉片數(shù)和主根長外，均高于紅旗1號，但差異均未達顯著水平。可見，漕溪1號接穗葉面積比較大，前期地上部生長較弱，新梢生長慢，葉片數(shù)較少，以根系發(fā)育為主，而前期的根系發(fā)育為后期植株生長提供了充足的養(yǎng)分供應，后期地上部和根系生長速度大于紅旗1號，地上部和地下部生長指標幾乎全部優(yōu)于紅旗1號。

2.3 ?不同品種根砧的茶樹根部嫁接效果

相同接穗和嫁接方法條件下，不同品種根砧處理的嫁接效果見表4。嫁接后40?d，不同品種根砧的茶樹嫁接苗的成活率在97%以上，愈合率在86.67%～93.33%，不同品種間差異不顯著;不同品種根砧的茶樹嫁接苗的生長量均較小，僅根粗、根系鮮重、主根鮮重等地下部生長指標因根砧品種不同表現(xiàn)出差異，其中黃山大葉種和松蘿種處理大于祁門櫧葉種處理。嫁接后80 d，不同品種根砧的嫁接苗的成活率下降到76.20%～ 90.35%，不同品種間差異不顯著;祁門櫧葉種的地上和地下生長速度較快，生長情況整體表現(xiàn)較好，黃山大葉種的地下部生長速度較低，生長情況表現(xiàn)較差，松蘿種的地上部生長速度較低，生長情況表現(xiàn)較差，但不同根砧品種的嫁接苗的各項生長指標均無顯著差異。后期各根砧品種嫁接苗的成活率下降速度較快，嫁接后145 d祁門櫧葉種的成活率降至66.67%（主要與蟲害有關），其他2個品種的成活率在73%左右;3個茶樹品種地上部和地下部生長速度差別不大，其中祁門櫧葉種根砧處理的地下部生長速度較快，黃山大葉種的地下部生長速度較慢，地上部生長速度較快，松蘿種的株高、葉片數(shù)的增長速度較慢，而不同根砧品種下嫁接苗的各項生長指標差異不顯著，其中地上部以黃山大葉種表現(xiàn)最好，主根長、根重（主、側根）方面祁門櫧葉種表現(xiàn)最好。由此可見，祁門櫧葉種、黃山大葉種、松蘿種3種根砧與紅旗1號接穗的嫁接效果無顯著差異，嫁接后3個月內，祁門櫧葉種生長速度最快，總體表現(xiàn)最好，松蘿種地上部表現(xiàn)較差，黃山大葉種地下部表現(xiàn)較差;嫁接后5個月，黃山大葉種的地上部分表現(xiàn)最好，祁門櫧葉種的主根長、主、側根鮮重等地下部分表現(xiàn)最好。

2.4 ?胚根嫁接茶苗生長指標的相關性分析

對試驗期間嫁接茶苗地上部與地下部生長指標的觀測值進行相關性分析（表5），結果顯示，茶苗根粗、根系鮮重、主根鮮重、側根鮮重與株高、葉片數(shù)、新生芽長、地上部鮮重均呈極顯著正相關（P<0.01），說明嫁接茶苗地上部與地下部的生長具有相互促進作用。

3 ?討論

茶樹短穗扦插是目前茶樹良種繁殖的主要方式，吳淑平[1]和曾浩等[8]研究了不同條件下的茶樹短穗扦插成活率，分別為19.7%～96.2%（均值65.74%）和51.4%～97.0%（均值79.3%）。而本研究采用茶樹實生苗胚根與木質化或半木質化新梢剪成的短穗進行嫁接，5個月后不同嫁接方式、砧穗品種的嫁接苗成活率在66.67%～85.71%之間，平均成活率為76.10%，說明不同條件下茶樹胚根嫁接的成活率比較穩(wěn)定，該育苗方法具有普遍適用性，與扦插育苗相比成活率也較為理想。

研究表明植物嫁接成活過程實質就是砧木與接穗愈合的過程，砧穗愈傷組織溝通越早，嫁接成活率越高[9]。陳啟文等[10]研究發(fā)現(xiàn)皖茶91、舒茶早、石佛翠3個茶樹品種扦插60 d后的愈合率分別為80.6%、46.2%和13.3%，而本研究中茶樹胚根嫁接后40 d愈合率就已達85%以上，愈合速度很快?？赡苁且驗橛啄鄣呐吒纳砟挲g較小，細胞生命旺盛，傷口容易愈合;而且胚根中含有豐富的赤霉素，具有促進器官縱向生長的作用，利于嫁接后的生長[11]。

前人關于茶樹嫁接育苗的相關文獻鮮有報道，在油茶胚軸嫁接和芽砧嫁接方面的研究較多，而兩者均為山茶屬植物，親緣關系較近，對茶樹胚根嫁接的研究具有一定借鑒意義。有研究發(fā)現(xiàn)油茶芽砧嫁接中接穗留葉數(shù)可改變嫁接苗的愈合速率，接穗保留1片葉子進行嫁接時愈合速度、成活率和嫁接苗長勢均表現(xiàn)最好[12]，本研究的接穗采用一芽一葉，并保留完整葉片，嫁接苗的愈合和生長情況良好。本研究中不同砧、穗組合的嫁接苗的愈合速度、成活率、地上部和地下部的生長指標有不同程度的差別，其中不同接穗間的差別最大，這與前人對油茶的研究結果相似[13-14]。這種現(xiàn)象主要與砧、穗間的親和性有關[15]，嫁接親和性是決定嫁接成活的主要因素[16]，因此，茶樹胚根嫁接選擇砧穗品種時，不僅要關注茶樹品種的生長勢、抗逆性和遺傳力，還要著重考慮2者的親和性。

另外，不同接穗品種嫁接苗的愈合與生長差異可能與接穗枝條的幼嫩以及品種間葉片面積差異有關。徐春永等[17]的研究表明，接穗的木質化程度對油茶嫁接苗成活率影響存在極顯著差異，成活率為剛木質化>半木質化>全木質化。本研究中紅旗1號接穗多為褐色的木質化枝條，而漕溪1號接穗多為半木質化的新梢，在嫁接5個月后，紅旗1號嫁接苗的成活率顯著低于漕溪1號，生長情況也遜于后者，也說明嫁接苗成活率和生長情況與嫁接材料木質化程度有關，這是因為剛開始木質化枝條分生組織更為活躍，細胞分生能力強，容易形成愈傷組織，嫁接苗成活率高。因此，在嫁接中接穗應選擇相對較嫩的剛木質化或半木質化新梢，以縮短嫁接愈合時間，提高成活率，促進嫁接苗生長[6]。

茶樹胚根嫁接苗的根粗、根重與株高、葉片數(shù)、新生芽長、地上部鮮重均呈極顯著正相關，表明嫁接茶苗地上部分與地下部分是一個相互制約、相互促進的整體[18]，漕溪1號品種的接穗葉片較大，光合作用較強，葉片蒸騰拉力大，能促進砧穗之間營養(yǎng)物質的運輸，從而提高嫁接成活率[19]，光合產物的供應促進了根系的生長，而大量的吸收根又有助于形成良好的樹冠結構[20]。因此，嫁接時選擇葉面積大的接穗和根系粗壯的根砧有利于嫁接苗的成活及后期的生長發(fā)育。

綜上所述，茶樹胚根嫁接方法在嫁接后80?d已完全愈合，嫁接后145 d平均成活率為76.1%，平均株高為20.22 cm，平均根粗為3.73 cm，當年即可出圃，該育苗方法操作方便、育苗期短。胚根倒接法較順接法后期嫁接苗生長加速，短期內（5個月）不同品種根砧間的嫁接效果差異不顯著，長期效果有待進一步研究。嫁接時選擇大葉種茶樹良種的剛木質化或半木質化新梢作為接穗，配合親和性好的根系粗壯的根砧，更有利于嫁接苗的成活及后期的生長發(fā)育。

參考文獻

吳淑平， 呂立哲， 鄭 ?杰， 等. 茶樹短穗扦插成活率的影響因素探析[J]. 河南農業(yè)科學， 2014， 43（10）： 34-37.

楊云丹， 王世斌. 茶樹硬枝扦插研究[J]. 安徽農業(yè)科學， 2014， 42（1）： 31-34.

楊 ?婷， 黃水有， 張 ?謙. 茶樹快速育苗技術初探[J]. 農業(yè)研究與應用， 2014（6）： 38-41.

周俊岸. 蛋黃果胚根倒置嫁接繁殖[J]. 北方園藝， 2012（6）： 45.

季志平， 呂平會， 何佳林. 板栗芽砧嫁接育苗中的斷胚根處理技術[J]. 林業(yè)實用技術， 2014（12）： 30-32.

楊志堅， 馮金玲， 陳 ?輝. 油茶芽苗砧嫁接口愈合過程解剖學研究[J]. 植物科學學報， 2013， 31（3）： 313-320.

徐奕鼎， 王文杰， 王燁軍， 等. 茶樹根砧嫁接繁育方法： CN201210048726.3[P]. 2012-07-18.

曾 ?浩， 梁健梅， 李艷梅， 等. 茶樹扦插成活率的影響因素研究[J]. 現(xiàn)代農業(yè)科技， 2014（11）： 157， 159.

黃堅欽， 章濱森， 陸建偉. 山核桃嫁接愈合過程的解剖學觀察[J]. 浙江林學院學報， 2001， 18（2）： 111-114.

陳啟文， 周月琴， 韓艷娜， 等. 茶樹扦插生根過程中3種氧化酶活性及多酚含量變化研究[J]. 安徽農業(yè)大學學報， 2013， 40（6）： 908-911.

潘溫文， 李 ?偉， 譚 ?巧， 等. 不同處理對漠牡丹種子萌發(fā)及幼苗生長的影響[J]. 西部林業(yè)科學， 2014， 43（2）： 48-52.

袁婷婷， 鐘秋平， 丁少凈， 等. 接穗留葉數(shù)對油茶芽苗砧嫁接愈合過程的影響[J]. 經濟林研究， 2016， 34（3）： 56-66.

袁 ?軍， 王 ?慧， 董文統(tǒng)， 等. 不同砧木對海南油茶嫁接成活率和苗木生長的影響[J]. 熱帶作物學報， 2017， 38（7）： 1193-1197.

袁婷婷， 鐘秋平， 丁少凈， 等. 砧木和接穗對油茶芽苗砧嫁接苗愈合及生長的影響[J]. 江西農業(yè)大學學報， 2016， 38（6）： 1076-1085.

楊 ?邵， 束慶龍， 姚小華， 等. 油茶不同芽苗砧嫁接組合的親和性生理[J]. 東北林業(yè)大學學報， 2015， 43（7）： 19-22， 46.

孫麗麗， 徐 ?揚， 郭世榮， 等. 不同砧木嫁接對番茄成活率、生長及果實品質的影響[J]. 南京農業(yè)大學學報， 2014， 37（5）： 55-62.

徐春永， 周席華， 杜洋文， 等. 不同類型穗條嫁接對油茶芽苗砧嫁接苗生長發(fā)育的影響研究[J]. 湖北林業(yè)科技， 2011（5）： 15-18， 22.

駱耀平. 茶樹栽培學[M]. 北京： 中國農業(yè)出版社， 2008： 63-66.

魏 ?杰， 陳 ?娟， 劉聲傳， 等. 茶樹嫁接成活影響因素研究綜述[J]. 安徽農業(yè)科學， 2015， 43（5）： 43-45.

潘根生， 趙學仁. 茶樹輕修剪時期與留葉時期優(yōu)化組合研究[J]. 茶葉， 1992， 18（4）： 8-12.