多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的溶出、生物利用度和組織分布研究

趙 雪 楊逢建 葛云龍 王玲玲 李汶罡 鄧怡平 趙修華

(東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱 150040)

青蒿素是從藥用植物黃花蒿(ArtemisiaannuaL.)中分離純化的一種內(nèi)含過氧橋基團(tuán)的倍半萜內(nèi)酯化合物[1～2]。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，青蒿素及其衍生物不僅可以治療瘧疾，而且在抗腫瘤、抗病毒和免疫抑制等疾病方面也具有多種生物活性，已成為當(dāng)今新型抗腫瘤藥物研究領(lǐng)域的熱點[3～5]。然而，青蒿素屬脂溶性化合物，水溶性極差，生物利用度低，使其在臨床中的應(yīng)用和開發(fā)嚴(yán)重受限[6～7]。目前學(xué)者們解決這一難題，主要是通過改變青蒿素的官能團(tuán)，進(jìn)行糖基化和鹽基化結(jié)構(gòu)修飾獲得一系列的衍生物，如蒿甲迷、雙氫青蒿素、青蒿琥酯等[8]。新的衍生物雖然一定程度上增加了青蒿素的水溶性，但改造后的官能團(tuán)對人體的毒副作用很大。本文在前期研究中，選取一種新型藥物載體多孔淀粉，其由淀粉改良后具有許多微米級孔隙，可以產(chǎn)生巨大的吸引力，能把藥物吸附到小孔中，使藥物不容易脫離[9～13]。通過多孔淀粉與青蒿素原藥進(jìn)行負(fù)載，成功制備多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球(ART-PS)，多孔淀粉在體內(nèi)胃腸道酶的降解作用后將孔隙中的青蒿素釋放，從而發(fā)揮藥效，以提高青蒿素的水溶性。本研究不僅解決青蒿素原藥水溶性的難題，更意在提高其生物利用度和穩(wěn)定性，使青蒿素更加高效的應(yīng)用于癌癥的臨床治療中[14～17]。本文將進(jìn)一步探討多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在體外溶出實驗中，相比于青蒿素原藥的溶出效果以及在大鼠體內(nèi)的生物利用度和組織分布規(guī)律。

1 材料和方法

1.1 材料

青蒿素分析純標(biāo)準(zhǔn)(美國Aladdin公司，98%，批號171130)；青蒿素原藥(西安通澤生物科技有限公司，98%，批號140705)；多孔淀粉(遼寧立達(dá)生物科技有限公司，玉米淀粉為原料，批號170624)；多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球(自制)；乙腈色譜級(天津市天力化學(xué)試劑有限公司)；甲醇色譜級(天津市天力化學(xué)試劑有限公司)；去離子水(實驗室自制)；鹽酸(新鄉(xiāng)市宏盛化工有限公司限公司)；磷酸二氫鉀分析純(天津市天力化學(xué)試劑有限公司)；氫氧化鈉分析純(天津市天力化學(xué)試劑有限公司)；肝素鈉(湖北鑫潤德化工有限公司)；玻璃毛細(xì)管(北京友誠生物科技有限公司)。

1.2 多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的制備工藝

多孔淀粉又稱微孔淀粉，是通過機(jī)械、化學(xué)或生物方法作用于生淀粉，使其內(nèi)部形成微米級孔徑的一種新型輔料，具有安全、無毒、高效、生物可降解以及廉價易得等優(yōu)點，是一類極具開發(fā)潛力的新型藥物載體，在國內(nèi)外已被廣泛研發(fā)并應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域[18]。多孔淀粉具有優(yōu)良的吸附性能，是由于表面吸附和孔徑吸附的共同作用。多孔淀粉具有許多小孔一直延伸到淀粉顆粒中心附近，形成蜂窩狀的內(nèi)部中空結(jié)構(gòu)，可以產(chǎn)生巨大的吸引力，能將藥物吸附到小孔中，使藥物不容易脫離，而且仍保持顆粒基本形狀[13～16]。多孔淀粉本身不溶于水，但由于具有較大的比表面積，因此在吸附藥物后，它可以有效提高藥物的溶出速度與溶出率。多孔淀粉已成功用于制備多種化學(xué)藥物，如洛伐他汀[19]、卡馬西平[16]，普羅布考[20]和環(huán)丙沙星[17]等。本文在前期的工作中，以青蒿素為原料，多孔淀粉為載體(訂購)，制備了多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球，并且進(jìn)行了制備工藝優(yōu)化、理化性質(zhì)的表征和水溶性的測試。

多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球(ART-PS)是采用物理吸附方法使多孔淀粉微粒吸附青蒿素原藥，通過單因素法優(yōu)化，從而確定了最佳制備工藝條件：在10 mL的丙酮反應(yīng)體系中，青蒿素原藥的加入濃度為80 mg·mL-1，多孔淀粉的加入量為2 560 mg，多孔淀粉吸附青蒿素的最佳吸附時間為30 min，最佳攪拌時間為2 h，反應(yīng)溫度為37℃。在最優(yōu)條件下制備得到的多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的載藥量為20.37%。通過掃描電鏡檢測(SEM)、比表面積的測定(BET)、紅外光譜檢測(FTIR)、X射線衍射檢測(XRD)、差示掃描量熱法(DSC)和熱重量分析(TG)檢測分別對多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的理化性質(zhì)進(jìn)行了表征分析，成功檢測到青蒿素原藥被負(fù)載在多孔淀粉的孔隙中形成的青蒿素微球。在比表面積(BET)的測定結(jié)果中，多孔淀粉的比表面積為5.11 m2·g-1，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的比表面積為0.12 m2·g-1，說明多孔淀粉孔隙已被青蒿素填充，使其孔隙變小，成功負(fù)載。在紅外(FTIR)結(jié)果分析中，青蒿素原粉經(jīng)過多孔淀粉的吸附過程，其表面化學(xué)結(jié)構(gòu)沒有變化，青蒿素主要被吸附于多孔淀粉內(nèi)部孔徑之中，在表面有少量分布。X射線衍射檢測(XRD)、差示掃描量熱法(DSC)和熱重量分析(TG)檢測結(jié)果也分別再次驗證，青蒿素原藥已經(jīng)成功被多孔淀粉負(fù)載。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的飽和溶解度顯著提高，在水、人工胃液、人工腸液中分別是青蒿素原藥的3.77、1.64和1.72倍。

1.3 體外釋放

1.3.1 人工胃液的制備

取濃度為1 mol·mL-1的稀鹽酸3.84 mL，定容至1 000 mL。調(diào)節(jié)pH值至1.2，用0.22 μm的濾膜過濾。

1.3.2 人工腸液的制備

稱取磷酸二氫鉀6.8 g，加入500 mL的超純水中，使其溶解完全。稱量0.4 g氫氧化鈉加入100 mL的超純水中，在三角瓶中使其完全溶解，即4 mg·mL-1的氫氧化鈉溶液。調(diào)節(jié)pH值至6.8，加水定容至1 000 mL，用0.22 μm的濾膜過濾。

1.3.3 體外溶出檢測

將本文前期工作中制備出的多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球(33.07 mg)、青蒿素原藥(7.88 mg)和物理混合藥(原藥7.88 mg、多孔淀粉25.20 mg)，分別放入200 mL水、人工胃和人工腸液中，置于恒溫攪拌器內(nèi)，轉(zhuǎn)速40 rpm·min-1，在37℃恒溫下釋放。分別在0.083、0.17、0.25、0.33、0.42、0.5、0.58、0.67、0.75、0.83、0.92、1、1.17、1.33、1.5、1.67、1.83、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、10、11、12、24、28、32、36和48 h的時間點取樣1 mL，取樣后同時補回1 mL的水、人工胃液和人工腸液。樣品經(jīng)離心后取上清液，用0.22 μm的濾膜過濾后，用高效液相色譜儀檢測青蒿素的含量。

1.4 生物利用度檢測

1.4.1 青蒿素的高效液相色譜檢測

液相色譜柱(品牌Diamonsil)反相C18柱(250 mm·4.6 mm，5 μmol·L-1)，柱溫為30℃。流動相為乙腈和水，體積比為60∶40，流速為1.0 mL·min-1，檢測波長為210 nm，進(jìn)樣量為10 μL，保留時間為12 min。本文通過外標(biāo)法設(shè)定青蒿素標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為1 000、100和10 μg·mL-1，檢測不同濃度下峰面積，根據(jù)檢測血樣的峰面積計算出血樣中所含青蒿素的濃度。

1.4.2 大鼠取血

SD大鼠20只(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院動物中心，清潔Ⅱ級)，體重200～250 g，喂食標(biāo)準(zhǔn)顆粒詞料，自由飲水。飼養(yǎng)環(huán)境溫度為18～23℃，濕度保持在45%～70%。

挑選18只大鼠，隨機(jī)分成兩組，每組6只，采取灌胃方式給藥，青蒿素濃度為50 mg·kg-1。在灌胃前12 h開始禁食，保證飲水充足，同時灌食青蒿素原粉和多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球。在0.083，0.167，0.333，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0和24.0 h時從大鼠的眼眶靜脈處取血，取血量大概500 μL左右，放入裝有20 μL 1%肝素鈉的離心管中，輕搖使肝素鈉與血液混合均勻，3 000 r·min-1的條件下離心10 min，取出上清血漿，放在4℃冰箱保存，當(dāng)天處理。

1.4.3 血樣處理

將血樣放入帶有肝素納(1%)的1.5 mL離心管中，精確吸取血清100 μL于1.5 mL離心管中，加入3倍體積乙腈300 μL，渦旋3 min，離心(12 000 r·min-1)15 min，在50℃水浴中水解60 min，冷卻后，用氮氣揮干后。殘渣用30 μL流動相(乙腈：水)復(fù)溶，渦旋1 min，12 000 r·min-1條件下離心15 min，取上清用0.22 μmol·L-1的濾膜過濾后，吸取10 μL經(jīng)高效液相色譜儀檢測，測定樣品中青蒿素濃度。

1.5 組織分布檢測

分別選取體重在250 g左右的大鼠共計98只，大鼠的性別為雌性。通過隨機(jī)分組的方式，將98只大鼠平均分組。在實驗開始的前一天，需要對大鼠進(jìn)行斷食，但飲水自由。灌胃前，對每組大鼠稱重標(biāo)記，每組6只大鼠在隨機(jī)分成兩小組，其中3只為灌胃青蒿素原藥組，另外3只為灌胃多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球組，灌胃的計量為250 mg·kg-1。在對大鼠灌胃后的0.5，1，2，4，6，8，12和24 h后分別迅速對大鼠進(jìn)行斷頸方式處死并解剖，完成對心、肝、脾、肺、腎、腦6個器官的摘取，稱量后，將器官分別置于試管中，并加入適量(1 mL)蒸餾水中后進(jìn)行高速勻漿。將精準(zhǔn)吸取的100 μL的組織勻漿液加入離心管中后，再加入甲醇0.4 mL，混勻渦旋超聲10 min，13 000 r·min-1離心10 min。取上層清夜20 μL，采用高效液相色譜儀分別對各組織器官中青蒿素的含量進(jìn)行檢測分析。

2 結(jié)果

2.1 體外溶出結(jié)果分析

圖1為青蒿素原藥、多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球和物理混合物在水中的溶出曲線。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在水中的釋放效果較青蒿素原粉、物理混合物都有明顯提高。在溶出實驗開始1 h時，青蒿素原藥的溶出率為11.57%，物理混合物的溶出率為12.24%，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的溶出率已經(jīng)達(dá)到86.42%，分別是原藥和物理混合物溶出率的7.47和7.06倍。青蒿素原藥和物理混合物在水中的最終釋放累積量僅有24.45%和29.17%，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在水中的最終釋放累積量為98.67%，分別是原藥和物理混合物的4.04和3.38倍。

圖1 多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球(a)、物理混合物(b)和青蒿素原粉(c)在水中的溶出Fig.1 Dissolution of ART-PS(a),physically-mixed drug(b) and artemisinin(c) in water

圖2為青蒿素原藥、多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球和物理混合物在人工胃液中的溶出曲線。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在人工胃液中的釋放效果較青蒿素原粉、物理混合物都有明顯提高。在溶出實驗開始1 h時，青蒿素原藥的溶出率為13.04%，物理混合物的溶出率為11.56%，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的溶出率已經(jīng)達(dá)到84.92%，分別是原藥和物理混合物溶出率的6.51和7.35倍。青蒿素原藥和物理混合物在人工胃液中的最終釋放累積量僅有25.72%和27.68%，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在人工胃液中的最終釋放累積量為92.21%，分別是原藥和物理混合物的3.59和3.33倍。

圖2 多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球(a)、物理混合物(b)和青蒿素原粉(c)在人工胃液中的溶出Fig.2 Dissolution of ART-PS(a),physically-mixed drug(b) and artemisinin(c) in artificial gastric juice

圖3 多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球(a)、物理混合物(b)和青蒿素原粉(c)在人工腸液中的溶出Fig.3 Dissolution of ART-PS(a),physically-mixed drug(b) and artemisinin(c) in artificial intestinal juice

圖3為青蒿素原藥、多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球和物理混合物在人工腸液中的溶出曲線。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在人工腸液中的釋放效果較青蒿素原粉、物理混合物都有明顯提高。在溶出實驗開始1 h時，青蒿素原藥的溶出率為13.37%，物理混合物的溶出率為12.02%，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的溶出率已經(jīng)達(dá)到77.95%，分別是原藥和物理混合物溶出率的5.83和6.49倍。青蒿素原藥和物理混合物在人工腸液中的最終釋放累積量僅有23.14%和26.09%，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在人工腸液中的最終釋放累積量為88.41%，分別是原藥和物理混合物的3.82和3.39倍。

2.2 生物利用度的研究

表1為外標(biāo)法測定青蒿素標(biāo)準(zhǔn)品相應(yīng)濃度下的峰面積，圖4為青蒿素原藥和多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球按50 mg·kg-1濃度灌胃后，繪制的大鼠血藥濃度曲線。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)的吸收速度明顯高于青蒿素原藥，在大鼠灌胃后2 h左右，血藥濃度達(dá)到最高值199.74 μg·mL-1，而青蒿素原藥在灌胃4 h后，血藥濃度才達(dá)到最高值68.77 μg·mL-1。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的最高血藥濃度是青蒿素原藥的2.90倍。實驗結(jié)果表明，在服用青蒿素含量相同的藥物時，多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球能以更快的速度在體內(nèi)得到吸收和利用，因此檢測到血藥濃度最高。在對大鼠分別灌胃48 h后，測定血藥濃度，青蒿素原藥的血藥濃度為1.8 μg·mL-1，基本已經(jīng)檢測不到青蒿素在體內(nèi)的存留，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球原藥在48 h的血藥濃度61.06 μg·mL-1，此時，多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的血藥濃度是青蒿素原藥的33.92倍。

表1 青蒿素標(biāo)品濃度

Table 1 Concentration of artemisinin standard substance

標(biāo)品濃度Concentration(μg·mL-1)保留時間Retention time峰面積Peak area100012.48544345410012.511359401012.4554021

圖4 多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球(a)和青蒿素原粉(b)的生物利用度結(jié)果圖Fig.4 Bioavailability of ART-PS(a) and artemisinin(b) in rats

本實驗通過軟件(DAS2.0)分別對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行模型擬合分析，經(jīng)擬合計算后得到青蒿素原藥和多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)的生物利用度參數(shù)值。青蒿素原藥給藥后的C max值為68.77 μg·mL-1，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球給藥后的Cmax值為199.74 μg·mL-1(表2～3)。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)生物利用度的Cmax值是青蒿素原藥的2.90倍。青蒿素原藥給藥后的Tmax值為4 h達(dá)到最大值，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球給藥后2 h就達(dá)到最大值，說明多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球與青蒿素原藥相比較，在大鼠體內(nèi)的釋放速度更快，發(fā)揮藥效更強(qiáng)。青蒿素原藥在大鼠體內(nèi)的分布半衰期t1/2(h)為10.10 h，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)的分布半衰期t1/2(h)為26.28 h。此結(jié)果表明，多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球比青蒿素原藥在大鼠體內(nèi)代謝所需要的時間更長。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的分布半衰期是青蒿素原藥的2.60倍，說明多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)發(fā)揮藥效的時間更為持久。青蒿素原藥口服后的AUC(0-t)值為551.96 μg·mL-1·h-1，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球給藥后的AUC(0-t)值為6681.33 μg·mL-1·h-1，多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)生物利用度的AUC(0-t)值是青蒿素原藥的12.10倍，說明多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)的生物利用度較青蒿素原藥明顯提高。青蒿素原藥給藥后的MRT(0-t)值為12.24 h，而多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球給藥后的MRT(0-t)值為31.52 h，多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)生物利用度的MRT(0-t)值明顯增高，是青蒿素原藥的2.58倍，結(jié)果表明，多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球與青蒿素原藥相比較，經(jīng)給藥后在大鼠體內(nèi)的駐留時間更久，因此發(fā)揮藥效的強(qiáng)度更高，在體內(nèi)作用時間更長，具有快速緩釋的藥物特點。生物利用度的明顯提高也再次證實了多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球比青蒿素原藥的粒徑更小、水溶性更好、溶出速度更快的實驗結(jié)果。

表2 青蒿素原藥房室模型的生物利用度參數(shù)

Table 2 Bioavailability parameters of compartment model for ART

房室參數(shù)Compartment parameter單位Unit參數(shù)值Parameter valuet1/2(h)h10.10AUC(0-t)mg·L-1·h-1551.96AUC(0-∞)mg·L-1·h-1572.23MRT(0-t)h12.24MRT(0-∞)h14.29Tmaxh4.00Cmaxmg·L-168.77

表3 多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球房室模型的生物利用度參數(shù)

Table 3 Bioavailability parameters of compartment model for ART-PS

房室參數(shù)Compartment parameter單位Unit參數(shù)值Parameter valuet1/2(h)h26.28AUC(0-t)mg·L-1·h-16681.33AUC(0-∞)mg·L-1·h-17374.09MRT(0-t)h31.52MRT(0-∞)h41.47Tmaxh2.00Cmaxmg·L-1199.74

2.3 組織分布規(guī)律

圖5所示為大鼠灌胃多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球4 h后的各組織器官(心、肝、脾、肺、腎、腦)， 各組織器官形態(tài)良好，未見異常。表4為大鼠灌胃青蒿素原藥和多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球后在各個時間點和各個組織中的平均藥物濃度比較結(jié)果。各個組織器官中藥物分布規(guī)律如圖6所示，青蒿素原藥和多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在灌胃30 min后，在大鼠的心、肝、脾、肺、腎、腦各組織中均有分布，其中各個時間點的青蒿素原藥和多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在肝臟和心臟中濃度較高，其次是腎臟和肺，在腦中有少量分布，而在脾臟中濃度最低。并且多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在不同時間點的各個組織中的藥物平均含量均高于青蒿素原藥。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在6,8和12 h時組織中的藥物濃度分別為心臟：2.325 0、2.431 0和0.619 0 μg·g-1；肝臟中依次為1.720 5、0.416 0和0.189 0 μg·g-1；脾臟中依次為0.186 0、0.143 0和0.081 0 μg·g-1；肺中依次為0.961 0、0.208 0和0.099 0 μg·g-1；腎臟中依次為1.689 5、0.832 0和0.350 0 μg·g-1；大腦中為0.372 0、0.260 0和0.108 0。青蒿素原藥在大鼠的心臟中的含量依次為1.290 0、1.196 0和0.419 0 μg·g-1；肝臟中的含量依次為0.390 0、0.234 0和0.103 0 μg·g-1；脾臟中的含量依次為0.075 0、0.065 0和0.024 0 μg·g-1；肺部的含量為0.330 0、0.169 0和0.158 0 μg·g-1；腎臟的含量為0.915、0.312和0.166 μg·g-1；大腦中的含量為0.225 0、0.143 0和0.063 0 μg·g-1。

圖5 大鼠灌胃多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球4 h后處死取出的各組織器官 A.心臟；B.腦；C.脾；D.腎；E.肝；F.肺Fig.5 Rats were sacrificed for 4 h after intragastric administration of ART-PS A.Heart；B.Brain；C.Spleen；D.Kedney；E.Liver；F.Lung

圖6 大鼠灌胃青蒿素原藥和多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球后各組織中的藥物含量對比結(jié)果Fig.6 Comparison of the curcumin content of ART and ART-PS in tissues after oral administration of rats

Table 4 Comparison of the mean concentrations of ART and ART-PS in tissues after oral administration of rats(μg·g-1)

組織Tissue樣品Sample0.5124681224心臟HeartART0.3000±0.041.7680±0.161.8900±0.061.5680±0.051.2900±0.041.1960±0.020.4190±0.040.1290±0.05ART-PS0.3875±0.052.3628±0.023.1175±0.131.6385±0.062.3250±0.052.4310±0.250.6190±0.040.2750±0.02肝LiverART0.1440±0.041.1180±0.060.9940±0.020.8680±0.020.3900±0.040.2340±0.090.1030±0.040.0610±0.05ART-PS0.3125±0.082.2308±0.152.6390±0.032.1895±0.041.7205±0.020.4160±0.070.1890±0.040.1420±0.05脾SpleenART0.0360±0.010.1820±0.020.1260±0.080.0840±0.010.0750±0.020.0650±0.090.0240±0.020.0410±0.01ART-PS0.1875±0.090.2112±0.100.4640±0.050.2320±0.050.1860±0.020.1430±0.090.0810±0.030.0630±0.03肺LungART0.1920±0.020.2860±0.040.5880±0.020.4620±0.080.3300±0.020.1690±0.080.1580±0.020.0340±0.01ART-PS0.2250±0.020.8976±0.031.8270±0.081.5225±0.060.9610±0.050.2080±0.050.0990±0.030.0710±0.06腎KedneyART0.1800±0.030.4160±0.080.8260±0.060.7980±0.050.9150±0.080.3120±0.090.1660±0.010.0810±0.06ART-PS0.2625±0.051.1088±0.031.9720±0.071.6240±0.061.6895±0.180.8320±0.020.3500±0.030.2200±0.04腦BrainART0.1080±0.010.2080±0.020.3920±0.020.2660±0.050.2250±0.020.1430±0.030.0630±0.040.0480±0.03ART-PS0.2625±0.040.5940±0.041.0005±0.080.4205±0.060.3720±0.050.2600±0.080.1080±0.080.0870±0.02

3 結(jié)論

本文在體外溶出實驗中，以水、人工胃液和人工腸液為三種溶出介質(zhì)，檢測到多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的體外溶出率都明顯高于青蒿素原藥，分別是原藥的4.04、3.59和3.82倍。在大鼠體內(nèi)生物利用度的結(jié)果中，多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在大鼠體內(nèi)的血藥濃度明顯高于青蒿素原藥，生物利用度提高為青蒿素原藥的2.90倍，而且代謝時間更長，從而發(fā)揮的藥效更強(qiáng)。多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球相比于青蒿素原藥，在體外的溶出效果更好，在體內(nèi)的吸收釋放效果更佳。在組織分布的結(jié)果中，多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球和青蒿素原藥都主要分布在心臟和肝臟中，其中多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球在不同時間各個組織中的相應(yīng)含量都比原藥高，本文為解決青蒿素因難溶于水而在實際應(yīng)用中受限提供了重要的理論依據(jù)。Van Nijlen等人分別利用PVP K25、PVP、PEG共混聚合物為載體，使制備的固體分散體轉(zhuǎn)化為無定形狀態(tài)，從而提高了青蒿素原粉的溶解度，但在溶出速率與生物利用度方面的結(jié)果并未細(xì)致討論[10]。Isacchi等人制備了青蒿素普通脂質(zhì)體和PEG化長循環(huán)脂質(zhì)體，成功在冷凍干燥的工藝條件下制備出了粒徑在150 nm左右的青蒿素納米粒，且分布較窄的具有良好穩(wěn)定性凍干脂質(zhì)體，但在溶出速率與生物利用度方面的結(jié)果欠缺[21]。對比與目前的研究結(jié)果，本文在多孔淀粉負(fù)載青蒿素微球的體外溶出和體內(nèi)生物利用的研究方面提供了可靠的依據(jù)。