液體樣品中雌激素活性物質(zhì)檢測方法概述

唐語謙，王諳，朋賢，余以剛，李曉鳳，*

（1.華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣東 廣州 510640；2.華南理工大學(xué)制漿造紙國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510640）

雌激素及雌激素類化合物是廣泛存在于人體、家禽、農(nóng)產(chǎn)品、廢水處理廠、工業(yè)生產(chǎn)廠及自然環(huán)境中的一種類固醇類物質(zhì)，主要可分為環(huán)境雌激素和內(nèi)源性雌激素。雌激素具有促進(jìn)雌性動(dòng)物第二性征發(fā)育及性器官成熟等生理作用，也是脂質(zhì)代謝、炎癥和血管各指數(shù)穩(wěn)定的重要調(diào)節(jié)劑。研究表明內(nèi)源性雌激素可以有效降低絕經(jīng)前女性動(dòng)脈粥硬化性血管疾病的發(fā)生，絕經(jīng)后的女性通過雌激素藥物維持體內(nèi)的雌激素水平可以有效降低心血管類疾病的風(fēng)險(xiǎn)[1]。但同時(shí)，雌激素及雌激素類化合物在機(jī)體內(nèi)的代謝、運(yùn)轉(zhuǎn)和積累都會(huì)對人類健康、動(dòng)植物安全性造成一系列的問題，包括引起小孩的性早熟、生理功能發(fā)育異常及引發(fā)成人的乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和生殖異常等。

在關(guān)于雌激素及其代謝物對絕經(jīng)前和絕經(jīng)后的女性的作用研究中，結(jié)果表明內(nèi)源性雌激素對乳腺癌的發(fā)展起到了關(guān)鍵作用[2]。Key 等[3]匯總分析了9 項(xiàng)雌激素物質(zhì)對663 名女性中未接觸過外源性雌激素情況下患有乳腺癌的女性的影響，結(jié)果表明隨著雌激素水平的上升，患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)明顯增加。Fuhrman 等[4]分別研究了15 種雌激素和雌激素代謝物的循環(huán)水平與代謝途徑對乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性，研究顯示患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)與雌二醇水平呈正相關(guān)。大量數(shù)據(jù)表明雌激素會(huì)也增大男性患前列腺癌的幾率。Qin 等[5]調(diào)查了不同地區(qū)牛奶中雌激素的含量和居民牛奶攝入量及該地區(qū)男性患前列腺癌的人數(shù)，數(shù)據(jù)顯示西方以雌激素含量較高的牛奶、乳制品為主食的地區(qū)造成了其男性更高的前列腺癌發(fā)生率。Kosti 等[6]研究了尿液中的雌激素和雌激素代謝物對引起前列腺癌的影響，發(fā)現(xiàn)在所有的雌激素代謝物濃度中，前列腺癌患者的兒茶酚雌激素濃度高于健康男性。Carlo 等[7]評估了男性視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞中性類固醇激素波動(dòng)，結(jié)果表明性類固醇波動(dòng)是視網(wǎng)膜環(huán)境變化的誘導(dǎo)因素，能引起眼睛老化等生理問題。

目前在工業(yè)生產(chǎn)中，雌激素因?qū)μ穷悺⒅|(zhì)、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)的合成起到重要作用而廣泛應(yīng)用于動(dòng)物飼料、食品、化妝品中，功能發(fā)揮后多余的雌激素往往會(huì)通過食物鏈直接或間接進(jìn)入到人體，直接傷害人類健康[8]，并且一些公司為了節(jié)省商品制作成本，直接選擇忽略飼料及食品中的雌激素含量，造成了頻繁的雌激素污染事件。此外，在糧食中污染最嚴(yán)重的霉菌毒素之一——玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEN）作為雌激素的結(jié)構(gòu)類似物具有雌激素樣作用，能造成動(dòng)物急慢性中毒，引起繁殖機(jī)能異常甚至死亡，給畜牧場造成巨大經(jīng)濟(jì)損失并危害食用人群的健康。針對當(dāng)下現(xiàn)狀，雌激素檢測手段的重要性不言而喻，本文總結(jié)了一些針對液態(tài)環(huán)境常用的雌激素檢測方法，重點(diǎn)介紹近幾年發(fā)展的轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器在雌激素檢測方面的應(yīng)用。

1 轉(zhuǎn)基因生物（genetically modified organism，GMO）反應(yīng)器

轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器是利用微生物細(xì)胞通過基因工程技術(shù)手段將外源基因轉(zhuǎn)化到受體中進(jìn)行高效表達(dá)，從而獲得具有重要應(yīng)用價(jià)值的表達(dá)產(chǎn)物的生命系統(tǒng)。目前關(guān)于該方法的研究中使用的表達(dá)載體主要為酵母細(xì)胞，使用的外源基因主要是β-半乳糖苷酶（LacZ 基因）、綠色熒光蛋白（yEGFP 基因）和熒光素酶（Luc 基因）等。

Black 等[9]基于LacZ 基因構(gòu)建了酵母雌激素篩選系統(tǒng)，如圖1所示。

圖1 雙質(zhì)粒重組酵母系統(tǒng)Fig.1 Double plasmid recombinant yeast system

該系統(tǒng)將人體雌激素受體（human estrogen receptor，hERα）和攜帶雌激素反應(yīng)元件（estrogen response element，ERE）的表達(dá)質(zhì)粒一起整合到釀酒酵母細(xì)胞中，其中ERE 控制報(bào)告基因β-半乳糖苷酶的表達(dá)，在檢測環(huán)境含有雌激素活性的化學(xué)物質(zhì)的情況下，酵母細(xì)胞分泌的β-半乳糖苷酶分解培養(yǎng)基中的顯色底物氯酚紅β-D-吡喃半乳糖苷（chlorophenol red β-D-galactopyranoside，CPRG），黃色底物分解為紅色產(chǎn)物，其濃度可通過分光光度法進(jìn)行測量。

Rikke Brix 等[10]評估了該重組酵母系統(tǒng)作為環(huán)境樣品的預(yù)篩選工具的適用性，將樣品連續(xù)稀釋后加入含有顯色底物和重組酵母細(xì)胞的培養(yǎng)基中，結(jié)果顯示樣品中的17β-雌二醇的檢測水平為0.681 ng/mL，檢測限為 0.084 ng/mL～0.73 ng/mL。Vieira Dias 等[11]使用該重組酵母檢測系統(tǒng)評估了巴西里約熱內(nèi)盧天然水域和官渡河水樣中的雌激素活性物質(zhì)，結(jié)果顯示在里約熱內(nèi)盧河流的三個(gè)采樣地點(diǎn)采集的水樣的17β-雌二醇等價(jià)值（17β-estradiol equivalents，EEQ）最大濃度為16 ng/L，官渡河采集樣品中最大EEQ 值為15 ng/L。Beck 等[12]使用該重組酵母系統(tǒng)檢測了德國波羅的海沿海地區(qū)地表水的總雌激素活性物質(zhì)含量，檢測結(jié)果顯示Inner Wismar Bay，Eggers Wiek 和達(dá)爾斯半島地區(qū)的 EEQ 值范圍分別為 0.06 ng/L～0.34 ng/L、0.03 ng/L～0.41 ng/L 和 0.17 ng/L～0.28 ng/L。

Hairong Xu 等[13]基于綠色熒光蛋白（yEGFP 基因）構(gòu)建了一株可以快速篩選和監(jiān)測環(huán)境中雌激素化學(xué)物質(zhì)的重組酵母細(xì)胞，該菌株先后插入兩個(gè)質(zhì)粒，包括一個(gè)含有與GPD 基因啟動(dòng)子融合的人雌激素受體（hER）cDNA 質(zhì)粒和另一個(gè)由 ERE 控制下插入yEGFP 基因（綠色熒光蛋白）的質(zhì)粒，檢測樣品中雌激素活性化學(xué)物質(zhì)的濃度可通過表達(dá)的綠色熒光蛋白的量來進(jìn)行判定。Sylwia 等[14]根據(jù)此重組酵母表達(dá)系統(tǒng)檢測了從波蘭農(nóng)村Leczna 和盧布林省工業(yè)區(qū)ZAPulawySA 的12 個(gè)農(nóng)場收集的奶牛產(chǎn)奶樣品的雌激素含量，檢測結(jié)果顯示農(nóng)村和工業(yè)區(qū)的牛奶樣品中檢測到含有雌激素活性的樣品分別占有43%、57%，其中農(nóng)村地區(qū)樣品的雌激素EEQ 值范圍為0.30 ng/L～0.44 ng/L，工業(yè)地區(qū)樣品的雌激素EEQ 值為0.29 ng/L～0.49 ng/L。

Salste L 等[15]通過化學(xué)分析和基于熒光素酶（Luc基因）構(gòu)建的重組酵母表達(dá)系統(tǒng)測定了從市政污水處理廠收集的廢水樣品中的17β-雌二醇、雌酮、雌三醇和17α-炔雌醇等雌激素和雌激素活性物質(zhì)的含量，結(jié)果顯示雌激素的平均水平值為4 ng/L～7 ng/L。除了酵母表達(dá)系統(tǒng)，也有研究者基于其他的表達(dá)載體構(gòu)建了雌激素檢測反應(yīng)器。Christoph Zutz 等[16]通過基因工程技術(shù)構(gòu)建了一株含有人類雌激素受體α 和β-半乳糖苷酶基因的修飾菌株構(gòu)巣曲霉Aspergillus nidulans，使用血液、尿液、唾液和牛奶樣品對該真菌生物反應(yīng)器的雌激素反應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，并將結(jié)果與酶聯(lián)反應(yīng)法檢測結(jié)果進(jìn)行比較，檢測結(jié)果基本顯示出一致性，此外，該生物反應(yīng)器檢測樣品不需要提前進(jìn)行預(yù)處理即可直接檢測，對于17β-雌二醇等雌激素檢測限低至1 ng/L。Thomas Hahn 等[17]通過基因工程構(gòu)建了在Arxula adeninivorans 衍生的葡糖淀粉酶（glucoamylase，GAA）啟動(dòng)子控制下表達(dá)人體雌激素受體（h ERα）和由雌激素感應(yīng)元件（estrogen response element，ERE）控制表達(dá)克雷伯氏菌植酸酶（klebsiella phytase，PHYK）報(bào)告基因的重組Arxula adeninivorans 表達(dá)系統(tǒng)，在雌激素化合物的存在下表達(dá)系統(tǒng)誘導(dǎo)表達(dá)植酸酶，研究者探索了不同的啟動(dòng)子位置插入不同數(shù)量的雌激素感應(yīng)元件對報(bào)告基因表達(dá)的影響，在所有的重組細(xì)胞中，雌激素活性的檢測限先后達(dá)到了10 ng/L 和5 ng/L。

生物反應(yīng)器檢測法是20 世紀(jì)90 年代才發(fā)展起來的雌激素研究方法，該方法除了前期構(gòu)建表達(dá)系統(tǒng)需要一定的技術(shù)基礎(chǔ)，在檢測階段不僅費(fèi)時(shí)少、靈敏度高、特異性強(qiáng)，在試驗(yàn)操作和成本上也具有極大的優(yōu)勢。

2 高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC）

高效液相色譜方法是20 世紀(jì)80 年代至90 年代發(fā)展的一門科學(xué)檢測技術(shù)，因其靈敏度高、檢測時(shí)間短、可同時(shí)進(jìn)行定性和定量檢測而得到快速廣泛的應(yīng)用，包括在科學(xué)研究中各種化學(xué)物質(zhì)的研究與檢測。在雌激素活性物質(zhì)檢測方面，高效液相色譜主要應(yīng)用于牛奶、農(nóng)產(chǎn)品等樣品的檢測。Yan 等[18]使用固相萃取-高效液相色譜技術(shù)，快速測定了從中國新鄉(xiāng)隨機(jī)采集的3 種不同品牌的牛奶樣品中的雌酮、雌二醇和雌三醇含量，這三種雌激素物質(zhì)在牛奶樣品中的平均覆蓋率分別為92.6%、90.9%、104.1%，在牛奶樣品中的平均含量分別為 0.275、0.247、0.371 μg/mL，該液相檢測條件對3 種雌激素物質(zhì)的檢測限分別為0.028、0.025、0.045 μg/mL。丁郭影等[19]以 HPLC 技術(shù)為基礎(chǔ)，結(jié)合微波輔助提取法，建立了牛奶中雌激素檢測的方法，在最佳的液相色譜條件及微波工藝條件下，研究結(jié)果得到雌二醇、雌三醇、雌酮的檢測限分別為：145、1.68、1.72 μg/mL。劉敏等[20]以家禽豬糞中較為常見具有潛在危害的17α-雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇和雌酮作為研究對象，建立了分析這4 種類固醇雌激素的GC-MS 檢測方法，檢測結(jié)果表明，在優(yōu)化的檢測條件下，這四種雌激素的檢測限分別為 8.0、2.5、5.1、3.3 μg/kg，平均加標(biāo)回收率在92.3%～137.4%之間。Xiuqin Wang等[21]使用高效液相色譜結(jié)合管內(nèi)固相微萃取技術(shù)建立了一種簡便靈敏的檢測方法，分析了5 種雌激素標(biāo)準(zhǔn)樣品，具有良好的重復(fù)性，標(biāo)準(zhǔn)偏差＜4.1%，檢出限為0.05 mg/L～0.30 mg/L。Guihua Gao 等[22]基于幾種金屬-有機(jī)骨架混合基質(zhì)膜的漩渦輔助膜萃取方法提取人體尿液中的4 種雌激素-雌酮、17β-雌二醇、雌三醇和炔雌醇，使用高效液相色譜技術(shù)熒光檢測進(jìn)行分析，結(jié)果表明提取的雌激素檢測范圍為0.02 ng/mL～200 ng/mL，檢出限為0.05 ng/mL～1.0 ng/mL。雖然高效液相色譜具有很好的靈敏度和特異性，也廣泛應(yīng)用于各個(gè)高校實(shí)驗(yàn)室和研究所檢測，但存在儀器本身成本高、不易移動(dòng)、檢測地點(diǎn)受局限等短板，這些都是無法解決也難以得到改善的因素。

3 氣相色譜法（gas chromatography，GC）

氣相色譜法是所有雌激素活性物質(zhì)檢測方法中最早發(fā)展應(yīng)用的方法，因其高效能、高靈敏度、強(qiáng)選擇性、極快的分析速度、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)，在20 世紀(jì)60年代至80 年代間，研究者們對各類樣品中雌激素活性物質(zhì)的檢測主要就是通過氣相色譜法。目前，氣相色譜法在雌激素物質(zhì)檢測方面主要是應(yīng)用于自然界河流、工業(yè)區(qū)廢水樣品的檢測。Basheer 等[23]使用聚合物涂層空心纖維微量提取技術(shù)結(jié)合氣相色譜法檢測水庫及飲用水樣品中的雌激素含量，通過逐漸降低樣品中分析物濃度得出該檢測系統(tǒng)的檢測限范圍為0.03 ng/L～0.8 ng/L。Zhou 等[24]采用柱前三甲基甲硅烷基衍生化和氣相色譜結(jié)合方法檢測了地表水和廢水處理廠流出的處理水樣品中的雌激素含量，在優(yōu)化的檢測條件下，與超純水空白相比，色譜中沒有明顯干擾出現(xiàn)，樣品中 DES、E1、E2、EE2、E3、Ev 的檢出限分別為 0.01、0.03、0.03、0.07、0.09、0.13 ng/mL。廖濤等[25]使用固相萃取-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法建立了有效檢測殘留雌激素的方法，對水中的雌酮、雌二醇、雌三醇、雙酚A、炔雌醇等9 種雌激素進(jìn)行了同時(shí)檢測，初步分析了荊州市四湖總干渠受環(huán)境雌激素污染的3 個(gè)不同斷面的污染程度。Rocha 等[26]使用氣相色譜法分析了分別在4 個(gè)季節(jié)中從塔古斯河9 個(gè)地點(diǎn)中采集的水樣，評估了包括天然、工業(yè)、制藥、家庭污染物、植物甾醇等在內(nèi)的17 種雌激素類似物，并從其中的兩個(gè)采樣地點(diǎn)中發(fā)現(xiàn)了來自工業(yè)和家庭污染的雌激素物質(zhì)。近年來隨著高效液相和其他檢測方法的發(fā)展，氣相色譜檢測的應(yīng)用逐漸減少，且其不足之處類似于高效液相色譜法，只能在室內(nèi)進(jìn)行樣品的檢測。

4 拉曼光譜法（Raman spectroscopy，RS）

拉曼光譜檢測技術(shù)[27]是利用拉曼光譜來研究分子振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)的一種光譜學(xué)方法，其發(fā)展應(yīng)用相比氣相色譜法和高效液相色譜起步更晚，在雌激素檢測方面的研究也是近十年才開始探索。因拉曼光譜主要功能為定性檢測，故在雌激素的檢測方面更多集中于樣品中多種雌激素物質(zhì)的定性檢測。馮超等[28]應(yīng)用RM-200型便攜式拉曼光譜儀對17β-雌二醇、雌三醇和乙烯雌酚等3 種激素類藥品進(jìn)行拉曼光譜檢測分析，并對3種雌激素進(jìn)行了分析對比和模擬計(jì)算。結(jié)果表明拉曼技術(shù)可以快速準(zhǔn)確的定性檢測出這3 種雌激素，乙烯雌酚在 724、822、908、1 141、1 254、1 554、1 925 cm-1處存在特征峰；雌三醇在 831、1 045、1 111、1 278、1 417 cm-1處存在特征峰；17β-雌二醇 在 865、1 031、1 075、1 257、1 432 cm-1處存在特征峰，上述峰可作為拉曼光譜檢測3 種激素的依據(jù)。Yang Liu 等[29]建立了一種簡單、快速的表面增強(qiáng)共振拉曼散射（surface enhanced Resonance raman scattering，SERRS）的痕量酚類雌激素檢測方法，通過偶聯(lián)反應(yīng)，偶氮化合物形成強(qiáng)烈的SERRS 活性，建立了雌酮、雌三醇、雙酚A 的定性檢測方法，因偶氮染料的每一個(gè)印記只會(huì)對特定的雌激素進(jìn)行染色，故具有極高的特異性，適用于通過偶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行檢測的酚類雌激素。拉曼光譜法目前應(yīng)用相比上述檢測方法并不廣泛，主要原因在于其在定量檢測方面的不足，拉曼光譜的定性檢測對商業(yè)食品中雌激素含量的定量檢測毫無應(yīng)用之處，這在目前對食品安全的日益重視的大趨勢下是一個(gè)極大的不足。

5 其他檢測方法

5.1 化學(xué)發(fā)光法（chemiluminescence，CL）

化學(xué)發(fā)光分析法[30]是分子發(fā)光光譜分析法中的一類，因其操作簡便、具有較好的靈敏度而被應(yīng)用于食品藥品分析、環(huán)境檢測等領(lǐng)域。謝良梟等[31]采用KMnO4-鄰菲咯啉釕-Na2SO3化學(xué)發(fā)光體系來測定雌激素含量，檢測結(jié)果表明其檢出限為3.8×10-7mg/mL，并使用該方法成功應(yīng)用于實(shí)際樣品中雌激素的檢測。

5.2 電化學(xué)生物傳感器（electrochemical biosensor，EB）

生物傳感器技術(shù)是分析生物科學(xué)的一個(gè)分支，其中電化學(xué)生物傳感器是最早出現(xiàn)的生物傳感器，該方法利用了生物反應(yīng)的特異性，同時(shí)具有電化學(xué)分析方法的高靈敏度，從而可以實(shí)現(xiàn)對生物大分子之間相互作用的實(shí)時(shí)檢測。Beitollahi H 等[32]應(yīng)用一種以磁性分子印跡納米粒作為表面活性劑來改良電極的電化學(xué)傳感器檢測雌激素雙酚A，結(jié)果表明其對雙酚A 的檢測靈敏度是未經(jīng)過改良的傳感器的2.6 倍，且該方法已證實(shí)應(yīng)用于樣品的大量檢測。Zhu L 等[33]也使用該方法對飲用水和湖水中的雌激素進(jìn)行了檢測，檢測范圍為6.0×10-7mol/L～1.0×10-4mol/L，檢出限為 1.0×10-7mol/L。

5.3 分子印跡技術(shù)（molecular Imprinting Technology，MIT）

分子印記技術(shù)[34]將模板分子與功能單體相結(jié)合，在交聯(lián)劑的作用下共聚得到固體介質(zhì)，通過物理或化學(xué)方法將模板分子洗脫，獲得具有與目標(biāo)分子空間構(gòu)型和功能基團(tuán)排列相匹配的結(jié)合位點(diǎn)的分子印跡聚合物。張淑瓊等[35]采用氧化鋁模板法和溶膠凝膠法，以雌酮作為印跡分子，合成了對雌酮有特異性識(shí)別的SiO2納米管膜，研究結(jié)果表明納米管對目標(biāo)分子具有高選擇性、高親和性、高容量和快速結(jié)合能力。馬金余等[36]以己烯雌酚為模板分子，α-甲基丙烯酸為功能單體，二甲基丙烯酸乙二醇酯為交聯(lián)劑，合成己烯雌酚分子印跡聚合物，通過選擇不同濃度的甲醇水溶液，己烯雌酚達(dá)到理想的分離純化效果；對加標(biāo)雞肉樣進(jìn)行了含量測定，回收率可達(dá)95%以上。

5.4 酶聯(lián)免疫法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）

酶聯(lián)免疫法主要是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合對樣品中的雌激素物質(zhì)進(jìn)行檢測，在靈敏度檢測方面不夠高，但因具有較強(qiáng)的特異性，檢測時(shí)間短，故在樣品的定性檢測方面具有廣泛的應(yīng)用。Wang 等[37]研究開發(fā)了針對雌（E-1）、17β-雌二醇（17β-E-2）和雌三醇（E-3）的高特異性、高靈敏性單克隆抗體，根據(jù)競爭性酶聯(lián)免疫吸附劑，抗 E-1、抗 17β-E-2 和抗 E-3 單克隆抗體的半數(shù)最大抑制濃度值分別為0.46、0.36、0.39 ng/mL。

6 結(jié)論與展望

目前已有大量文獻(xiàn)研究表明雌激素對女性生理現(xiàn)象混亂、男性生殖系統(tǒng)異常、動(dòng)物繁殖能力及對機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和骨骼系統(tǒng)的常見疾病都有一定程度的影響，因此，建立更靈敏、更高效、更完整的雌激素檢測體系刻不容緩。當(dāng)前關(guān)于雌激素的檢測研究主要集中在雌酮、雌二醇、雌三醇和炔雌醇等幾種物質(zhì)，研究范圍相對狹隘，此外，除了已經(jīng)發(fā)現(xiàn)但還未付諸檢測研究的雌激素活性物質(zhì)，還有大量尚未被發(fā)現(xiàn)的帶有雌激素毒性的物質(zhì)，需要我們進(jìn)行進(jìn)一步地探索發(fā)現(xiàn)，這對人類的生存環(huán)境和減少身體疾病具有重要意義。

在雌激素檢測方法研究方面，相對成熟的方法主要是氣相色譜和高效液相色譜法，筆者在探索霉菌毒素玉米赤霉烯酮的生物降解機(jī)理過程中，主要使用高效液相色譜法檢測ZEA 的含量，雖然檢測靈敏度和重現(xiàn)性均良好，但不適用現(xiàn)場、快速的檢測，尤其儀器維護(hù)成本較高[38-44]。本文詳細(xì)介紹的轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器在定性和定量檢測以及研究成本、生態(tài)環(huán)境方面都具有的明顯的優(yōu)勢，但目前國內(nèi)外關(guān)于該方法的建立研究屈指可數(shù)，且其表達(dá)載體主要為酵母，在日后的研究中，可以在目的基因、受體和載體當(dāng)面作更為深入的研究，使轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器檢測方法發(fā)展為更成熟的檢測體系。