乳腺癌轉移抑制基因1BRMS1與宮頸癌變臨床病理參數(shù)的關系研究

毛莉 李彩虹 張建

[摘要] 目的 探討乳腺癌轉移抑制基因1（BRMS1）與宮頸癌變臨床病理參數(shù)的關系。 方法 選取2017年4月22日～2018年4月22日期間我院收治的100例具有完整病理資料的宮頸疾病患者為實驗對象，其中29例為輕度慢性宮頸炎，11例為CINⅠ級，10例為CINⅡ～Ⅲ級，50例為宮頸癌，對所有患者均進行BRMS1基因檢測。 結果 從宮頸組織中的BRMS1表達角度分析，CINⅡ～Ⅲ期和CINⅠ期患者表達率無差異性（P>0.05），宮頸癌、CINⅡ～Ⅲ期、CINⅠ期患者與慢性宮頸炎患者相比，BRMS1蛋白陽性表達率下降（P<0.05）。從BRMS1表達的臨床病理特征角度分析，不同浸潤程度、FIGO分期、有無淋巴轉移患者BRMS1表達陽性率存在明顯差異（P<0.05），不同組織學分型、分化程度、腫瘤大小、年齡患者的BRMS1表達陽性率差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 結論 宮頸癌變與BRMS1表達可呈負相關性，當BRMS1蛋白表達下降時，則意味著癌細胞處于轉移、浸潤、發(fā)展趨勢。

[關鍵詞] 乳腺癌;轉移抑制基因1;宮頸癌變;病理參數(shù);關系

[中圖分類號] R737.33 ? ? ? ? ?[文獻標識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-9701（2019）14-0001-03

[Abstract] Objective To explore the relationship between breast cancer metastasis suppressor 1（BRMS1） and clinical pathological parameters of cervical carcinogenesis. Methods A total of 100 patients with cervical disease with complete pathological data from April 22， 2017 to April 22， 2018 in our hospital were selected as subjects， 29 cases of whom were mild chronic cervicitis， 11 cases were CINⅠ， 10 cases were CINⅡ-Ⅲ grade， and 50 cases were cervical cancer. BRMS1 gene test was performed in all patients. Results From the perspective of BRMS1 expression in cervical tissues， there was no difference in the expression rates of patients with CINⅡ-Ⅲ and CINⅠ（P>0.05）. The positive expression rate of BRMSI protein decreased in patients with cervical cancer， CINⅡ-Ⅲ， and CINⅠpatients， compared with that of patients with chronic cervicitis（P<0.05）. From the perspective of clinicopathological features of BRMS1 expression， there was a significant difference in the positive rate of BRMS1 expression in patients with different degrees of infiltration， FIGO stage， with or without lymphatic metastasis （P<0.05）. There was no difference in the positive rate of BRMS1 expression in patients with different histological types， differentiation， tumor size， and age（P>0.05）. Conclusion Cervical carcinogenesis can be negatively correlated with BRMS1 expression. When BRMS1 protein expression is decreased， it means that cancer cells are in metastasis， infiltration and development trend.

[Key words] Breast cancer; Metastasis suppressor gene 1; Cervical carcinogenesis; Pathological parameters; Relationship

乳腺癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢，具有病死率高、預后差、發(fā)病隱匿等特點，屬于女性第二大惡性腫瘤，目前已成為危害女性健康的首要疾病。隨著對乳腺癌的深入研究，發(fā)現(xiàn)導致患者死亡、治療失敗的主要因素為腫瘤轉移和腫瘤浸潤[1]，而在腫瘤轉移中起到較為重要的因子為腫瘤轉移抑制基因，就目前而言，乳腺癌轉移抑制基因1是乳腺癌中發(fā)現(xiàn)的新型惡性腫瘤轉移基因，早期由賓夕法尼亞州立大學醫(yī)學中心在2000年提出，其能夠在不影響原腫瘤生長前提下，抑制腫瘤細胞的轉移[2]。分析往期報道，可發(fā)現(xiàn)乳腺癌轉移抑制基因1除了在乳腺癌中具有一定的作用性，還在小細胞未分化肺癌、喉癌、口腔鱗癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢上皮癌、膀胱癌、惡性黑色素瘤等多種腫瘤轉移中起到明顯抑制作用[3]。但乳腺癌轉移抑制基因1在宮頸癌組織中表達情況等相關報道較少。而本文旨在探討B(tài)RMS1與宮頸癌變臨床病理參數(shù)的關系和價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年4月22日～2018年4月22日期間我院收治的具有完整病理資料的宮頸疾病患者100例，患者均為已婚女性，年齡24～68歲，平均（46.85±7.19）歲，其中50例為宮頸癌（根據(jù)FIGO分期原則，25例為ⅡB期～Ⅳ期，25例為Ⅰ期～ⅡA期），10例為CINⅡ～Ⅲ級，11例為CINⅠ級，29例為輕度慢性宮頸炎。本次研究的50例宮頸癌患者均接受手術治療，且在術前未經(jīng)過其他輔助、化療、放療等干預，且運用腹主動脈淋巴結取樣術、盆腔淋巴結切除術、廣泛性全子宮切除術治療。同時所有患者均具有完整的病理資料，包括手術切緣情況、淋巴結轉移、浸潤深度、瘤體直徑、FIGO分期、組織學分化程度等情況。入選標準：（1）患者臨床資料齊全;（2）患者經(jīng)病理活檢，確診為宮頸疾病;（3）患者均自愿加入本次試驗。排除標準：（1）排除存在躁動、焦慮、抵觸等情緒者;（2）排除存在嚴重臟器功能受損者;（3）排除凝血功能障礙者。

1.2 方法

試劑選擇：由武漢ELAab科技有限公司提供BRMS1兔抗人多克隆抗體，本次試劑均為進口藥。BRMS1一抗工作濃度為1：400。由南京BIOWLD生物科技有限公司提供超敏免疫組化二抗試劑盒（Super Sensitive TM即用型）。由北京博奧森生物技術有限公司提供辣根過氧化物酶（DAB）顯色試劑盒。

檢測方式：采集到標本后，需進行常規(guī)脫水、石蠟包埋，且均用福爾馬林液（10%）固定，隨后對石蠟標本進行連續(xù)性切片，控制在2張，其中1張進行BRMSI免疫組化染色，另1張切片行常規(guī)HE染色，切片維持在4 μm，進行3 h的烤片（維持65 ℃），隨后運用免疫組化法染色（Super Sensitive TM）。試劑盒操作方式：對免疫性動物血清進行封閉繁育，運用微波爐對枸櫞酸鹽緩沖液進行抗原修復，梯度乙醇水化，石蠟切片脫蠟，并加入抗體，維持16 h過夜，加入一抗放大劑室溫孵育，隨后蘇木精復染，DAB顯色，上行梯度二甲苯透明、乙醇脫水，封片可選擇中性樹膠，并在鏡下進行記錄、觀察、分析結果[4]。

結果判定標準：在同一個顯微鏡40倍觀察全片，以細胞質為主，NF-κBp50、BRMS1均表達于細胞核和細胞質中，蛋白陽性信號呈棕黃色顆粒狀，選擇5個400倍高倍視野，確定腫瘤浸潤邊緣，參照Barnes提出半定量分析法，了解5個不同視野染色細胞百分數(shù)[5]。運用0～3分法評估染色強度[6]，3分：棕褐色;2分：棕黃色;1分：淺黃色;0分：不著色。運用0～4分法計量陽性細胞數(shù)量[7]，4分：陽性細胞≥76%;3分：陽性細胞為51%～75%;2分：陽性細胞為26%～50%;1分：陽性細胞≤25%;0分：無陽性細胞。將以上兩種方法相乘，且運用四級陽性分析法[8]：>4分為+++強陽性;3～4分為++陽性;1～2分為+弱陽性;0分為陰性。

1.3 觀察指標

分析不同宮頸組織中的BRMS1表達。分析宮頸癌組織中BRMS1表達的臨床病理特征。

1.4 統(tǒng)計學方法

運用統(tǒng)計學SPSS22.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，而BRMS1表達、臨床病理特征（淋巴結轉移、浸潤深度、組織學分型、FIGO分期、分化程度、腫瘤大小、年齡）采用連續(xù)性校正χ2檢驗、四格表χ2檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計意義。

2 結果

2.1 不同宮頸組織中的BRMS1表達

BRMS1蛋白主要分布在上皮細胞的細胞核和細胞質，其中最為重要的是胞質，存在黃色顆粒沉著。本次研究結果中，宮頸癌、CINⅡ～Ⅲ期、CINⅠ期患者與慢性宮頸炎患者相比，BRMS1蛋白陽性表達率下降（P<0.05），而CINⅡ～Ⅲ期和CINⅠ期患者表達率無差異性（P>0.05）。見表1。

2.2 宮頸癌組織中BRMS1表達的臨床病理特征分析

不同組織學分型、分化程度、腫瘤大小、年齡患者的BRMS1表達陽性率均無差異性（P>0.05），而不同浸潤程度、FIGO分期、有無淋巴轉移患者BRMS1表達陽性率存在明顯差異性（P<0.05）。見表2。

3 討論

BRMS1表達能夠通過與其他分子形成轉錄復合物抑制腫瘤轉移，調控基因的表達，內(nèi)包含幾個蛋白和轉錄激活區(qū)的相互作用區(qū)，主要定位于細胞核內(nèi)。目前作用機制尚未明確，但可發(fā)現(xiàn)在腫瘤發(fā)展過程中，細胞間縫隙連接的改變存在一定作用性，可促進腫瘤的轉移[9-11]。此外，BRMS1基因定位于11q3.1～11q3.2區(qū)域，屬于新型惡性腫瘤的MSG，不影響腫瘤的生長，可抑制腫瘤轉移，在早期有學者表明，BRMS1基因存在抑制腫瘤細胞遠處轉移功能，且此項功能不受腫瘤大小的影響[12-14]。當惡性腫瘤細胞出現(xiàn)高度轉移潛能時，BRMS1基因表達可出現(xiàn)明顯的降低或表達缺失[15]。

BRMS1具有多個磷酸化位點，全長為148 bp，是由多個氨基酸組成的蛋白質，隨著研究深入，發(fā)現(xiàn)其表達與乳腺癌預后、發(fā)展、發(fā)生具有一定的相關性，通過檢測，發(fā)現(xiàn)乳腺癌淋巴結轉移組織BRMS1表達明顯低于非轉移組織，由此說明，BRMS1表達下降時，則提示機體存在淋巴結轉移跡象。而本次試驗中，提示BRMS1表達下降時，存在淋巴結轉移可能性，但有部分學者提出異議，因此相關報道還有待深入。除了在轉移角度上臨床學者存在爭議，關于BRMS1病理分級、浸潤深度等情況均存在爭議性。但不可否認，高表達的BRMS1無法改變原發(fā)腫瘤生長情況，但可促進肺內(nèi)腫瘤細胞的凋亡和抑制腫瘤細胞的肺轉移。

分析本次實驗發(fā)現(xiàn)BRMS1基因在CIN患者和宮頸癌患者中表達水平低于宮頸炎患者，同時其表達因子與機體有無淋巴結轉移、浸潤程度、臨床分期具有一定的關聯(lián)性，隨著淋巴結轉移、浸潤深度的加深，BRMS1表達呈現(xiàn)為缺失或下調趨勢，但BRMS1表達與組織分型、腫瘤大小、分化程度、年齡無關[16-18]。除此之外，分析往期報道可發(fā)現(xiàn)BRMS1能夠明顯抑制腫瘤細胞的轉移，且可在人類黑色素瘤中被發(fā)現(xiàn)，有學者發(fā)現(xiàn)BRMS1通常是通過抑制NF-κB活性，減少骨橋蛋白的表達，從而達到抑制腫瘤轉移的目的。從宮頸癌變角度分析，NF-κB和BRMS1關系尚未明確[19-20]。分析本次實驗，BRMS1的炎性表達可隨著宮頸病變的嚴重程度呈負相關性。本次結果中，不同組織學分型、分化程度、腫瘤大小、年齡患者的BRMS1表達陽性率均無差異性（P>0.05）;不同浸潤程度、FIGO分期、有無淋巴轉移患者BRMS1表達陽性率存在明顯差異性（P<0.05）;宮頸癌、CINⅡ～Ⅲ期、CINⅠ期患者與慢性宮頸炎患者相比，BRMS1蛋白陽性表達率下降（P<0.05）;CINⅡ～Ⅲ期和CINⅠ期患者表達率無差異性（P>0.05），由此說明，宮頸癌變與BRMS1表達可呈負相關性。

總而言之，當癌細胞持續(xù)轉移、浸潤、發(fā)展時，BRMS1蛋白表達因子可呈缺失、降低趨勢，同時BRMS1在腫瘤轉移、浸潤過程中可表現(xiàn)為多樣化，為了進一步了解BRMS1機制和功能，還需進一步深入研究、探索，從而提高患者生存率，盡早阻止癌細胞侵襲轉移。

[參考文獻]

[1] 王麗霞，毛俊，陶雅軍，等. 乳腺癌干細胞亞群中MMP-9和BRMS1的表達及其臨床病理意義[J]. 臨床與實驗病理學雜志，2013，29（5）：472-476.

[2] 張雨祿，胡三元. 乳腺癌轉移抑制因子（BRMS1）在人乳腺癌細胞系中的表達受體研究[J]. 鄭州大學學報（理學版），2014，46（1）：94-97.

[3] 夏菁，呂志棟，周沛紅，等. BRMS1基因啟動子甲基化修飾及其表達與三陰性乳腺癌轉移的相關性[J]. 中華醫(yī)學雜志，2017，97（44）：3483-3487.

[4] 姚亞峰，龔燁，李炳軍，等. 乳腺浸潤性導管癌原發(fā)灶、腋窩淋巴結轉移灶組織中SATB1和BRMS1的表達變化[J]. 山東醫(yī)藥，2015，15（43）：76-77.

[5] 胡祖健，徐海濱，任興昌，等. 乳腺癌轉移抑制基因、尿激酶型纖溶酶原激活劑在乳腺癌組織中的表達[J]. 全科醫(yī)學臨床與教育，2015，21（2）：132-134.

[6] 李中林，梅鵬金，白津，等. 乳腺癌轉移抑制基因1通過金屬蛋白酶組織抑制因子-2/基質金屬蛋白酶-2途徑抑制膠質瘤細胞侵襲[J]. 中華實驗外科雜志，2013， 30（11）：2327-2329.

[7] 張英，陳麗娟，劉永源，等. 乳腺浸潤性導管癌中 SATB1和 BRMS1的表達及與淋巴轉移的相關性[J]. 廣東醫(yī)學，2015，15（4）：532-537.

[8] 李靜，郭文治. 乳腺癌轉移抑制基因和運動相關蛋白基因在肝癌組織中的表達及其意義[J]. 中華實驗外科雜志，2013，30（5）：1042-1044.

[9] 饒玉梅，陳剛，李留霞，等. BRMS1、整合素β1及p-AKT在卵巢癌組織中的表達及臨床意義[J]. 中國當代醫(yī)藥，2013，20（23）：9-11.

[10] 李中林，梅鵬金，白津，等. 乳腺癌轉移抑制基因1對膠質瘤細胞黏附和遷移的影響及其機制[J]. 中華實驗外科雜志，2013，30（12）：2606-2608.

[11] 陳麗娟.乳 腺浸潤性導管癌中SATB1和BRMS1的表達及其與淋巴轉移相關性研究[D]. 廣東醫(yī)學院，2013.

[12] 段清，張暉. hTERT、hTERC基因在宮頸病變中的研究進展[J]. 臨床心身疾病雜志，2015，21（z1）：305-306.

[13] 陳苗苗，吳均，朱雪瓊，等. 細胞分化相關基因在宮頸癌中的研究進展[J]. 醫(yī)學研究雜志，2013，42（11）：165-168.

[14] 潘中亞，龍行華. 乳腺癌轉移抑制基因1表達與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關性的Meta分析[J]. 國際腫瘤學雜志，2016， 43（8）：603-608.

[15] 劉學智，南晶，李娟，等. FHIT基因甲基化及蛋白表達與HPV16感染在宮頸癌變中的交互效應[J]. 中華流行病學雜志，2016，37（6）：858-862.

[16] 盧丹，錢靜，孫飛，等. PI3K、Akt、mTOR、p70S6K基因在宮頸癌變過程中的表達及相關性研究[J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志，2015，25（2）：46-51.

[17] 黃平，唐秋英，金瑛，等. Bcl-2蛋白在宮頸癌變組織中的表達及其與人乳頭瘤病毒感染的關聯(lián)性[J]. 海南醫(yī)學，2013，24（1）：3-5.

[18] 陳春琴，鄔素芳. 高危型人類乳頭瘤病毒E7促進宮頸癌變的分子機制研究進展[J]. 浙江臨床醫(yī)學，2017，19（4）：770-772.

[19] 林翠波，林安，何海新，等. 抑癌基因P16和FHIT在宮頸病變組織中的表達及意義[J]. 中國婦幼健康研究，2017，28（11）：1362-1363，1380.

[20] 劉素琴，田瑞云，延海秀，等. 高危型HPV和PTEN在宮頸癌變過程中的作用及相互關系[J]. 中國基層醫(yī)藥，2013，20（5）：647-649.

（收稿日期：2018-09-05）