茶葉中甲萘威農(nóng)殘表面增強(qiáng)拉曼光譜 (SERS)結(jié)合快速前處理檢測(cè)方法的建立

朱曉宇,艾施榮,彭雄鑫,李 紅,楊普香,李文金,陳 濤,吳瑞梅,*

(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)南昌市農(nóng)產(chǎn)品加工與質(zhì)量控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西南昌 330045; 2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)工學(xué)院,江西南昌 330045; 3.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院,江西南昌 330045; 4.江西省蠶桑茶葉研究所,江西南昌 330043)

茶葉是中國(guó)的主要經(jīng)濟(jì)作物,而在茶葉種植過(guò)程中,存在農(nóng)藥不合理使用及濫用等行為,導(dǎo)致茶葉中常被檢出農(nóng)殘超標(biāo)問(wèn)題。甲萘威(又名西維因),是一種常用于稻、茶、桑等作物的氨基甲酸酯類農(nóng)藥,因具有高效、低毒等特點(diǎn),而被廣泛使用于農(nóng)產(chǎn)品中病蟲(chóng)害防治。但其具有觸殺、胃毒作用,會(huì)損害人體免疫系統(tǒng)和神經(jīng)中樞系統(tǒng),人長(zhǎng)期食用甲萘威超標(biāo)農(nóng)產(chǎn)品,易導(dǎo)致致癌等癥狀。因此,我國(guó)制定了嚴(yán)格的甲萘威農(nóng)殘限量標(biāo)準(zhǔn)。近年來(lái),甲萘威農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法有高效液相色譜法[1-2]、生物傳感器法[3-4]、酶抑制法[5]、酶聯(lián)免疫法[6]等。這些方法用于檢測(cè)農(nóng)藥的殘留,但存在前處理復(fù)雜、儀器昂貴、耗時(shí)長(zhǎng)等缺點(diǎn)。

表面增強(qiáng)拉曼光譜(Surface-enhanced Raman Spectroscopy,SERS)技術(shù)利用金、銀等金屬粗糙表面產(chǎn)生電磁場(chǎng)作用,可將吸附在金屬粗糙表面的待測(cè)物拉曼信號(hào)增強(qiáng)106～109倍,從而提高檢測(cè)靈敏度[7-8]。SERS技術(shù)具有樣品制備簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快、檢測(cè)靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),廣泛用于食品農(nóng)產(chǎn)品痕量農(nóng)藥殘留[9-10]、獸藥殘留[11]等危害物質(zhì)的快速檢測(cè)。胡琪等[12]采用SERS技術(shù)對(duì)水溶液中甲萘威殘留進(jìn)行分析,其檢測(cè)結(jié)果可達(dá)0.1 mg/L,滿足國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。Liu等[13]利用SERS對(duì)水果中甲萘威、亞胺硫磷、谷硫磷進(jìn)行檢測(cè),其檢測(cè)濃度均低于6.66 ppm。農(nóng)產(chǎn)品基質(zhì)復(fù)雜,對(duì)SERS方法的檢測(cè)精度影響很大。陳漾等[14]應(yīng)用SERS技術(shù)檢測(cè)椰汁中西維因農(nóng)藥殘留,通過(guò)對(duì)西維因進(jìn)行偶合反應(yīng),最低檢出濃度達(dá)到1.7 mg/L,間接建立椰汁中西維因的分析方法,但上述方法需重氮偶合反應(yīng)前處理,操作過(guò)程復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)、成本高。

茶葉是一種常見(jiàn)的保健飲品,其成分復(fù)雜,對(duì)農(nóng)藥分子檢測(cè)基質(zhì)效應(yīng)大,因此,有效的樣品前處理是分析方法的關(guān)鍵。本文研究不同凈化劑去除茶葉基質(zhì)效應(yīng)的影響,尋找一種快速、簡(jiǎn)單、高效的茶葉農(nóng)藥殘留SERS檢測(cè)的快速前處理方法,以提高方法檢測(cè)精度,降低方法的檢測(cè)限,建立茶葉中甲萘威農(nóng)藥殘留的SERS快速檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

甲萘威標(biāo)準(zhǔn)品(99.0%) 美國(guó)Sigma公司;氯金酸AuCl3·HCl·4H2O(99.7%) 上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;乙腈、無(wú)水硫酸鎂、氯化鈉 分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,有機(jī)濾膜0.22 μm 美國(guó)Agilent公司;檸檬酸三鈉 分析純,西隴化工股份有限公司;N-丙基乙二胺(PSA) 天津博納艾杰爾科技有限公司;納米竹炭(NBC) 上海海諾炭業(yè)有限公司;陰性茶葉樣本(農(nóng)藥殘留均在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)以內(nèi)) 由江西出入境檢驗(yàn)檢疫局提供。

RamTracer-200-HS高靈敏度激光拉曼光譜儀 Opto Trace Technologies,Inc.;JW-1024離心機(jī) 安徽嘉文儀器裝備有限公司;ZNCL-T智能恒溫磁力攪拌器 鄭州市亞榮儀器有限公司;VORTEX-5渦旋混合器 海門市其林貝爾儀器有限公司;FA2004電子天平 上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司;Hitachi S-4800掃描電子顯微鏡 日本Hitachi公司;T6紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 北京浦西通用儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 金納米增強(qiáng)基底的制備及表征 采用經(jīng)典檸檬酸鈉還原HAuCl4方法,制備金納米增強(qiáng)基底[15]。具體制備過(guò)程如下:將100 mL濃度為1 mmol/L的氯金酸溶液移入到100 mL圓底燒瓶中,加熱至沸騰;將3.7 mL質(zhì)量濃度為1%的檸檬酸鈉溶液,迅速加入到沸騰的氯金酸溶液中,繼續(xù)加熱并劇烈攪拌20 min,得到紅棕色懸浮液,自然冷卻到室溫,置于-4 ℃環(huán)境下保存,備用。

取一定量的金納米溶膠,用超純水將其稀釋后,用紫外分光光計(jì)測(cè)定稀釋液的吸光度,單次掃描,掃描波長(zhǎng)范圍400～900 nm,間隔2 nm。取一定量的金納米溶膠進(jìn)行離心清洗,去除上清液,離心步驟重復(fù)2次,將濃縮的納米金顆粒滴加于干凈的硅片上,干燥后于掃描電子顯微鏡下觀察。SEM工作電壓為10 kV,電流為10 μA,工作距離為6.7 mm,放大倍數(shù)為100 k。

1.2.2 以茶葉提取液為基質(zhì)甲萘威溶液的配制 稱取甲萘威固體標(biāo)準(zhǔn)品1.05 g,轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中,用少量乙腈超聲溶解后,定容至100 mL刻度線,得到105 mg/L的甲萘威標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用乙腈將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成濃度梯度:100、90、65、55、40、25、20、15、10、5 mg/L。

稱取2.00 g綠茶陰性樣本于50 mL的離心管中,加入10 mL乙腈,渦旋2 min,4500 r/min離心5 min。取0.3 mL的甲萘威標(biāo)準(zhǔn)品和2.7 mL茶葉上清液混合,按照1∶9(甲萘威農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品∶茶葉上清液)用茶葉上清液將甲萘威標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成不同濃度梯度的含農(nóng)藥殘留茶葉溶液:5.56、5.00、3.61、3.06、2.22、1.39、1.11、0.83、0.56、0.28 mg/kg。

1.2.3 拉曼光譜采集 分別取500 μL金膠、40 μL待測(cè)溶液、100 μL 1%氯化鈉溶液加入到石英進(jìn)樣瓶中,混合均勻,采集拉曼信號(hào)。激發(fā)波長(zhǎng):785 nm,激光功率:400 mW,積分時(shí)間:10 s,積分次數(shù):2次,分辨率:4 cm-1。每個(gè)樣本采集3次,求平均值。

1.2.4 甲萘威拉曼光譜理論計(jì)算 采用GaussView 4.1 軟件模擬構(gòu)建甲萘威分子結(jié)構(gòu),并用Gaussian 03W優(yōu)化計(jì)算拉曼譜峰,計(jì)算方法為B3LYP,計(jì)算基組6-31G,由GaussView 4.1分析計(jì)算結(jié)果,得到甲萘威理論計(jì)算拉曼譜圖。

1.2.5 茶葉提取液基質(zhì)優(yōu)化 茶葉中樣品前處理是影響分析農(nóng)殘檢測(cè)的關(guān)鍵,通過(guò)對(duì)比PSA和NBC填料及用量對(duì)茶葉基質(zhì)的凈化效果,優(yōu)選出最佳填料及用量,以提高方法的檢測(cè)精度和靈敏度。

1.2.5.1 PSA填料用量?jī)?yōu)化 分別稱取0、50、100、150、200、250 mg PSA填料于6個(gè)10 mL離心管中,分別加入200 mg無(wú)水硫酸鎂;取2 mL含甲萘威農(nóng)藥殘留的茶葉提取液,分別加入上述離心管中,渦旋2 min后,于轉(zhuǎn)速4500 r/min離心5 min,取上清液,過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜,上機(jī)檢測(cè),分析PSA的凈化效果及其最優(yōu)用量。

1.2.5.2 NBC填料用量?jī)?yōu)化 分別稱取0、15、20、25、30、35、40 mg NBC于7個(gè)10 mL離心管中,分別加入200 mg無(wú)水硫酸鎂;取2 mL含甲萘威農(nóng)藥殘留的茶葉提取液,分別加入上述離心管中,渦旋2 min后,于轉(zhuǎn)速4500 r/min離心5 min,取上清液,過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜,上機(jī)檢測(cè),分析NBC的凈化效果及其最優(yōu)用量。

1.2.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 按照1.2.5的前處理方法,1.2.3的操作步驟采集以茶葉提取液為基質(zhì)配制不同濃度甲萘威溶液(1.2.2)信號(hào),以拉曼特征峰強(qiáng)度為縱坐標(biāo)(Y),甲萘威濃度為橫坐標(biāo)(X),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.7 回收率實(shí)驗(yàn)測(cè)定 按1.2.2中配方法得到2.5、4.17、5.28 mg/kg 3個(gè)濃度的待測(cè)溶液,每個(gè)濃度配制3個(gè)平行樣本,按照1.2.3實(shí)驗(yàn)條件測(cè)定拉曼特征峰強(qiáng)度,計(jì)算回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用OriginPro-2016 9.0和MATLAB R2014a對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 金納米溶膠表征

圖1是金溶膠紫外吸收光譜圖(a)和電鏡掃面圖(b)。從圖1可看出,金溶膠最大吸收峰為540 nm,該吸收峰呈單峰,表明試驗(yàn)所制備的金納米粒子呈球形,且粒徑均勻,粒徑約為55 nm[16]。采用電鏡掃描圖可進(jìn)一步對(duì)金納米粒子進(jìn)行表征,由圖(b)可以看出,金納米粒子呈球形,粒徑約為55 nm,分散效果良好。

圖1 金納米溶膠的UV-Vis圖(a)和SEM圖(b)Fig.1 UV-Vis spectrum(a) and SEM(b)spectrum of gold colloids

2.2 甲萘威標(biāo)準(zhǔn)溶液的普通拉曼光譜與SERS光譜分析

圖2(a)、(b)、(c)和(d)分別是濃度為2 mg/L甲萘威標(biāo)準(zhǔn)溶液的SERS、普通拉曼光譜、乙腈的SERS和金納米膠體拉曼譜圖。從圖2(d)中可看出,金溶膠中未出現(xiàn)拉曼峰,說(shuō)明增強(qiáng)基底不會(huì)對(duì)試驗(yàn)產(chǎn)生干擾。由圖2(b)和(c)可看出,甲萘威普通拉曼光譜與乙腈SERS譜圖基本相似,說(shuō)明甲萘威普通拉曼譜圖中農(nóng)藥分子特征峰未得到增強(qiáng);而圖2(a)具有明顯的拉曼譜峰,說(shuō)明所制備的金納米膠體對(duì)甲萘威分子增強(qiáng)效應(yīng)顯著。

圖2 2 mg/L甲萘威標(biāo)準(zhǔn)溶液的SERS(a)和普通拉曼光譜(b)、乙腈的SERS(c)、金納米膠體的光譜(d)Fig.2 SERS(a)and ordinary Raman spectroscopy(b)of 2 mg/L carbaryl standard solution,SERS of acetonitrile(c) and Raman spectrum of gold nanocolloid(d)

2.3 茶葉中甲萘威分子特征譜峰的確定

2.3.1 甲萘威分子的理論計(jì)算譜峰與試驗(yàn)譜峰分析 圖3(a)是濃度為10 mg/L甲萘威標(biāo)準(zhǔn)溶液的SERS,(b)是甲萘威分子的理論計(jì)算拉曼光譜。從圖3可看出,在1211 cm-1處,試驗(yàn)譜峰與理論計(jì)算譜峰完全一致,而923、1106、1487、1528、1557 cm-1處試驗(yàn)譜峰與理論計(jì)算譜峰略有偏移。在768、1039、1349、1409 cm-1處存在理論計(jì)算譜峰,而試驗(yàn)譜峰中未出現(xiàn),在806、1003、1057、1426 cm-1處,試驗(yàn)譜峰出現(xiàn)而理論譜峰未出現(xiàn)。這是因?yàn)?甲萘威分子與溶劑分子之間存在相互作用力,導(dǎo)致增強(qiáng)基底對(duì)不同官能團(tuán)產(chǎn)生的增強(qiáng)效果差異較大,從而使試驗(yàn)拉曼譜峰出現(xiàn)偏移現(xiàn)象,而理論模擬譜峰是在理想狀態(tài)下對(duì)單個(gè)分子進(jìn)行模擬仿真計(jì)算,未考慮分子間作用力影響,從而出現(xiàn)有些試驗(yàn)譜峰與理論計(jì)算譜峰略有偏移,有些譜峰在理論計(jì)算和試驗(yàn)中不會(huì)同時(shí)出現(xiàn)[17]。

圖3 濃度為10 mg/L甲萘威標(biāo)準(zhǔn)溶液的SERS(a)和甲萘威的理論計(jì)算譜峰(b)Fig.3 SERS for 10 mg/L carbaryl standard solution(a) and the theoretical Raman spectrum of carbarly(b)

表1 甲萘威的拉曼譜峰歸屬Table 1 Assignment of Raman peaks of carbaryl

甲萘威分子結(jié)構(gòu)中含有萘環(huán)、-C-O-、-C-H-、-C-N-、-C=C-、-N-H-等官能團(tuán),不同官能團(tuán)對(duì)應(yīng)的拉曼振動(dòng)譜峰不同,對(duì)甲萘威分子進(jìn)行譜峰歸屬[13]。表1是甲萘威理論拉曼譜峰與試驗(yàn)譜峰歸屬結(jié)果,其中1557、923、1106、1211、1487、1528 cm-1的理論計(jì)算譜峰和試驗(yàn)譜峰基本相吻合,對(duì)這些譜峰進(jìn)行歸屬,1557 cm-1處峰強(qiáng)最高,歸屬于萘環(huán)上-C=C-的伸縮振動(dòng),923 cm-1歸屬于萘環(huán)的變形振動(dòng),1106 cm-1歸屬于C10H7O-C-上-C-O-的伸縮振動(dòng),1211 cm-1主要?dú)w屬于CH3-NH-上-C-N-的伸縮振動(dòng),1487 cm-1歸屬于氨基上-N-H-的伸縮振動(dòng),1528 cm-1歸屬甲基上-C-H-的搖擺振動(dòng)。上述振動(dòng)譜峰可作為甲萘威分子的特征峰。

2.3.2 茶葉中甲萘威農(nóng)藥譜峰分析 圖4(a)是濃度為10 mg/L甲萘威標(biāo)準(zhǔn)溶液的SERS,(b)是陰性茶葉提取液SERS,(c)是濃度為10 mg/L含農(nóng)殘茶葉提取液的SERS,(d)是乙腈的SERS。從標(biāo)準(zhǔn)溶液譜圖4(a)及表1可知,923、1106、1211、1487、1528、1557 cm-1是甲萘威農(nóng)藥分子的特征譜峰;4(b)圖中陰性茶葉基質(zhì)的SERS譜圖中有大量譜峰,但并未出現(xiàn)甲萘威分子的特征譜峰;含農(nóng)殘茶葉提取液SERS的譜圖4(c)也有大量譜峰。對(duì)比圖4(b)、4(c)和4(d)及表1可知,含農(nóng)殘茶葉提取液SERS的譜圖中出現(xiàn)了3個(gè)甲萘威分子特征譜峰:1103、1213、1557 cm-1,這些特征譜峰與茶葉成分的譜峰并不重疊。由此得出,1103、1213、1557 cm-1這3個(gè)特征峰可用于定性定量分析茶葉中甲萘威農(nóng)藥殘留。

圖4 10 mg/L甲萘威標(biāo)準(zhǔn)溶液SERS(a)、陰性茶葉提取液SERS(b)、濃度為10 mg/L以茶葉 提取液為基質(zhì)的甲萘威SERS(c)、乙腈的SERS(d)Fig.4 SERS for 10 mg/L carbaryl standard solution(a), SERS of negative matrix of tea extraction(b)and SERS of 10 mg/L carbarly solution based on tea extraction(c),SERS of acetonitrile(d)

2.4 茶葉提取液凈化優(yōu)化結(jié)果分析

2.4.1 PSA優(yōu)化結(jié)果分析 圖5是不同PSA用量對(duì)茶葉中色素的凈化效果圖(A)和SERS(B)。從圖5(A)中可以看出,隨著PSA用量增加,茶葉上清液顏色無(wú)明顯變化,說(shuō)明PSA對(duì)綠茶基質(zhì)中的色素吸附作用較差,不能消除基質(zhì)干擾。在拉曼譜圖(B)中也沒(méi)有出現(xiàn)甲萘威的特征峰,說(shuō)明茶葉中甲萘威農(nóng)藥分子的拉曼譜峰受到茶葉基質(zhì)效應(yīng)的干攏,PSA凈化劑并不能消除茶葉的基質(zhì)效應(yīng)。

圖5 不同用量PSA對(duì)茶葉提取液基質(zhì)效應(yīng)的凈化處理效果圖(a)和SERS光譜(b)Fig.5 Purification effect(a)and SERS spectra(b)of tea extraction treated by different dosage of PSA

2.4.2 NBC優(yōu)化結(jié)果分析 圖6是不同NBC用量對(duì)茶葉中色素凈化效果圖(a)和SERS(b)。由凈化效果圖(a)可看出,當(dāng)NBC用量為15 mg時(shí),能消除大量色素,但凈化液中還能見(jiàn)到少量顏色;當(dāng)用量為20 mg時(shí),凈化液無(wú)色透明,說(shuō)明NBC凈化劑能吸附茶葉中的色素,以去除茶葉中色素的熒光效應(yīng)。當(dāng)NBC用量為20～25 mg時(shí),SERS圖(b)未出現(xiàn)甲萘威的特征峰,而當(dāng)NBC用量為30 mg時(shí),出現(xiàn)了甲萘威的1103、1213、1557 cm-1特征峰(圖中為1106、1215、1557 cm-1),說(shuō)明30 mg NBC的用量能消除茶葉成分對(duì)農(nóng)藥分子的基質(zhì)效應(yīng)。當(dāng)NBC用量繼續(xù)增加為35、40 mg時(shí),拉曼譜圖相較于NBC為30 mg時(shí),甲萘威特征峰無(wú)明顯變化。因此,本研究采用30 mg NBC的用量用于消除茶葉的基質(zhì)效應(yīng)。

圖6 不同用量NBC對(duì)茶葉提取液基質(zhì)效應(yīng)的凈化處理效果圖(a)及SERS光譜(b)Fig.6 Purification effect(a)and SERS spectra(b)of tea extraction treated by different dosage of NBC

2.5 茶葉中甲萘威農(nóng)藥殘留分析

圖7是含甲萘威農(nóng)藥殘留的茶葉提取液SERS,從圖7可知,當(dāng)甲萘威濃度降低時(shí),其特征峰強(qiáng)度也隨之減弱,濃度為3.61 mg/kg時(shí),1103、1213 cm-1處譜峰已無(wú)法識(shí)別,而1557 cm-1處譜峰信號(hào)清晰可見(jiàn);濃度為0.83 mg/kg時(shí),1557 cm-1處譜峰仍可辨出,而濃度為0.56 mg/kg時(shí),未見(jiàn)該特征譜峰,說(shuō)明本方法檢測(cè)茶葉中甲萘威農(nóng)藥的最低檢出濃度可達(dá)到0.83 mg/kg,符合我國(guó)規(guī)定甲萘威農(nóng)藥殘留最大限量標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)限1 mg/kg,單個(gè)樣本檢測(cè)可在10 min內(nèi)完成。

由圖7可知,1557 cm-1特征峰強(qiáng)度最強(qiáng),且峰型好,故選用1557 cm-1處的峰強(qiáng)度與茶葉中甲萘威濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,在濃度0.28～5.56 mg/kg范圍內(nèi),建立的相關(guān)曲線為y=0.1036x+1.8642,決定系數(shù)R2=0.9744。圖8是以1557 cm-1特征峰強(qiáng)度制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,由圖8可知,1557 cm-1特征峰強(qiáng)度與茶葉中甲萘威濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

圖7 甲萘威農(nóng)藥殘留的茶葉提取液SERS光譜Fig.7 SERS spectra of tea extracts containing carbaryl pesticide residues 注:a～j:5.56、5.00、3.61、3.06、2.22、 1.39、1.11、0.83、0.56、0.28 mg/kg。

圖8 以茶葉提取液為基質(zhì)的甲萘威溶液曲線Fig.8 Standard curve of carbaryl solution based on tea extraction

2.6 方法準(zhǔn)確度與精密度分析

向陰性茶葉提取液中加入甲萘威農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制2.5、4.17、5.28 mg/kg 3個(gè)濃度梯度的待測(cè)液,每個(gè)濃度測(cè)定3個(gè)平行樣本,得到方法的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,以檢驗(yàn)方法的準(zhǔn)確度和精密度,結(jié)果見(jiàn)表2。方法平均回收率在76.5%～94.9%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.87%～6.98%,說(shuō)明本方法用于分析茶葉中甲萘威農(nóng)藥殘留是準(zhǔn)確可靠的。

表2 茶葉中甲萘威的平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Table 2 Average recovery and relative standard deviation of carbaryl in tea

3 結(jié)論

本文研究茶葉中甲萘威農(nóng)藥殘留的表面增強(qiáng)拉曼光譜快速檢測(cè)方法。采用金溶膠為增強(qiáng)基底,對(duì)比分析PSA和NBC填料及其用量對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響,發(fā)現(xiàn)PSA對(duì)茶葉基質(zhì)的凈化效果較差,而NBC凈化效果明顯,并得出NBC填料的最優(yōu)用量為30 mg。結(jié)合密度泛函理論,確定了定性定量分析茶葉中甲萘威農(nóng)藥殘留的3個(gè)拉曼特征峰:1103、1213、1557 cm-1。在濃度0.28～5.56 mg/kg范圍內(nèi),以1557 cm-1處峰強(qiáng)度建立了茶葉中甲萘威農(nóng)藥殘留的定量分析曲線:y=0.1036x+1.8642,決定系數(shù)R2=0.9744。此方法平均回收率在76.5%～94.9%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.87%～6.98%結(jié)果表明該方法的準(zhǔn)確度和精密度較好。該方法分析茶葉中甲萘威農(nóng)藥殘留的最低檢出濃度為0.83 mg/kg,達(dá)到我國(guó)規(guī)定甲萘威農(nóng)藥殘留最大限量標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)限(1 mg/kg)。本方法前處理簡(jiǎn)單、單個(gè)樣本檢測(cè)在10 min內(nèi)完成,而采用高效液相色譜法約需30 min,且檢測(cè)成本高[18]。該研究可為茶葉中農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)裝置開(kāi)發(fā)提供方法支持。