子癇前期患者血清PTEN水平變化及其與氧化應(yīng)激和妊娠結(jié)局的關(guān)系

王玉婷 ，劉亞軍，孫妍，李文婷

(青島市婦女兒童醫(yī)院，青島266011)

子癇前期(preeclampsia，PE)是常見的妊娠期疾病，主要表現(xiàn)為在妊娠20周以后出現(xiàn)的高血壓、高蛋白尿，可對患者的心、肝、腎、腦等重要臟器造成一定損傷，并且可導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)缺氧、生長受限甚至胎死宮內(nèi)，對患者及胎兒的健康造成巨大威脅[1]。第10號(hào)染色體缺失性磷酸酶和張力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN)是一種抑癌基因，可通過負(fù)調(diào)控PI3K/AKT途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、遷移等，過往研究[2，3]多圍繞其與惡性腫瘤展開。然而近年研究[4]顯示，PTEN在PE患者胎盤組織及外周血中呈異常表達(dá)，且表達(dá)水平與新生兒的預(yù)后有關(guān)，提示其可能在PE的疾病進(jìn)展中起到一定的作用。氧化應(yīng)激反應(yīng)的激活是PE發(fā)病的重要環(huán)節(jié)[5]，而PTEN是一種與氧化應(yīng)激密切相關(guān)的基因，但目前少有PTEN在PE氧化應(yīng)激中的作用機(jī)制相關(guān)研究報(bào)道。我們觀察了PE患者血清PTEN的表達(dá)變化，進(jìn)一步分析其與PE患者氧化應(yīng)激指標(biāo)及不良妊娠結(jié)局的關(guān)系，以探討PTEN在PE中的表達(dá)及臨床意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年3～12月間我院收治的PE患者116例，均符合以下納入排除標(biāo)準(zhǔn)，納入標(biāo)準(zhǔn)：參考第八版《婦產(chǎn)科學(xué)》中關(guān)于PE的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，入選病例均確診為PE；均為單胎妊娠；均為自然受孕；④對本次研究內(nèi)容知情，且在知情同意書中簽字。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有惡性腫瘤者；合并有其他妊娠期疾病者；合并重要臟器功能損傷者；④合并精神疾病、認(rèn)知功能障礙、免疫功能障礙者；⑤不在我院生產(chǎn)者。根據(jù)疾病嚴(yán)重程度[6]將116例PE患者分為重度PE組52例、輕度PE組64例。另選取同期在我院體檢的健康妊娠女性50例作為對照組。三組一般資料見表1。重度PE組的舒張壓和收縮壓高于輕度PE組，重、輕度PE組的舒張壓、收縮壓、體質(zhì)量指數(shù)高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。本次研究通過我院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1.2 各組血清血清PTEN、8-iso-PGF2α、MDA、SOD檢測 抽取三組空腹靜脈血5 mL，采用3 000 r/min離心10 min，收集上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清PTEN、8-異前列腺素F2α(8-iso-prostaglandin F2α，8-iso-PGF2α)，采用硫代巴比妥酸比色法檢測血清丙二醛(malondialdehyde，MDA)，采用黃嘌呤氧化酶法檢測血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD),相關(guān)試劑盒購于南京建成生物工程研究所，嚴(yán)格遵循相關(guān)試劑盒說明書進(jìn)行操作。重復(fù)3次，取平均值。

表1 三組一般資料比較

注：與對照組比較，#P<0.05；與輕度PE組比較，*P<0.05。

1.3 妊娠結(jié)局觀察 PE患者均隨訪至分娩，記錄母親及新生兒的健康情況，若出現(xiàn)胎盤早剝、子癇、HELLP綜合征、醫(yī)源性早產(chǎn)或引產(chǎn)、胎兒生長受限、胎兒窘迫、胎兒死亡等中的任意一項(xiàng)或多項(xiàng)則視為存在不良妊娠結(jié)局。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料均符合正態(tài)分布，以表示，多組間比較采用單因素方差分析，多組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；Pearson相關(guān)性分析法分析血清PTEN水平與PE患者體質(zhì)量指數(shù)、舒張壓、收縮壓及血清8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性；采用非條件Logistic多元回歸分析不良妊娠結(jié)局的獨(dú)立危險(xiǎn)因素以妊娠結(jié)局為應(yīng)變量，其余指標(biāo)為自變量，建立非條件Logistic多元回歸模型。不良妊娠結(jié)局賦值為1，正常妊娠結(jié)局賦值為0，自變量均以均值為界，低于均值則為低表達(dá)，高于均值則為高表達(dá)，其中低表達(dá)賦值為1，高表達(dá)賦值為0。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

三組血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比較見表2。

表2 三組血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比較

注：與對照組比較，#P<0.05；與輕度PE組比較，*P<0.05。

116例PE患者中正常妊娠80例,不良妊娠36例。不同妊娠結(jié)局PE患者血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比較見表3。

表3 不同妊娠結(jié)局PE患者血清PTEN、8-iso-PGF2α、SOD、MDA水平比較

注：與正常妊娠者比較，＊P<0.05。

血清PTEN水平與PE患者舒張壓、收縮壓及血清8-iso-PGF2α、MDA水平呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.382，-0.367，-0.451，-0.432；P均<0.05)，與血清SOD水平呈正相關(guān)(r=0.534；P<0.05)，與體質(zhì)量指數(shù)無關(guān)(r=-0.138；P>0.05)。

血清PTEN、SOD水平過低是PE患者不良妊娠結(jié)局的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05),見表4。

表4 PE患者不良妊娠結(jié)局的非條件Logistic多元回歸分析

3 討論

PE是導(dǎo)致孕婦和圍產(chǎn)兒死亡的重要原因之一，鄒郁松等[7]對7 794例高危及危重孕產(chǎn)婦的臨床資料進(jìn)行整理，結(jié)果顯示重度PE和(或)子癇是排在首位的危重疾病，占比高達(dá)59.25%。目前PE的具體發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，兩階段學(xué)說是關(guān)于PE發(fā)病機(jī)制的經(jīng)典理論，其認(rèn)為PE發(fā)病主要分為兩個(gè)階段，第一階段為滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤能力下降，導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤子宮螺旋動(dòng)脈過淺，使得胎盤出現(xiàn)缺血、缺氧現(xiàn)象，進(jìn)而促進(jìn)大量的胎盤因子分泌，第二階段為胎盤因子進(jìn)入母體血液循環(huán)，激活炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞功能受損，進(jìn)而引發(fā)一系列的病變[8]。從兩階段學(xué)說可以看出，氧化應(yīng)激的激活是PE的重要病理改變。PTEN是一種蛋白酪氨酸磷酸酯酶，其催化活性依賴于高反應(yīng)活性的半胱氨酸，然而半胱氨酸極易被氧化，因此在過氧化的壞境下易導(dǎo)致PTEN氧化失活[9]。除此之外，PTEN也可以調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激反應(yīng)，楊玲竹等[10]研究顯示，PTEN可通過正向調(diào)控抗氧化蛋白Peroxiredoxin Ⅱ的表達(dá)來起到抗氧化作用。由此可見，PTEN與氧化應(yīng)激密切相關(guān)，然而PTEN是否能通過介導(dǎo)氧化應(yīng)激來參與PE的疾病進(jìn)展還有待進(jìn)一步的研究。

氧化應(yīng)激是指體內(nèi)氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡，主要表現(xiàn)為活性氧、氧化產(chǎn)物增多，抗氧化酶減少，導(dǎo)致機(jī)體被過度氧化。8-iso-PGF2α是氧自由基攻擊細(xì)胞膜上的花生四烯酸而形成的穩(wěn)定產(chǎn)物，而MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的終末產(chǎn)物，二者均是常見的過氧化產(chǎn)物，SOD是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶，是機(jī)體消除氧自由基的重要蛋白[11，12]。本研究結(jié)果顯示，重、輕度PE組血清中8-iso-PGF2α、MDA水平高于對照組，而SOD水平低于對照組，說明PE患者體內(nèi)的存在明顯的氧化應(yīng)激。本研究還顯示，PTEN在PE患者血清中呈低表達(dá)，且其表達(dá)水平與舒張壓、收縮壓、8-iso-PGF2α、MDA呈負(fù)相關(guān)，與SOD呈正相關(guān)。血管內(nèi)皮功能受損是血壓升高的病理基礎(chǔ)[13，14]。閆博陽等[15]研究顯示，PTEN可逆轉(zhuǎn)氧化低密度脂蛋白對動(dòng)脈粥樣硬化小鼠血管內(nèi)皮功能造成的損傷，其作用機(jī)制可能與STAT3信號(hào)通路的激活有關(guān)。另一方面，PTEN也可以通過調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激來減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞的氧化損傷。因此可以推測，PTEN主要通過調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮功能來影響血壓。Iwasa 等[16]研究顯示，PTEN表達(dá)下調(diào)可導(dǎo)致氧化產(chǎn)物增多。研究[17]顯示，PTEN可降低細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平，并可調(diào)控Cu/Zn-SOD蛋白的表達(dá)。由此可見，PTEN參與了氧化與抗氧化系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，可抑制機(jī)體的氧化應(yīng)激，進(jìn)而影響8-iso-PGF2α、MDA、SOD等的水平。臨床治療PE的主要思路是降低患者的血壓、改善妊娠結(jié)局，然而由于孕期治療受到諸多限制，早產(chǎn)、胎兒生長受限、胎兒窘迫等不良妊娠結(jié)局依然時(shí)有出現(xiàn)[18]。本研究結(jié)果顯示，PTEN、SOD水平過低是PE患者不良妊娠結(jié)局的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。這可能是由于PTEN、SOD水平過低會(huì)導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)氧化性損傷，加重PE患者的病情，進(jìn)而影響患者的妊娠結(jié)局。然而本次研究選取的病例數(shù)較少，且為單中心研究，以上結(jié)論還有待多中心、多病例數(shù)的研究進(jìn)行驗(yàn)證。

綜上所述，PTEN在PE患者血清中呈低表達(dá)，且其表達(dá)水平與機(jī)體的氧化應(yīng)激程度有關(guān)。血清PTEN水平過低是PE患者不良妊娠結(jié)局的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。血清PTEN可能在PE的疾病進(jìn)展中起到一定的作用。