EDTA抗凝法檢驗(yàn)診斷與假性血小板減少癥患者的診斷價(jià)值

程金琳　劉祝波

【摘 要】目的：分析EDTA抗凝法檢測(cè)同假性血小板減少癥診斷之間的關(guān)聯(lián)性。方法：以36例（2018年4月～9月）血常規(guī)檢查者為例，分別收集枸緣酸鈉抗凝血、EDTA抗凝血，分析血小板計(jì)數(shù)，并制作血涂片，進(jìn)行鏡檢，以手工方式檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)情況，進(jìn)行對(duì)照分析。結(jié)果：與手工法、枸緣酸鈉抗凝相比，EDTA抗凝法獲得的血小板計(jì)數(shù)明顯更少，而白細(xì)胞計(jì)數(shù)更多（P<0.05）。結(jié)論：EDTA抗凝檢測(cè)法可能引起受檢者假性血小板減少癥的發(fā)生，在此基礎(chǔ)上，會(huì)導(dǎo)致誤診、漏診等情況發(fā)生。

【關(guān)鍵詞】EDTA抗凝法;假性血小板減少癥;檢驗(yàn)診斷

【中圖分類號(hào)】R72【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-3783（2019）12-03--01

前言：以EDTA作為抗凝劑實(shí)施全血細(xì)胞檢驗(yàn)，一定程度上會(huì)誘發(fā)假性血小板計(jì)數(shù)減少情況，可能會(huì)使臨床檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性受到影響，從而降低整體診斷結(jié)果的準(zhǔn)確率，為了避免、減少這種影響，在行DETA抗凝檢測(cè)時(shí)，應(yīng)對(duì)相關(guān)輔助檢查措施積極使用，使結(jié)果診斷準(zhǔn)確性得以保證[1]。本文選取了我院接收的血常規(guī)檢查者，實(shí)施EDTA 抗凝法、手工法、枸緣酸鈉法對(duì)血小板計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，探究對(duì)臨床診斷的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

研究時(shí)間：2018年4月～9月，所選對(duì)象：進(jìn)行血常規(guī)檢查者，共36例，男女比例19：17，年齡18～75（平均46.58±9.56）歲。本次研究，是在征得患者知情同意后方開(kāi)始實(shí)施，且將患有嚴(yán)重意識(shí)障礙、精神疾病，無(wú)法臨床檢查診斷配合者排除在外。

1.2 方法

1.2.1 檢驗(yàn)儀器及相應(yīng)試劑

檢測(cè)儀器：貝克曼DxH800血細(xì)胞分析儀（貝克曼庫(kù)爾特公司）。其他物品：溶血?jiǎng)⑷鹗先疽?、全自?dòng)顯微鏡、1%濃度草酸銨稀釋液、蒸餾水、EDTA-K2抗凝管、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、緣酸鈉真空抗凝管、白細(xì)胞稀釋液等。

1.2.2 檢查方法

手工檢驗(yàn)法：以《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范》為標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施檢查操作，首先，醫(yī)護(hù)人員要對(duì)患者進(jìn)行手指末梢血采集（20μl），當(dāng)做血液標(biāo)本，然后融入草酸銨血小板（體積為0.38ml）中稀釋、搖勻，當(dāng)完成徹底溶血過(guò)程后，充分震蕩，滴加血小板懸液（1滴），室溫放置15min，后用顯微鏡對(duì)其中的血小板計(jì)數(shù)進(jìn)行檢測(cè)。白細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)量方法與上述同。

儀器檢驗(yàn)法：應(yīng)用全血模式，EDTA-K2真空抗凝管、枸緣酸鈉真空抗凝管分別收集研究對(duì)象靜脈血，將其混勻，對(duì)其中的白細(xì)胞、血小板進(jìn)行全自動(dòng)細(xì)胞分析儀檢測(cè)，所有操作流程均嚴(yán)格按照操作規(guī)范實(shí)施;稀釋血液模式設(shè)置，對(duì)患者手指末梢血進(jìn)行10ml采集，于標(biāo)準(zhǔn)量稀釋液中融入并混勻，室溫放置15min，統(tǒng)計(jì)白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)。

血涂片染色：枸緣酸鈉抗凝血、EDTA-K2抗凝血各取1滴，制作血涂片，予以瑞氏染色，實(shí)施鏡檢，應(yīng)用顯微鏡觀察，分析血小板形態(tài)，統(tǒng)計(jì)數(shù)量。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察所有檢查患者的假性血小板減少癥發(fā)生、不同檢驗(yàn)方法致血小板減少情況，收集所有數(shù)據(jù)并整理，完成后詳細(xì)臨床記錄。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS24.0軟件統(tǒng)計(jì)、整理數(shù)據(jù)，（）表示計(jì)量資料，t檢驗(yàn)。當(dāng)P<0.05時(shí)，數(shù)據(jù)間對(duì)比有差異性。

結(jié)果

2.1 假性血小板減少癥發(fā)生情況

7例因EDTA抗凝法引起假性血小板減少癥，發(fā)生率19.44%。

2.2 三種檢測(cè)法的檢測(cè)結(jié)果比較

與其他兩種方法比，EDTA抗凝法差異顯著（P<0.05），血小板計(jì)數(shù)更少、白細(xì)胞計(jì)數(shù)更多

討論

通常情況下，EDTA并不會(huì)影響人體血液中血小板形態(tài)、血小板分布，會(huì)在血細(xì)胞數(shù)量檢驗(yàn)中被廣泛應(yīng)用。本研究結(jié)果顯示，EDTA依賴性假性血小板減少癥受檢者占總受檢者的19.44%，說(shuō)明部分受檢者體內(nèi)的血小板分布情況，會(huì)受到EDTA一定影響，致血小板數(shù)量減少情況發(fā)生。臨床上對(duì)該情況的發(fā)生要相當(dāng)重視，及時(shí)使用其他方法檢測(cè)血小板，使漏診、誤診率降低，檢查診斷準(zhǔn)確性提高。臨床進(jìn)行血細(xì)胞分析時(shí)，EDTA作為一種抗凝劑具有較多的使用優(yōu)勢(shì)，但同時(shí)也會(huì)使血小板凝聚作用被削弱，減少血小板計(jì)數(shù)[2]。較之枸緣酸鈉抗凝法、手工檢測(cè)法，EDTA 抗凝法檢測(cè)結(jié)果存在顯著差異，白細(xì)胞計(jì)數(shù)多達(dá)（25.23±10.19）×109/L，而血小板計(jì)數(shù)低至（44.31±21.01）×109/L。此種現(xiàn)象發(fā)生原因諸多：其一，與EDTA-K2可作用于血液引發(fā)免疫介導(dǎo)、形成血小板抗體有關(guān)，可引發(fā)凝集;其二，EDTA-K2可作用于血小板，并發(fā)揮活化作用，改變血小板膜層表面抗原結(jié)構(gòu)，血小板、血漿抗體結(jié)合，在多種作用下激活血小板纖維蛋白受體，引發(fā)血小板衛(wèi)星現(xiàn)象。所以測(cè)量出的血小板計(jì)數(shù)便出現(xiàn)了偏低現(xiàn)象。若血小板體積增大，已逐漸同白細(xì)胞相近，檢測(cè)時(shí)便有可能被誤認(rèn)成白細(xì)胞，進(jìn)而產(chǎn)生血小板假性減少、白細(xì)胞假性增多現(xiàn)象。目前臨床上將手工計(jì)數(shù)法作為檢驗(yàn)準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)金標(biāo)準(zhǔn)，主要應(yīng)用于血小板計(jì)數(shù)異常的復(fù)檢工作中，但是存在著精密度差、準(zhǔn)確性低的劣勢(shì)。為保證血小板檢驗(yàn)準(zhǔn)確性，對(duì)于依賴性假性血小板減少癥可疑的血液標(biāo)本，染色涂片處理便顯得尤為關(guān)鍵，完成后再觀察其血小板分布情況，一旦有血小板大量聚集情況產(chǎn)生，要實(shí)施復(fù)檢處理。若用枸緣酸鈉抗凝劑對(duì)血小板計(jì)數(shù)復(fù)查，應(yīng)在得出復(fù)查結(jié)果后，同手工檢測(cè)結(jié)果相比較，若差異性較大，還應(yīng)深入臨床檢測(cè)。

綜上所述，EDTA 抗凝法、假性血小板減少癥關(guān)系密切，應(yīng)用EDTA抗凝法行血常規(guī)檢測(cè)，具有一定的假性血小板減少發(fā)生幾率，檢測(cè)結(jié)果受其影響，進(jìn)而提升誤診或漏診率，可同時(shí)給予相關(guān)輔助檢測(cè)法。

參考文獻(xiàn)：

李建.EDTA抗凝法檢驗(yàn)診斷與假性血小板減少癥患者的診斷[J].中國(guó)民康醫(yī)學(xué)，2016，28（6）：59-60.

查有艷.EDTA依賴性假性血小板減少癥及檢測(cè)方法研究[J].中外女性健康研究，2017（4）：135-135.