IL-8基因多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌發(fā)病風(fēng)險相關(guān)的Meta分析

謝 玲，李艷菊，張春莉

(延安大學(xué)附屬醫(yī)院病理科，陜西 延安 716000)

大腸癌(Colorectal Cancer,CRC)是世界上最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在男性中位于第二，在女性中位于第三[1]，生態(tài)和移民研究都已經(jīng)證明了環(huán)境、遺傳因素、生活習(xí)慣以及飲食都在大腸癌變的過程中起著重要作用[2-3]。大腸癌逐年升高的發(fā)病率和死亡率給人們的健康帶來了巨大的威脅和沉重的經(jīng)濟負擔(dān)，不幸的是大腸癌通常在晚期診斷出，從而導(dǎo)致了預(yù)后的不佳，所以預(yù)防和早期診斷工作顯得尤為重要[4]。從遺傳學(xué)觀點,可以將大腸癌分為遺傳性和非遺傳性兩種，常見的遺傳性大腸癌包括遺傳性非息肉性大腸癌和家族性腺瘤性息肉病，約占大腸癌發(fā)病的5%～10%；非遺傳性大腸癌即為散發(fā)性大腸癌(Sporadic Colorectal Cancer.SRC)，占大腸癌發(fā)病的90%以上，已經(jīng)有可靠的基因檢測方法用于家族性大腸癌的篩查[5]，然而對于散發(fā)性大腸癌的病因仍不十分清楚，一些研究表明單核苷酸多態(tài)性可能會與散發(fā)性大腸癌相關(guān)[6]。

IL-8是一種趨化因子，是炎癥反應(yīng)主要介質(zhì)之一，被認為在癌癥的血管生長中起著重要作用[7]，其過度表達見于人類多種腫瘤中，并與腫瘤的轉(zhuǎn)移和浸潤相關(guān)[8]，人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)IL-8 251T>A (rs4073)多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌風(fēng)險相關(guān)，但結(jié)果不一致，而且樣本量的大小對研究結(jié)果的可靠性有重要的影響，考慮到這些研究的樣本量大小不等，不同的研究可能存在較大的差異。通過meta分析綜合各項研究擴大樣本量，應(yīng)用合理的檢驗?zāi)Ｐ?，提高檢驗效能和結(jié)果的穩(wěn)定性，說明IL8基因多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌的相關(guān)關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 文獻檢索

檢索中文數(shù)據(jù)庫中國學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(CNKI)、萬方數(shù)據(jù)庫、中國生物醫(yī)學(xué)文獻數(shù)據(jù)庫 ( CBM)、維普數(shù)據(jù)庫(VIP)，以“大腸癌or結(jié)直腸癌or大腸腫瘤or結(jié)直腸腫瘤”、“IL8or白介素8”、“多態(tài)性”為主題詞；檢索英文數(shù)據(jù)庫PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library，以“interleukin 8 or interleukin-8 or IL8 or IL-8”、 “cancer or tumor or carcinoma”、 “colorectal or colon or rectal” 、“polymorphism or polymorphisms”為主題詞進行檢索至2018年4月15日之前公開發(fā)表的文獻。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究內(nèi)容為IL8-251T>A (rs4073)多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌發(fā)病風(fēng)險的病例對照研究；②標(biāo)本為血液；③大腸癌診斷均經(jīng)病理確診；④對照組符合Hardy-Weinberg平衡，并且STREGA評分>3分;④文獻語種僅限中英文。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①重復(fù)研究，同一團隊研究結(jié)果重復(fù)發(fā)表以樣本量最大、年限最近為準(zhǔn)；②研究對象不是人類，會議摘要，檢測方法、手段描述不準(zhǔn)確，不能提取數(shù)據(jù)的研究；③家系研究。

1.3 文獻篩選和數(shù)據(jù)提取

由兩位研究者獨立篩選提取，按STREGA標(biāo)準(zhǔn)對文獻評價，若有分歧時，則與第三位研究者討論后確定，直至所有的數(shù)據(jù)相同。每篇文獻所提取的信息主要包括以下方面：第一作者姓名、發(fā)表年限、研究對象的特征和來源、病例組和對照組的等位基因和基因型分布、對照組是否符合Hardy-Weinberg平衡等。納入研究的方法學(xué)質(zhì)量評價參照STREGA標(biāo)準(zhǔn)，包括：①樣本量充分與否；②診斷標(biāo)準(zhǔn)交代清楚與否；③分組配匹情況；④對照組與病例組是否具有可比性，對照組基因型分布是否符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律；⑤基因檢測方法合理與否；⑥數(shù)據(jù)充分與否。以上6項，每滿足一項記為1分，總分大于或等于3分者為質(zhì)量可靠。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用χ2檢驗分析各研究中對照組的Hardy-Weinberg平衡(HWE),若P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義，則認為不符合哈溫平衡。應(yīng)用ReviewMan5.3和Stata12.0進行Meta分析，采用比值比 ( Odds ratios,OR )及其 95% 置 信 區(qū) 間 ( Confidence intervals ,CI) 表示IL8-251T>A多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌發(fā)病風(fēng)險強度關(guān)系，并分別做等位基因模型(A vs T)、純合子模型(AA vs TT)、雜合子模型(AT vs TT)、顯性模型(AA+AT vs TT)、隱性模型(AA vs AT+ TT)的比較。對納入的研究進行異質(zhì)性檢驗，若P>0.1、I2<50%，研究結(jié)果同質(zhì)，則采用固定效應(yīng)模型，相反則采用隨機效應(yīng)模型。發(fā)表偏倚采用ReviewMan5.3繪制漏斗圖和Statal2.0軟件Egger’S回歸法和Begg’s秩相關(guān)法定量評估，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢索結(jié)果

初檢出文獻共61篇，Endnote8.0去除重復(fù)后剩余55篇，按文獻納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)篩選后共納入8篇文獻，共計大腸癌3 340例，對照4 757例，文獻篩選流程及結(jié)果見圖1。

圖1文獻篩選流程及結(jié)果

所納入的8項研究中3項研究來自北美洲，其余均來自歐洲，研究人群種族均為高加索人群，有兩項研究是以醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例對照研究，剩下6項研究均是以社會為基礎(chǔ)的病例對照研究。其基本特征見表1。

表1 納入研究的基本特征

注PCC1：以社會為基礎(chǔ)的病例對照研究；HCC2：以醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例對照研究；HWE3: Hardy-Weinberg平衡

2.2 Meta分析結(jié)果

用Stata12.0對納入的8篇文獻進行合并分析，其結(jié)果顯示以下5種模型：等位基因模型(A vs T)、純合子模型(AA vs TT)、雜合子模型(AT vs TT)、顯性模型(AA+AT vs TT)、隱性模型(AA vs AT+ TT)均與散發(fā)性大腸癌發(fā)病風(fēng)險無關(guān)，A vs T OR及95%CI為1.058(0.946～1.185)，P為0.323；AA vs TT OR及95%CI為1.110(0.890～1.384)，P為0.356；AT vs TT OR及95%CI為1.039(0.934～1.157)，P為0.482；AA+AT vs TT OR及95%CI為1.075(0.972～1.188)，P為0.160；AA vs TT+AT OR及95%CI為1.121(0.942～1.333)，P為0.199。同樣以對照組來源不同進行亞組分析，結(jié)果顯示在以下5種基因模型中仍然無統(tǒng)計學(xué)意義，具體見表2。

表2 IL8-251T>A合并OR及亞組分析結(jié)果

R:隨機效應(yīng)模型；F：固定效應(yīng)模型

圖2 IL-8-251 T>A多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌易感性森林圖(等位基因模型A vs T)

2.3 敏感性分析

為了評估本次合并結(jié)果的可靠性，進行敏感性分析，對以上各遺傳模型分別用隨機效應(yīng)模型和固定效應(yīng)模型，其結(jié)果變化不大；在以上各模型中對納入的研究依次剔除一篇重新進行Meta合并，其結(jié)果變化也不大，說明本次研究結(jié)果可靠。

2.4 發(fā)表偏倚

采用ReviewMan5.3對總體納入的8篇文獻做漏斗圖定性分析，結(jié)果如圖3所示，用Stata12.0對納入的8篇文獻進行定量分析，結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，未發(fā)現(xiàn)發(fā)表偏倚，結(jié)果如表3所示。

圖3 納入文獻漏斗圖

基因型Begg’stestZPEegg’stestZPAvsT0.740.4580.750.482AAvsTT0.740.4580.750.481ATvsTT1.240.2161.600.160AA+ATvsTT0.490.6211.320.234AAvsTT+AT0.250.8050.280.791

3 討論

近些年來，研究發(fā)現(xiàn)遺傳多態(tài)性可能是疾病易感性和嚴重性的決定因素，多個基因的變異被認為在決定個體如何在細胞水平對包括炎癥在內(nèi)的各種環(huán)境條件作出反應(yīng)方面起著關(guān)鍵作用[17]。已知炎癥是大腸癌易感因素之一，那么調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的基因可能是一組用于大腸癌易感性的候選基因[18]。白介素(IL)-8是一種趨化因子，是炎癥反應(yīng)的主要介質(zhì)之一，被認為在癌癥的發(fā)病機理中起著重要作用，在IL-8基因中檢測到幾種多態(tài)性，而在啟動子區(qū)域的251個位置(rs4073)中有一個共同的多態(tài)性該基因的轉(zhuǎn)錄活動有關(guān)[17]。目前，國外已有多項研究探索IL-8 251T>A多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌關(guān)系，但結(jié)果不盡一致，有研究[12,14]表示IL-8 251T>A多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌相關(guān)，而Basavaraju U[13]表示該基因多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌發(fā)病風(fēng)險無明顯相關(guān)性。馬靜靜[19]等研究過IL-8 251T>A多態(tài)性與大腸癌易感性關(guān)系，得出其與大腸癌患病風(fēng)險有關(guān)的結(jié)論，但她未排除對照組不符合Hardy-Weinberg平衡的研究，也并未作出相應(yīng)的敏感性分析，因此本研究排除5篇對照組不符合Hardy-Weinberg平衡的文獻再次Meta分析評價IL-8 251T>A多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌發(fā)病風(fēng)險關(guān)系，為臨床診斷和防治提供依據(jù)。

本研究最終納入文獻8篇，共計病例3 440例，對照4 757例。Meta分析結(jié)果提示在所有的基因模型中，病例組與對照組無統(tǒng)計學(xué)差異，表明IL-8 251T>A多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌發(fā)病風(fēng)險無明顯相關(guān)。進一步以對照組來源不同進行亞組分析，結(jié)果表明在以社會為基礎(chǔ)的病例對照研究和以醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例對照研究中均未發(fā)現(xiàn)該基因多態(tài)性與散發(fā)性大腸癌發(fā)病風(fēng)險相關(guān)。

雖然本研究有系統(tǒng)的研究設(shè)計方案，但仍存在一定的局限性：①大腸癌受環(huán)境、飲食、遺傳等多方面因素的影響，由于缺乏年齡、性別、飲食等原始資料，本次meta分析并未分析這些重要的混雜因素；②經(jīng)驗證本研究雖然不存在發(fā)表偏倚，但由于僅納入公開發(fā)表的中英文原始文獻，所以還是有潛在發(fā)表偏倚的可能；③納入文獻種族全是白種人，缺乏亞洲、非洲地區(qū)的研究，所以該結(jié)果是否同樣存在于中國病人中，有待進一步考證。

本次Meta分析未發(fā)現(xiàn)IL-8 251T>A多態(tài)性與大腸癌易感性有關(guān)，考慮到本次有限的樣本量，期待未來更多高質(zhì)量、大樣本、多中心的相關(guān)研究，特別是亞洲人群的研究，進一步評價該基因多態(tài)性與大腸癌易感相關(guān)性，為臨床診治提供理論依據(jù)。