延胡索中重金屬及有害元素的測(cè)定

李雅萌，王亞茹，周柏松，李平亞，劉金平，楊娜

（吉林大學(xué)藥學(xué)院，長(zhǎng)春 130021）

延胡索為罌粟科植物延胡索（Corydalis yanhusuo W.T.Wang）的干燥塊莖，性味辛、苦、溫，是傳統(tǒng)的止痛類中藥材，在我國(guó)用藥歷史悠久，毒性低、安全性高、無(wú)成癮性，為非麻醉性鎮(zhèn)痛藥[1]。延胡索中含有生物堿、甾醇、三萜類等多種化學(xué)成分[2-6]，生物堿類化合物為其主要活性成分[7-9]，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)這些生物堿類化合物具有活血、利氣、止痛等多種藥理活性[10-11]。此外，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，延胡索還具有催眠、抗心肌缺血[12]、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、降壓以及抗胃腸潰瘍[13]、抗腫瘤[14]、抗炎、抗菌、抗病毒、提高抗應(yīng)激能力等[15-16]藥理作用。

生長(zhǎng)在土壤中的植物類藥材含有有害殘留物質(zhì)或污染物質(zhì)的概率較高，其種類主要是殘留農(nóng)藥、重金屬和生物毒素等。重金屬及有害元素在人體內(nèi)代謝緩慢，容易積累，對(duì)人體產(chǎn)生危害[17]，因此，重金屬及有害元素是評(píng)價(jià)中藥材及中藥飲片安全性的重要指標(biāo)之一。藥材中的重金屬及有害元素主要是指鉛（Pb）、汞（Hg）、鎘（Cd）、銅（Cu）、鉍（Bi）、銻（Ti）、錫（Sn）、砷（As）等。本實(shí)驗(yàn)采用電感耦合等離子體-質(zhì)譜（ICPMS）法測(cè)定延胡索藥材中重金屬及有害元素含量，為延胡索的進(jìn)一步研究和應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 試驗(yàn)材料

延胡索藥材由吉林金寶藥業(yè)股份有限公司提供，經(jīng)吉林大學(xué)藥學(xué)院李平亞教授鑒定為罌粟科植物延胡索（C.yanhusuo W.T.Wang）的干燥塊莖。

1.2 儀器與試劑

7500a型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（美國(guó)Agilent公司）；AL104型電子天平（瑞士Mettler2Toledo公司）；Milli-Q超純水機(jī)（美國(guó)Millipore公司）；720電熱板（浙江省諸暨縣馬劍電熱儀器廠）；標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩200目篩（浙江上虞市張興紗篩廠）。

Cu、鎳（Ni）、鉻（Cr）、Pb、Cd、Sn、鈷（Co）、Hg、As 9 種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（10 mg/L），銦（In）、銠（Rh）單元素內(nèi)標(biāo)溶液（50mg/L），鋰（Li）、釔（Y）、Co、鉍（Bi）質(zhì)譜調(diào)諧液（10mg/L）（Agilent公司）；超純水為18.2M/cm，硝酸為優(yōu)級(jí)純，氫氟酸為色譜純。

試驗(yàn)用器皿均用10%硝酸浸泡過(guò)夜，用超純水沖洗后備用。本實(shí)驗(yàn)所用各種酸均經(jīng)亞沸騰2次蒸餾后使用。

2 方法

2.1 儀器工作參數(shù)

用 Li、Y、Co、Bi調(diào)諧液（10mg/L）對(duì)儀器進(jìn)行最佳工作條件的選擇，使儀器的各項(xiàng)參數(shù)均達(dá)到測(cè)量指標(biāo)，條件參數(shù)見(jiàn)表1。

表1 儀器工作條件參數(shù)Tab.1 Working condition parameter of instrument

2.2 供試品溶液的制備

將延胡索樣品粉碎，精密稱取樣品0.2 g于5 mL聚四氟乙烯溶樣彈中，加入1.0 mL硝酸及0.5 mL雙氧水，在120℃的電熱板上加熱至液體呈濕鹽狀，加入1.4 mL氫氟酸、1.6 mL硝酸，加蓋，放入恒溫干燥箱，190℃保持48h。在箱內(nèi)自然冷卻至室溫后，在120℃的電熱板上，蒸至溶液呈濕鹽狀，冷卻，加50%硝酸3.0mL，加蓋，放入恒溫干燥箱，150℃保持12h。冷卻后，將消解液移至50 mL聚氯乙烯樣品瓶，用高純水定容至刻度，即得供試品溶液。按照上述同樣的方法制備空白試樣。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密吸取9種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別用3%HNO3溶液逐級(jí)稀釋成各系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.4 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密吸取In、Rh標(biāo)準(zhǔn)溶液，用3%HNO3溶液稀釋制成1μg/L的內(nèi)標(biāo)溶液。

3 結(jié)果與討論

3.1 線性關(guān)系與檢出限

在設(shè)定的工作參數(shù)下，測(cè)定各元素標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程。測(cè)定空白溶液10次，根據(jù)10次測(cè)定結(jié)果計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)偏差，以3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差作為儀器檢出限，結(jié)果各元素的檢測(cè)限在0.001 6～0.022 7之間。見(jiàn)表2。

表2 線性關(guān)系及檢出限Tab.2 Linear relationship and Detection limit

續(xù)表2

3.2 精密度試驗(yàn)

在表1條件下，取同一標(biāo)準(zhǔn)品溶液平行測(cè)定6次，計(jì)算出各元素的精密度，所測(cè)各元素RSD在1.13%～3.16%之間，表明儀器的精密度良好。

3.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取延胡索樣品粉末6份，按照“2.2”項(xiàng)下方法平行制備供試品溶液，“2.1”項(xiàng)下儀器條件進(jìn)行測(cè)定，6次重復(fù)進(jìn)樣的測(cè)定結(jié)果，各元素RSD在1.02%～3.25%之間，表明重復(fù)性良好。

3.4 加樣回收試驗(yàn)

為驗(yàn)證方法準(zhǔn)確性，對(duì)延胡索樣品中各元素做加樣回收試驗(yàn)。制備低、中、高3個(gè)濃度的供試品溶液，分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定結(jié)果如表3所示，加樣回收率為96.0%～100.4%。

表3 加樣回收率Tab.3 Recovery of sample （%）

3.5 樣品測(cè)定結(jié)果

將“2.2”項(xiàng)下制備的各供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下儀器條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 延胡索中重金屬及有害元素含量測(cè)定結(jié)果Tab.4 Content of 9 kinds of heavy metals and harmful elements in corydalis rhiozoma

4 結(jié)論

中藥材生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，重金屬及有害元素易在藥材體內(nèi)蓄積，盡管Mn、Cu、Zn等重金屬是生命活動(dòng)所需要的微量元素，但Hg、Ag、Cd等大部分重金屬并非生命活動(dòng)所必須?？刂浦兴幹兄亟饘偌坝泻υ氐暮渴谴_保中藥“安全、有效、可控”的首要問(wèn)題之一[18]。我國(guó)《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》[19]中限定含量 Pb≤5.0g/g、Cd≤0.3g/g、Hg≤0.2g/g、As≤2.0g/g、Cu≤20.0g/g。本試驗(yàn)采用ICP-MS法測(cè)定延胡索藥材中9種重金屬及有害元素含量，結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)藥材中 Pb、Cd、Hg、As、Cu 5 種有害金屬含量均低于限量值，符合標(biāo)準(zhǔn)，可用于進(jìn)一步的研究。